| 中文摘要 | 第6-9页 |
| Abstract | 第9-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-29页 |
| 1.1 Dmn的结构与功能 | 第16-17页 |
| 1.2 果蝇精子发生过程 | 第17-21页 |
| 1.2.1 精子发生的早期 | 第17-18页 |
| 1.2.2 圆形精子延长 | 第18-19页 |
| 1.2.3 精子经历个体化过程,形成成熟精子 | 第19-21页 |
| 1.3 果蝇精子发生相关基因的研究进展 | 第21-24页 |
| 1.3.1 精子发生早期相关基因及其作用机制 | 第21-22页 |
| 1.3.2 精子延长期相关基因及其作用机制 | 第22-23页 |
| 1.3.3 精子个体化时期相关基因及其作用机制 | 第23-24页 |
| 1.4 果蝇及幼虫的发育机制 | 第24-26页 |
| 1.4.1 果蝇的发育过程 | 第24-25页 |
| 1.4.2 果蝇幼虫的发育过程 | 第25页 |
| 1.4.3 影响果蝇幼虫发育的机制 | 第25-26页 |
| 1.5 Wolbachia对果蝇生殖的影响 | 第26-27页 |
| 1.5.1 Wolbachia的生物学特性及感染特点 | 第26-27页 |
| 1.5.2 Wolbachia对果蝇生殖的影响 | 第27页 |
| 1.6 本研究的目的及意义 | 第27-29页 |
| 第二章 Walbachia感染引起Dmn下调是果蝇产生CI的机制之一 | 第29-44页 |
| 2.1 前言 | 第29-32页 |
| 2.2 材料与方法 | 第32-36页 |
| 2.2.1 果蝇品系及饲养方法 | 第32-33页 |
| 2.2.2 果蝇精巢解剖及RNA提取、逆转录成cDNA | 第33-34页 |
| 2.2.3 qRT-PCR | 第34-35页 |
| 2.2.4 果蝇DNA的提取 | 第35页 |
| 2.2.5 果蝇胚胎孵化率统计 | 第35-36页 |
| 2.2.6 单个雄蝇产生后代数统计 | 第36页 |
| 2.2.7 统计分析方法 | 第36页 |
| 2.3 结果与分析 | 第36-41页 |
| 2.3.1 Wolbachia感染导致雄蝇精巢中Dmn基因的表达量显著下调 | 第36页 |
| 2.3.2 Dmn敲降效果检测 | 第36-37页 |
| 2.3.3 Dmn在精巢中敲降后雄性繁殖力极显著下降 | 第37-39页 |
| 2.3.4 Dmn基因在感染Wolbachia的雄蝇中过表达效果检测 | 第39-40页 |
| 2.3.5 Dmn基因过表达能够挽救感染Wolbachia引起的雄性育性缺陷 | 第40-41页 |
| 2.4 讨论 | 第41-44页 |
| 第三章 Dmn在精巢中敲降后影响精子发育的机制研究 | 第44-61页 |
| 3.1 前言 | 第44-46页 |
| 3.2 材料与方法 | 第46-49页 |
| 3.2.1 果蝇精巢DAPI染色 | 第46-47页 |
| 3.2.2 果蝇精巢透射电镜超薄切片制备 | 第47页 |
| 3.2.3 果蝇精巢免疫组化实验 | 第47-49页 |
| 3.2.4 果蝇精巢的解剖和RNA提取及反转录成cDNA | 第49页 |
| 3.3 结果与分析 | 第49-58页 |
| 3.3.1 Dmn在精巢中敲降后破坏精子发生过程 | 第49-51页 |
| 3.3.2 Dmn在精巢中敲降后影响线粒体聚集及副核的形成 | 第51-53页 |
| 3.3.3 Dmn在精子发生过程早期表达,并与dynein共定位 | 第53-55页 |
| 3.3.4 Dmn在精巢中敲降后影响dynein和tubulin在精核周围的聚集 | 第55-56页 |
| 3.3.5 Dmn在精巢中敲降后破坏个体化复合体(IC)和核束的形成 | 第56-58页 |
| 3.4 讨论 | 第58-61页 |
| 第四章 Dmn与其他精子发生相关基因的相互作用 | 第61-70页 |
| 4.1 前言 | 第61-62页 |
| 4.2 材料与方法 | 第62-64页 |
| 4.2.1 果蝇品系及饲养 | 第62-63页 |
| 4.2.2 果蝇杂交方法 | 第63-64页 |
| 4.2.3 果蝇精巢解剖及RNA提取 | 第64页 |
| 4.2.4 果蝇胚胎孵化率统计 | 第64页 |
| 4.3 结果与分析 | 第64-67页 |
| 4.3.1 Dmn在精巢中敲降后影响精子发生相关基因的表达 | 第64-65页 |
| 4.3.2 Dmn敲降雄蝇中Ddlc1过表达效果检测 | 第65-66页 |
| 4.3.3 Dmn敲降雄蝇Ddlc1过表达后挽救了Dmn敲降雄蝇的育性缺陷 | 第66-67页 |
| 4.4 讨论 | 第67-70页 |
| 第五章 Dmn全身广泛敲降后抑制果蝇幼虫的发育 | 第70-81页 |
| 5.1 前言 | 第70-72页 |
| 5.1.1 果蝇幼虫的发育 | 第70页 |
| 5.1.2 影响果蝇幼虫发育的信号通路 | 第70-72页 |
| 5.1.3 本章研究的目的及意义 | 第72页 |
| 5.2 材料和方法 | 第72-74页 |
| 5.2.1 果蝇杂交及幼虫培养 | 第72页 |
| 5.2.2 Brdu标记实验 | 第72-73页 |
| 5.2.3 果蝇幼虫生长和蜕皮情况观察 | 第73页 |
| 5.2.4 果蝇幼虫RNA的提取及反转录成cDNA | 第73页 |
| 5.2.5 qRT-PCR检测与保幼激素相关基因Met、JhI-26和Kr-h1表达量 | 第73-74页 |
| 5.3 结果与分析 | 第74-79页 |
| 5.3.1 Dmn在act-Gal4;Dmn-hp2日龄幼虫中表达量极显著下调 | 第74页 |
| 5.3.2 Dmn全身广泛敲降后影响幼虫的发育和蜕皮 | 第74-76页 |
| 5.3.3 Dmn全身广泛敲降后通过影响幼虫中肠和脑的发育来影响幼虫生长 | 第76-77页 |
| 5.3.4 Dmn全身广泛敲降后通过影响保幼激素信号通路相关基因JhI-26、Met和Kr-h1表达影响幼虫发育 | 第77-79页 |
| 5.4 讨论 | 第79-81页 |
| 第六章 小结 | 第81-83页 |
| 参考文献 | 第83-101页 |
| 论文发表情况 | 第101-102页 |
| 致谢 | 第102-103页 |
