摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-8页 |
第一章 前言 | 第11-21页 |
1.1 植物营养阶段转变:幼年阶段向成年阶段转变 | 第11页 |
1.2 miR156和miR157:营养阶段转变的主要调控因子 | 第11-13页 |
1.3 miR156-SPLs上游调控因子 | 第13-14页 |
1.4 营养生长和生殖生长的关系 | 第14-16页 |
1.5 拟南芥双功能酶FRY1生物学功能 | 第16-20页 |
1.5.1 FRY1影响植物形态发育 | 第17-18页 |
1.5.2 FRY1调控植物激素信号 | 第18页 |
1.5.2.1 生长素 | 第18页 |
1.5.2.2 脱落酸 | 第18页 |
1.5.3 FRY1影响矿质营养代谢 | 第18-19页 |
1.5.3.1 硫代谢 | 第18-19页 |
1.5.3.2 磷代谢 | 第19页 |
1.5.4 FRY1对植物响应环境信号的调控 | 第19-20页 |
1.5.4.1 干旱胁迫响应 | 第19页 |
1.5.4.2 低温胁迫信号响应 | 第19页 |
1.5.4.3 光信号响应 | 第19-20页 |
1.6 研究的目的和意义 | 第20-21页 |
第二章 材料与方法 | 第21-32页 |
2.1 实验材料 | 第21-23页 |
2.1.1 主要仪器和设备 | 第21页 |
2.1.2 主要试剂及溶液配方 | 第21-23页 |
2.1.3 植物材料 | 第23页 |
2.2 实验方法 | 第23-32页 |
2.2.1 突变体筛选 | 第23页 |
2.2.2 拟南芥种植 | 第23页 |
2.2.3 拟南芥表型统计 | 第23-24页 |
2.2.4 图位克隆 | 第24-25页 |
2.2.4.1 图位克隆的群体构建 | 第24页 |
2.2.4.2 F2代群体基因组提取及PCR凝胶电泳 | 第24-25页 |
2.2.4.3 初定位 | 第25页 |
2.2.4.4 精细定位 | 第25页 |
2.2.5 克隆突变基因全长、胶产物回收及测序 | 第25-27页 |
2.2.6 点突变的dCAPS验证 | 第27页 |
2.2.7 mRNA序列和蛋白序列比对 | 第27-28页 |
2.2.7.1 RNA提取 | 第27-28页 |
2.2.7.2 DNA消化 | 第28页 |
2.2.7.3 RNA逆转录 | 第28页 |
2.2.8 T-DNA插入突变体鉴定 | 第28-29页 |
2.2.9 miR156-SPLs途径相关基因表达检测 | 第29-30页 |
2.2.9.1 miRNA逆转 | 第29页 |
2.2.9.2 qRT-PCR检测 | 第29-30页 |
2.2.10 遗传验证-拟南芥双突构建及纯合筛选 | 第30页 |
2.2.11 GUS染色 | 第30页 |
2.2.12 拟南芥抗旱生理指标测定 | 第30-32页 |
2.2.12.1 拟南芥在干旱胁迫下的成活率 | 第30-31页 |
2.2.12.2 拟南芥离体叶片失水率 | 第31页 |
2.2.12.3 拟南芥根长 | 第31-32页 |
第三章 结果与分析 | 第32-48页 |
3.1 突变体的获得 | 第32页 |
3.2 突变体del1表型考察 | 第32-34页 |
3.3 突变体del1的图位克隆 | 第34-37页 |
3.3.1 突变体del1的初定位连锁分析 | 第34-35页 |
3.3.2 突变体del1的精细定位 | 第35-37页 |
3.4 候选区间内基因功能分析 | 第37-39页 |
3.4.1 突变基因克隆测序检验 | 第37页 |
3.4.2 突变位点的dCAPS鉴定 | 第37-38页 |
3.4.3 mRNA序列比对 | 第38页 |
3.4.4 蛋白序列比对 | 第38-39页 |
3.5 等位互补测定分析 | 第39-40页 |
3.6 qRT-PCR检测突变体del1中阶段转变相关途径基因的表达 | 第40-42页 |
3.7 DEL1和miR156-SPLs途径相关突变体遗传关系分析 | 第42-44页 |
3.7.1 DEL1和SPL3遗传关系分析 | 第42-43页 |
3.7.2 DEL1和miR172遗传关系分析 | 第43-44页 |
3.8 突变体抗旱生理指标测定 | 第44-48页 |
3.8.1 突变体在干旱胁迫下的成活率 | 第44-45页 |
3.8.2 突变体离体叶片失水率测定 | 第45-46页 |
3.8.3 突变体在干旱条件下的相对根长 | 第46-48页 |
第四章 小结与讨论 | 第48-50页 |
参考文献 | 第50-58页 |
附表 | 第58-61页 |
个人简介 | 第61-62页 |
致谢 | 第62页 |