| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 1 绪论 | 第9-19页 |
| 1.1 课题研究的目的和意义 | 第9-10页 |
| 1.2 国内外研究现状 | 第10-18页 |
| 1.2.1 半纤维素酶概述 | 第10页 |
| 1.2.2 木聚糖酶研究进展 | 第10-11页 |
| 1.2.3 α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶研究进展 | 第11-13页 |
| 1.2.4 转录组研究进展 | 第13-17页 |
| 1.2.5 RACE技术研究进展 | 第17-18页 |
| 1.2.6 实时荧光定量PCR的研究进展 | 第18页 |
| 1.3 论文的主要研究内容 | 第18-19页 |
| 2 木耳α-af基因全长克隆及生物信息学分析 | 第19-40页 |
| 2.1 材料和方法 | 第19-26页 |
| 2.1.1 试验材料 | 第19页 |
| 2.1.2 供试培养基 | 第19页 |
| 2.1.3 主要仪器和试剂 | 第19-20页 |
| 2.1.4 引物 | 第20页 |
| 2.1.5 木耳总RNA提取 | 第20-21页 |
| 2.1.6 RNA完整性和质量检验 | 第21页 |
| 2.1.7 基因筛选 | 第21页 |
| 2.1.8 反转录RT-PCR得到cDNA | 第21-22页 |
| 2.1.9 α-af基因片段的扩增 | 第22页 |
| 2.1.10 目的片段胶回收 | 第22-23页 |
| 2.1.11 目的片段的克隆测序 | 第23-24页 |
| 2.1.12 5’RACE cDNA和3'RACE cDNA第一链合成 | 第24-25页 |
| 2.1.13 5’RACE | 第25页 |
| 2.1.14 3 ’RACE | 第25-26页 |
| 2.1.15 木耳α-af基因全长克隆 | 第26页 |
| 2.1.16 木耳α-af生物信息学分析 | 第26页 |
| 2.2 结果与分析 | 第26-39页 |
| 2.2.1 RNA提取结果 | 第26-27页 |
| 2.2.2 基因筛选结果 | 第27-28页 |
| 2.2.3 α-af基因片段扩增结果分析 | 第28-29页 |
| 2.2.4 α-af基因5'RACE结果分析 | 第29页 |
| 2.2.5 α-af基因3'RACE结果分析 | 第29页 |
| 2.2.6 木耳α-af基因全长克隆结果分析 | 第29-30页 |
| 2.2.7 木耳α-af基因的生物信息学分析 | 第30-36页 |
| 2.2.8 木耳α-af蛋白二级结构预测 | 第36-37页 |
| 2.2.9 木耳α-af蛋白三级结构预测 | 第37-38页 |
| 2.2.10 木耳α-af基因序列亲缘性分析 | 第38-39页 |
| 2.3 本章小结 | 第39-40页 |
| 3 木耳α-af基因原核表达 | 第40-45页 |
| 3.1 材料和方法 | 第40-43页 |
| 3.1.1 试验材料 | 第40页 |
| 3.1.2 主要仪器和试剂 | 第40页 |
| 3.1.3 引物 | 第40页 |
| 3.1.4 木耳α-af基因扩增并转化大肠杆菌感受态DH5α | 第40-41页 |
| 3.1.5 pMD18-T-α-af质粒提取 | 第41页 |
| 3.1.6 质粒双酶切 | 第41-42页 |
| 3.1.7 重组载体pET-32a-α-af构建 | 第42页 |
| 3.1.8 木耳α-af基因的原核表达 | 第42-43页 |
| 3.2 结果与分析 | 第43-44页 |
| 3.2.1 pMD18-T-α-af质粒双酶切检验 | 第43页 |
| 3.2.2 重组载体pET-32a-α-af双酶切检验 | 第43-44页 |
| 3.2.3 重组载体的SDS-PAGE检测 | 第44页 |
| 3.3 本章小结 | 第44-45页 |
| 4 不同碳源对木耳α-af基因相对表达量的影响 | 第45-51页 |
| 4.1 材料和方法 | 第45-47页 |
| 4.1.1 试验材料 | 第45页 |
| 4.1.2 供试培养基 | 第45页 |
| 4.1.3 仪器及试剂 | 第45-46页 |
| 4.1.4 引物 | 第46页 |
| 4.1.5 菌丝RNA提取 | 第46页 |
| 4.1.6 qRT-PCR模板cDNA制作 | 第46-47页 |
| 4.1.7 qRT-PCR | 第47页 |
| 4.2 结果与分析 | 第47-49页 |
| 4.2.1 RNA质量检测 | 第47-48页 |
| 4.2.2 qRT-PCR结果 | 第48-49页 |
| 4.3 本章小结 | 第49-51页 |
| 结论 | 第51-52页 |
| 研究展望 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-59页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第59-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
