| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 1 绪论 | 第9-14页 |
| 1.1 课题背景及意义 | 第9-10页 |
| 1.2 国内外文献综述及研究进展 | 第10-13页 |
| 1.2.1 植物转基因方面 | 第10页 |
| 1.2.2 生防木霉与病原菌互作 | 第10-12页 |
| 1.2.3 热激蛋白的功能 | 第12-13页 |
| 1.3 研究不足及待深入研究的问题 | 第13页 |
| 1.4 课题来源及研究内容 | 第13-14页 |
| 1.4.1 课题来源 | 第13页 |
| 1.4.2 研究内容 | 第13-14页 |
| 2 棘孢木霉热激蛋白基因Hsp24的克隆及分析 | 第14-26页 |
| 2.1 实验材料 | 第14-15页 |
| 2.1.1 质粒及菌株 | 第14页 |
| 2.1.2 培养基及缓冲液 | 第14页 |
| 2.1.3 药品 | 第14页 |
| 2.1.4 实验器材 | 第14-15页 |
| 2.2 实验方法 | 第15-17页 |
| 2.2.1 棘孢木霉基因组DNA的提取 | 第15页 |
| 2.2.2 棘孢木霉Hsp24基因的克隆 | 第15-17页 |
| 2.2.3 Hsp24启动子区序列克隆 | 第17页 |
| 2.2.4 Hsp24基因及蛋白的生物信息学特征 | 第17页 |
| 2.3 实验结果 | 第17-25页 |
| 2.3.1 棘孢木霉基因组DNA的提取 | 第17-18页 |
| 2.3.2 棘孢木霉Hsp24基因的克隆 | 第18页 |
| 2.3.3 棘孢木霉Hsp24基因启动子区克隆及分析 | 第18-19页 |
| 2.3.4 棘孢木霉Hsp24基因的序列分析 | 第19-20页 |
| 2.3.5 热激蛋白Hsp24的生物信息特征分析 | 第20-25页 |
| 2.4 热激蛋白基因的克隆及生物信息分析的讨论 | 第25页 |
| 2.4.1 棘孢木霉Hsp24基因的克隆 | 第25页 |
| 2.4.2 热激蛋白及其基因的生物信息分析 | 第25页 |
| 2.5 本章小结 | 第25-26页 |
| 3 棘孢木霉热激蛋白基因Hsp24的差异表达 | 第26-36页 |
| 3.1 实验材料 | 第26-27页 |
| 3.1.1 菌株 | 第26页 |
| 3.1.2 培养基 | 第26页 |
| 3.1.3 药品及工具酶 | 第26页 |
| 3.1.4 实验器材 | 第26-27页 |
| 3.2 实验方法 | 第27-29页 |
| 3.2.1 棘孢木霉Hsp24基因的表达差异 | 第27-28页 |
| 3.2.2 荧光定量PCR实验 | 第28-29页 |
| 3.3 实验结果 | 第29-35页 |
| 3.3.1 Hsp24基因在MM培养基中的表达 | 第29-30页 |
| 3.3.2 生物因素胁迫下Hsp24基因的表达 | 第30-32页 |
| 3.3.3 非生物压力胁迫下Hsp24基因的表达 | 第32-35页 |
| 3.4 棘孢木霉Hsp24基因表达情况的讨论 | 第35页 |
| 3.4.1 生物因素对Hsp24基因表达的影响 | 第35页 |
| 3.4.2 非生物因素对Hsp24基因表达的影响 | 第35页 |
| 3.5 本章小结 | 第35-36页 |
| 4 山新杨转化子Pdpap-Hsp24s的构建 | 第36-46页 |
| 4.1 实验材料 | 第36-37页 |
| 4.1.1 植物、菌株和质粒 | 第36页 |
| 4.1.2 培养基 | 第36-37页 |
| 4.1.3 药品和酶制剂 | 第37页 |
| 4.1.4 实验仪器 | 第37页 |
| 4.2 实验方法 | 第37-42页 |
| 4.2.1 重组载体pROK2-Hsp24的构建 | 第37-39页 |
| 4.2.2 重组根癌农杆菌EHA105-Hsp24的构建 | 第39-41页 |
| 4.2.3 山新杨转化子Pdpap-Hsp24的获得 | 第41-42页 |
| 4.3 实验结果 | 第42-45页 |
| 4.3.1 重组载体pROK2-Hsp24的构建 | 第42-44页 |
| 4.3.2 山新杨转化子Pdpap-Hsp24的扩繁与检测 | 第44-45页 |
| 4.4 植物表达载体及杨树转化子构建的讨论 | 第45页 |
| 4.5 本章小结 | 第45-46页 |
| 5 山新杨转化子Pdpap-Hsp24s的抗病性检测 | 第46-60页 |
| 5.1 实验材料 | 第46页 |
| 5.1.1 植物材料及病原真菌菌株 | 第46页 |
| 5.1.2 培养基 | 第46页 |
| 5.1.3 药品和酶制剂 | 第46页 |
| 5.1.4 实验器材 | 第46页 |
| 5.2 试验方法 | 第46-49页 |
| 5.2.1 四个转化子株系中病程相关蛋白的表达分析 | 第46-47页 |
| 5.2.2 杨树烂皮病胁迫下杨树转化子防卫信号途径相关基因的分析 | 第47-48页 |
| 5.2.3 杨树烂皮病胁迫下山新杨转化子细胞膜透性及活性氧含量测定 | 第48页 |
| 5.2.4 叶枯病菌胁迫下杨树转化子Pdpap-Hsp24抗氧化能力分析 | 第48-49页 |
| 5.2.5 山新杨转化子Pdpap-Hsp24的抗叶枯病能力检测 | 第49页 |
| 5.3 实验结果 | 第49-57页 |
| 5.3.1 山新杨转化子中病程相关蛋白基因PR的表达检测 | 第49-51页 |
| 5.3.2 杨树烂皮病的胁迫下杨树转化子防卫信号途径相关基因的表达 | 第51-53页 |
| 5.3.3 杨树烂皮病的胁迫下杨树转化子的细胞膜透性及活性氧含量 | 第53-55页 |
| 5.3.4 杨树叶枯病的胁迫下杨树转化子的抗氧化能力分析 | 第55-56页 |
| 5.3.5 转化子Pdpap-Hsp24的抗杨树叶枯病能力检测 | 第56-57页 |
| 5.4 山新杨转化子Pdpap-Hsp24抗病能力讨论 | 第57-59页 |
| 5.4.1 转化子Pdpap-Hsp24病程相关基因的表达 | 第57页 |
| 5.4.2 转化子Pdpap-Hsp24抗杨树烂皮病的能力 | 第57-58页 |
| 5.4.3 转化子Pdpap-Hsp24抗杨树叶枯病的能力 | 第58-59页 |
| 5.5 本章小结 | 第59-60页 |
| 结论 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-66页 |
| 附录 | 第66-67页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第67-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
