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新城疫病毒诱导宿主细胞应激颗粒形成机制的研究

内容摘要第5-6页
Abstract第6页
第一章 绪论第11-21页
    1.1 应激颗粒的形成机制第11-12页
    1.2 SG成分的多样性第12-13页
    1.3 病毒对应激颗粒的调节机制第13-19页
        1.3.1 病毒对PKR-eIF2α通路的调控第14-16页
        1.3.2 病毒对SG核心蛋白的“挟持”第16-17页
        1.3.3 病毒对SG组分的切割第17-19页
    1.4 应激颗粒与先天性免疫第19-20页
    1.5 结语第20页
    1.6 本文工作简介第20-21页
第二章 新城疫病毒感染诱导稳态应激颗粒形成第21-28页
    2.1 前言第21页
    2.2 材料和方法第21-22页
        2.2.1 病毒和细胞第21页
        2.2.2 抗体和试剂第21页
        2.2.3 免疫荧光检测SG的形成第21-22页
        2.2.4 SG点的计数第22页
    2.3 NDV感染诱导稳定SG形成第22-24页
    2.4 NDV感染诱导SG标志物TIA-1和G3BP1共定位第24-25页
    2.5 NDV NP蛋白而非P蛋白与SG标志物TIA-1共定位第25-26页
    2.6 讨论第26-28页
第三章 新城疫病毒通过PKR/eIF2α诱导SG形成第28-39页
    3.1 前言第28页
    3.2 材料和方法第28-33页
        3.2.1 病毒和细胞第28页
        3.2.2 抗体和试剂第28-29页
        3.2.3 质粒和干扰RNA第29页
        3.2.4 免疫荧光第29-31页
        3.2.5 SG点的计数第31页
        3.2.6 Western-blot第31-33页
    3.3 NDV感染诱导eIF2α磷酸化和总蛋白翻译水平下降第33-34页
    3.4 eIF2α 51位磷酸化参与了NDV诱导SG的过程第34-35页
    3.5 NDV感染后病毒dsRNA和PKR均位于SG中第35-36页
    3.6 PKR参与了NDV感染诱导的eIF2α激活第36-37页
    3.7 PKR干扰导致NDV感染诱导的SG点的减少第37-38页
    3.8 讨论第38-39页
第四章 新城疫病毒感染诱导的SG为经典型SG第39-47页
    4.1 前言第39页
    4.2 材料和方法第39-41页
        4.2.1 病毒和细胞第39页
        4.2.2 抗体和试剂第39-40页
        4.2.3 药物试验第40-41页
        4.2.4 免疫荧光检测SG与特异性标志共定位第41页
    4.3 NDV感染诱导的SG可被放线菌酮降解第41-42页
    4.4 NDV感染诱导的SG与小核糖体亚基共定位第42-43页
    4.5 NDV感染诱导的SG与翻译起始因子共定位第43-45页
    4.6 讨论第45-47页
第五章 NDV感染诱导的SG需要微管蛋白协助第47-52页
    5.1 前言第47页
    5.2 材料和方法第47-48页
        5.2.1 病毒和细胞第47页
        5.2.2 抗体和试剂第47-48页
        5.2.3 药物处理第48页
    5.3 tubulin介导NDV感染诱导的SG的聚集第48-49页
    5.4 actin与NDV诱导的SG无关第49-51页
    5.5 讨论第51-52页
第六章 SG通过调控蛋白翻译系统促进病毒复制第52-61页
    6.1 前言第52页
    6.2 材料和方法第52-55页
        6.2.1 病毒和细胞第52-53页
        6.2.2 抗体和试剂第53页
        6.2.3 干扰RNA第53页
        6.2.4 干扰TIA-1/TIAR后检测蛋白翻译及病毒滴度第53-54页
        6.2.5 western blot条带灰度值计算第54-55页
    6.3 TIA-1的干扰降低病毒蛋白翻译的同时增加细胞总蛋白的翻译第55-56页
    6.4 TIA-1的干扰导致细胞上清中病毒滴度的降低第56-57页
    6.5 TIAR的干扰降低病毒蛋白翻译水平和病毒滴度第57-59页
    6.6 讨论第59-61页
第七章 SG主要包裹宿主总mRNA而非病毒mRNA第61-67页
    7.1 前言第61页
    7.2 材料和方法第61-62页
        7.2.1 病毒和细胞第61页
        7.2.2 抗体和试剂第61-62页
        7.2.3 荧光原位杂交(FISH)第62页
    7.3 宿主总mRNA在NDV感染后期与TIA-1共定位第62-64页
    7.4 宿主总mRNA在NDV感染后期与TIAR共定位第64-65页
    7.5 讨论第65-67页
结论第67-68页
致谢第68-69页
参考文献第69-76页
附录1 博后期间发表文章列表第76-77页
附录2 博后期间申请课题列表第77页

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