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组胺受体H4R介导ERK信号通路分子机制与受体内吞定量分析方法的研究

致谢第5-6页
摘要第6-7页
ABSTRACT第7页
英文缩写词表第8-12页
1 综述第12-32页
    1.1 组胺受体的研究发展第12-18页
        1.1.1 H1R的发现与研究第13-15页
        1.1.2 H2R的发现与研究第15-16页
        1.1.3 H3R的发现与研究第16-17页
        1.1.4 总结第17-18页
    1.2 H4R的研究发展第18-24页
        1.2.1 H4R的发现第18-20页
        1.2.2 H4R的激动剂第20-21页
        1.2.3 H4R的拮抗剂第21-23页
        1.2.4 总结第23-24页
    1.3 定量分析GPCR内吞的实验技术第24-26页
        1.3.1 GPCR的内吞第24-25页
        1.3.2 以DnaE为基础的定量内吞检测方法第25页
        1.3.3 总结第25-26页
    参考文献第26-32页
2 组胺H4R介导的ERK1/2信号通路分子机制研究第32-56页
    2.1 实验材料第33-35页
    2.2 实验方法第35-40页
        2.2.1 质粒扩增与提取第35-37页
        2.2.2 细胞培养、冻存与复苏第37页
        2.2.3 细胞转染第37页
        2.2.4 胞内Ca~(2+)的测定第37-38页
        2.2.5 基于CRE报告基因的胞内cAMP的检测第38页
        2.2.6 蛋白免疫印迹检测反洗磷酸化ERK1/2第38-40页
    2.3 实验结果第40-51页
        2.3.1 H4R介导的浓度依赖性与时间梯度的ERK1/2的激活第40-43页
        2.3.2 PTX对H4R介导的ERK1/2激活的影响第43-44页
        2.3.3 Gβγ亚基在H4R介导的ERK1/2磷酸化过程中的作用第44-45页
        2.3.4 PKC对H4R介导的ERK1/2磷酸化过程的影响第45-49页
        2.3.5 PI3K、PDK1、Src对H4R介导的ERK1/2磷酸化过程的影响第49-50页
        2.3.6 H4R通过转激活途径激活ERK1/2第50-51页
    2.4 讨论第51-54页
    参考文献第54-56页
3 以DnaE与Rab5为基础的GPCR内吞定量分析第56-72页
    3.1 实验材料第58-60页
    3.2 实验方法第60-64页
        3.2.1 目的基因载体的构建第60-63页
        3.2.2 细胞培养、冻存与复苏第63-64页
        3.2.3 细胞转染第64页
        3.2.4 胞内荧光素酶活性的检测第64页
    3.3 实验结果第64-67页
        3.3.1 G蛋白偶联受体内吞的定量检测第64-66页
        3.3.2 功能缺失型G蛋白偶联受体内吞的定量检测第66-67页
    3.4 讨论第67-70页
    参考文献第70-72页
作者简历第72页

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