壳聚糖酶的制备及应用
| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 第一章 绪论 | 第9-17页 |
| 1.1 壳寡糖概述 | 第9-10页 |
| 1.1.1 壳聚糖 | 第9-10页 |
| 1.1.2 壳寡糖 | 第10页 |
| 1.2 壳寡糖的应用 | 第10-11页 |
| 1.3 壳寡糖的制备工艺 | 第11-13页 |
| 1.3.1 化学法 | 第11-12页 |
| 1.3.2 物理法 | 第12页 |
| 1.3.3 酶解法 | 第12-13页 |
| 1.4 壳聚糖酶 | 第13-14页 |
| 1.4.1 壳聚糖酶的发现 | 第13页 |
| 1.4.2 壳聚糖酶的来源 | 第13页 |
| 1.4.3 壳聚糖酶的酶学性质 | 第13-14页 |
| 1.4.4 壳聚糖酶的分离纯化 | 第14页 |
| 1.5 本研究的目的和意义 | 第14-15页 |
| 1.6 本研究的主要技术路线 | 第15-17页 |
| 第二章 产壳聚糖酶菌株的筛选及鉴定 | 第17-27页 |
| 2.1 引言 | 第17页 |
| 2.2 材料 | 第17-19页 |
| 2.2.1 主要药品 | 第17-18页 |
| 2.2.2 主要仪器和设备 | 第18页 |
| 2.2.3 菌种及培养基 | 第18-19页 |
| 2.2.4 主要试剂 | 第19页 |
| 2.3 酶活测定方法 | 第19-21页 |
| 2.3.1 氨基葡萄糖标准曲线绘制 | 第19-21页 |
| 2.3.2 酶活检测方法 | 第21页 |
| 2.3.3 酶解产物检测方法 | 第21页 |
| 2.4 菌种筛选及鉴定 | 第21-22页 |
| 2.4.1 壳聚糖酶产生菌的初筛 | 第21页 |
| 2.4.2 酶解产物鉴定 | 第21-22页 |
| 2.4.3 壳聚糖酶产生菌的复筛 | 第22页 |
| 2.4.4 菌种鉴定 | 第22页 |
| 2.5 结果与分析 | 第22-26页 |
| 2.5.1 壳聚糖酶产生菌的筛选及酶活测定 | 第22-23页 |
| 2.5.2 菌落及形态特征 | 第23-24页 |
| 2.5.3 生理生化特征 | 第24-25页 |
| 2.5.4 16sRNA鉴定结果 | 第25-26页 |
| 2.6 本章小结 | 第26-27页 |
| 第三章 壳聚糖酶基因工程菌的构建及高密度发酵 | 第27-48页 |
| 3.1 引言 | 第27-28页 |
| 3.2 材料 | 第28-31页 |
| 3.2.1 主要药品 | 第28-29页 |
| 3.2.2 主要仪器 | 第29页 |
| 3.2.3 主要培养基及诱导剂 | 第29页 |
| 3.2.4 主要试剂 | 第29-30页 |
| 3.2.5 酶活测定方法 | 第30-31页 |
| 3.3 基因工程菌构建 | 第31-35页 |
| 3.3.1 壳聚糖酶编码基因的获得 | 第31-32页 |
| 3.3.2 异源表达载体的构建 | 第32-34页 |
| 3.3.3 重组工程菌的表达及验证 | 第34-35页 |
| 3.4 高密度发酵条件优化 | 第35-36页 |
| 3.4.1 菌株培养方法 | 第35页 |
| 3.4.2 培养基单因子实验 | 第35-36页 |
| 3.4.3 培养条件优化 | 第36页 |
| 3.4.4 10L发酵罐放大实验 | 第36页 |
| 3.5 实验结果 | 第36-47页 |
| 3.5.1 蜡样芽孢杆菌基因组提取 | 第36-39页 |
| 3.5.2 基因重组工程菌的获得及验证 | 第39-41页 |
| 3.5.3 培养基单因素对发酵影响 | 第41-44页 |
| 3.5.4 发酵条件对发酵酶活的影响 | 第44-46页 |
| 3.5.5 10L发酵罐验证试验 | 第46-47页 |
| 3.6 本章小结 | 第47-48页 |
| 第四章 基因重组壳聚糖酶粗品在壳寡糖生产中的应用 | 第48-61页 |
| 4.1 引言 | 第48页 |
| 4.2 材料 | 第48-49页 |
| 4.2.1 试剂及设备 | 第48-49页 |
| 4.3 方法 | 第49-53页 |
| 4.3.1 测定方法 | 第49-50页 |
| 4.3.2 壳聚糖酶的初级纯化 | 第50页 |
| 4.3.3 壳聚糖酶催化条件研究 | 第50-51页 |
| 4.3.4 壳聚糖酶酶解的影响因素 | 第51-52页 |
| 4.3.5 浓缩废水套用实验 | 第52页 |
| 4.3.6 中试放大验证实验结果 | 第52页 |
| 4.3.7 壳寡糖的浓缩干燥 | 第52-53页 |
| 4.4 实验结果 | 第53-60页 |
| 4.4.1 壳聚糖酶催化条件研究 | 第53-55页 |
| 4.4.2 壳聚糖酶酶解的影响因素 | 第55-57页 |
| 4.4.3 浓缩废水回收利用实验 | 第57-59页 |
| 4.4.4 中试放大结果 | 第59-60页 |
| 4.4.5 固体壳寡糖指标 | 第60页 |
| 4.5 本章小结 | 第60-61页 |
| 结论 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-65页 |
| 致谢 | 第65页 |
