致谢 | 第5-6页 |
摘要 | 第6-7页 |
ABSTRACT | 第7页 |
英文缩写词表 | 第8-12页 |
1 综述 | 第12-32页 |
1.1 组胺受体的研究发展 | 第12-18页 |
1.1.1 H1R的发现与研究 | 第13-15页 |
1.1.2 H2R的发现与研究 | 第15-16页 |
1.1.3 H3R的发现与研究 | 第16-17页 |
1.1.4 总结 | 第17-18页 |
1.2 H4R的研究发展 | 第18-24页 |
1.2.1 H4R的发现 | 第18-20页 |
1.2.2 H4R的激动剂 | 第20-21页 |
1.2.3 H4R的拮抗剂 | 第21-23页 |
1.2.4 总结 | 第23-24页 |
1.3 定量分析GPCR内吞的实验技术 | 第24-26页 |
1.3.1 GPCR的内吞 | 第24-25页 |
1.3.2 以DnaE为基础的定量内吞检测方法 | 第25页 |
1.3.3 总结 | 第25-26页 |
参考文献 | 第26-32页 |
2 组胺H4R介导的ERK1/2信号通路分子机制研究 | 第32-56页 |
2.1 实验材料 | 第33-35页 |
2.2 实验方法 | 第35-40页 |
2.2.1 质粒扩增与提取 | 第35-37页 |
2.2.2 细胞培养、冻存与复苏 | 第37页 |
2.2.3 细胞转染 | 第37页 |
2.2.4 胞内Ca~(2+)的测定 | 第37-38页 |
2.2.5 基于CRE报告基因的胞内cAMP的检测 | 第38页 |
2.2.6 蛋白免疫印迹检测反洗磷酸化ERK1/2 | 第38-40页 |
2.3 实验结果 | 第40-51页 |
2.3.1 H4R介导的浓度依赖性与时间梯度的ERK1/2的激活 | 第40-43页 |
2.3.2 PTX对H4R介导的ERK1/2激活的影响 | 第43-44页 |
2.3.3 Gβγ亚基在H4R介导的ERK1/2磷酸化过程中的作用 | 第44-45页 |
2.3.4 PKC对H4R介导的ERK1/2磷酸化过程的影响 | 第45-49页 |
2.3.5 PI3K、PDK1、Src对H4R介导的ERK1/2磷酸化过程的影响 | 第49-50页 |
2.3.6 H4R通过转激活途径激活ERK1/2 | 第50-51页 |
2.4 讨论 | 第51-54页 |
参考文献 | 第54-56页 |
3 以DnaE与Rab5为基础的GPCR内吞定量分析 | 第56-72页 |
3.1 实验材料 | 第58-60页 |
3.2 实验方法 | 第60-64页 |
3.2.1 目的基因载体的构建 | 第60-63页 |
3.2.2 细胞培养、冻存与复苏 | 第63-64页 |
3.2.3 细胞转染 | 第64页 |
3.2.4 胞内荧光素酶活性的检测 | 第64页 |
3.3 实验结果 | 第64-67页 |
3.3.1 G蛋白偶联受体内吞的定量检测 | 第64-66页 |
3.3.2 功能缺失型G蛋白偶联受体内吞的定量检测 | 第66-67页 |
3.4 讨论 | 第67-70页 |
参考文献 | 第70-72页 |
作者简历 | 第72页 |