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干扰水稻PULL和ISA3基因的表达对稻米品质影响的研究

摘要第2-4页
ABSTRACT第4-5页
符号说明第9-10页
1 前言第10-18页
    1.1 稻米淀粉的组成及结构第10-11页
    1.2 植物淀粉合成概述第11页
    1.3 参与淀粉合成的关键酶第11-17页
        1.3.1 ADP葡萄糖焦磷酸化酶(AGPase)的研究进展第12-13页
        1.3.2 淀粉合成酶(SS)的研究进展第13页
        1.3.3 淀粉分支酶(SBE)的研究进展第13-14页
        1.3.4 淀粉去分支酶(DBE)的研究进展第14-17页
            1.3.4.1 编码PULL基因的研究进展第15页
            1.3.4.2 编码ISA基因的研究进展第15-17页
    1.4 RNA干扰机制及应用第17-18页
    1.5 本研究的主要目的第18页
2 材料与方法第18-23页
    2.1 实验材料第18-19页
        2.1.1 供试水稻品种第18页
        2.1.2 菌株及双元载体第18-19页
        2.1.3 化学试剂第19页
    2.2 实验方法第19-23页
        2.2.1 PCR分析第19页
            2.2.1.2 水稻植株叶片总DNA的提取第19页
            2.2.1.2 PCR扩增第19页
        2.2.2 RT-PCR分析第19-20页
            2.2.2.1 水稻胚乳总RNA的提取第19页
            2.2.2.2 第一链cDNA的合成第19-20页
            2.2.2.3 实时荧光定量PCR扩增第20页
        2.2.3 稻米品质的测定第20-23页
            2.2.3.1 样品前处理第20页
            2.2.3.2 成熟种子种淀粉的提取第20页
            2.2.3.3 水稻成熟籽粒中淀粉总含量的测定第20页
            2.2.3.4 水稻成熟种子种可溶性糖含量的测定第20页
            2.2.3.5 水稻成熟种子中直链淀粉含量(AC)的测定第20-21页
            2.2.3.6 胶稠度的测定第21页
            2.2.3.7 淀粉粘滞性谱(RVA)分析第21页
            2.2.3.8 淀粉热力学特性的测定第21-22页
            2.2.3.9 水稻成熟种子籽粒碘染第22页
            2.2.3.10 淀粉粒X射线衍射分析第22页
            2.2.3.11 淀粉傅里叶红外光谱分析(ATR-FITR)第22页
            2.2.3.12 淀粉链长分布分析第22-23页
    2.3 统计分析第23页
3 结果与分析第23-52页
    3.1 聚合的转基因水稻植株的鉴定及纯系筛选第23-25页
    3.2 转基因水稻中PULL和ISA3基因的表达第25-27页
    3.3 稻米常规理化特性分析第27-52页
        3.3.1 水稻糙米形态的比较第27-29页
        3.3.2 水稻精米形态的比较第29-31页
        3.3.3 水稻成熟籽粒碘染第31页
        3.3.4 转基因水稻成熟种子中总淀粉含量及可溶性糖含量第31-32页
        3.3.5 转基因水稻成熟种子中直链淀粉含量和胶稠度测定第32-34页
        3.3.6 转基因水稻成熟籽粒淀粉的RVA谱第34-37页
        3.3.7 转基因水稻成熟籽粒淀粉的热力学特性第37-40页
        3.3.8 淀粉的晶体结构分析第40-43页
        3.3.9 稻米淀粉精细结构分析第43-50页
        3.3.10 转基因水稻植株农艺性状调查第50-52页
4. 小结和讨论第52-56页
    4.1 研究小结第52-53页
    4.2 讨论第53-55页
        4.2.1 水稻PULL基因的功能第53-54页
        4.2.2 水稻ISA3基因的功能第54-55页
    4.3 展望第55-56页
参考文献第56-64页
附录第64-66页

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