内容摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6页 |
第一章 绪论 | 第11-21页 |
1.1 应激颗粒的形成机制 | 第11-12页 |
1.2 SG成分的多样性 | 第12-13页 |
1.3 病毒对应激颗粒的调节机制 | 第13-19页 |
1.3.1 病毒对PKR-eIF2α通路的调控 | 第14-16页 |
1.3.2 病毒对SG核心蛋白的“挟持” | 第16-17页 |
1.3.3 病毒对SG组分的切割 | 第17-19页 |
1.4 应激颗粒与先天性免疫 | 第19-20页 |
1.5 结语 | 第20页 |
1.6 本文工作简介 | 第20-21页 |
第二章 新城疫病毒感染诱导稳态应激颗粒形成 | 第21-28页 |
2.1 前言 | 第21页 |
2.2 材料和方法 | 第21-22页 |
2.2.1 病毒和细胞 | 第21页 |
2.2.2 抗体和试剂 | 第21页 |
2.2.3 免疫荧光检测SG的形成 | 第21-22页 |
2.2.4 SG点的计数 | 第22页 |
2.3 NDV感染诱导稳定SG形成 | 第22-24页 |
2.4 NDV感染诱导SG标志物TIA-1和G3BP1共定位 | 第24-25页 |
2.5 NDV NP蛋白而非P蛋白与SG标志物TIA-1共定位 | 第25-26页 |
2.6 讨论 | 第26-28页 |
第三章 新城疫病毒通过PKR/eIF2α诱导SG形成 | 第28-39页 |
3.1 前言 | 第28页 |
3.2 材料和方法 | 第28-33页 |
3.2.1 病毒和细胞 | 第28页 |
3.2.2 抗体和试剂 | 第28-29页 |
3.2.3 质粒和干扰RNA | 第29页 |
3.2.4 免疫荧光 | 第29-31页 |
3.2.5 SG点的计数 | 第31页 |
3.2.6 Western-blot | 第31-33页 |
3.3 NDV感染诱导eIF2α磷酸化和总蛋白翻译水平下降 | 第33-34页 |
3.4 eIF2α 51位磷酸化参与了NDV诱导SG的过程 | 第34-35页 |
3.5 NDV感染后病毒dsRNA和PKR均位于SG中 | 第35-36页 |
3.6 PKR参与了NDV感染诱导的eIF2α激活 | 第36-37页 |
3.7 PKR干扰导致NDV感染诱导的SG点的减少 | 第37-38页 |
3.8 讨论 | 第38-39页 |
第四章 新城疫病毒感染诱导的SG为经典型SG | 第39-47页 |
4.1 前言 | 第39页 |
4.2 材料和方法 | 第39-41页 |
4.2.1 病毒和细胞 | 第39页 |
4.2.2 抗体和试剂 | 第39-40页 |
4.2.3 药物试验 | 第40-41页 |
4.2.4 免疫荧光检测SG与特异性标志共定位 | 第41页 |
4.3 NDV感染诱导的SG可被放线菌酮降解 | 第41-42页 |
4.4 NDV感染诱导的SG与小核糖体亚基共定位 | 第42-43页 |
4.5 NDV感染诱导的SG与翻译起始因子共定位 | 第43-45页 |
4.6 讨论 | 第45-47页 |
第五章 NDV感染诱导的SG需要微管蛋白协助 | 第47-52页 |
5.1 前言 | 第47页 |
5.2 材料和方法 | 第47-48页 |
5.2.1 病毒和细胞 | 第47页 |
5.2.2 抗体和试剂 | 第47-48页 |
5.2.3 药物处理 | 第48页 |
5.3 tubulin介导NDV感染诱导的SG的聚集 | 第48-49页 |
5.4 actin与NDV诱导的SG无关 | 第49-51页 |
5.5 讨论 | 第51-52页 |
第六章 SG通过调控蛋白翻译系统促进病毒复制 | 第52-61页 |
6.1 前言 | 第52页 |
6.2 材料和方法 | 第52-55页 |
6.2.1 病毒和细胞 | 第52-53页 |
6.2.2 抗体和试剂 | 第53页 |
6.2.3 干扰RNA | 第53页 |
6.2.4 干扰TIA-1/TIAR后检测蛋白翻译及病毒滴度 | 第53-54页 |
6.2.5 western blot条带灰度值计算 | 第54-55页 |
6.3 TIA-1的干扰降低病毒蛋白翻译的同时增加细胞总蛋白的翻译 | 第55-56页 |
6.4 TIA-1的干扰导致细胞上清中病毒滴度的降低 | 第56-57页 |
6.5 TIAR的干扰降低病毒蛋白翻译水平和病毒滴度 | 第57-59页 |
6.6 讨论 | 第59-61页 |
第七章 SG主要包裹宿主总mRNA而非病毒mRNA | 第61-67页 |
7.1 前言 | 第61页 |
7.2 材料和方法 | 第61-62页 |
7.2.1 病毒和细胞 | 第61页 |
7.2.2 抗体和试剂 | 第61-62页 |
7.2.3 荧光原位杂交(FISH) | 第62页 |
7.3 宿主总mRNA在NDV感染后期与TIA-1共定位 | 第62-64页 |
7.4 宿主总mRNA在NDV感染后期与TIAR共定位 | 第64-65页 |
7.5 讨论 | 第65-67页 |
结论 | 第67-68页 |
致谢 | 第68-69页 |
参考文献 | 第69-76页 |
附录1 博后期间发表文章列表 | 第76-77页 |
附录2 博后期间申请课题列表 | 第77页 |