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DEL1调控拟南芥阶段转变生长发育的分子机制研究

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-8页
第一章 前言第11-21页
    1.1 植物营养阶段转变:幼年阶段向成年阶段转变第11页
    1.2 miR156和miR157:营养阶段转变的主要调控因子第11-13页
    1.3 miR156-SPLs上游调控因子第13-14页
    1.4 营养生长和生殖生长的关系第14-16页
    1.5 拟南芥双功能酶FRY1生物学功能第16-20页
        1.5.1 FRY1影响植物形态发育第17-18页
        1.5.2 FRY1调控植物激素信号第18页
            1.5.2.1 生长素第18页
            1.5.2.2 脱落酸第18页
        1.5.3 FRY1影响矿质营养代谢第18-19页
            1.5.3.1 硫代谢第18-19页
            1.5.3.2 磷代谢第19页
        1.5.4 FRY1对植物响应环境信号的调控第19-20页
            1.5.4.1 干旱胁迫响应第19页
            1.5.4.2 低温胁迫信号响应第19页
            1.5.4.3 光信号响应第19-20页
    1.6 研究的目的和意义第20-21页
第二章 材料与方法第21-32页
    2.1 实验材料第21-23页
        2.1.1 主要仪器和设备第21页
        2.1.2 主要试剂及溶液配方第21-23页
        2.1.3 植物材料第23页
    2.2 实验方法第23-32页
        2.2.1 突变体筛选第23页
        2.2.2 拟南芥种植第23页
        2.2.3 拟南芥表型统计第23-24页
        2.2.4 图位克隆第24-25页
            2.2.4.1 图位克隆的群体构建第24页
            2.2.4.2 F2代群体基因组提取及PCR凝胶电泳第24-25页
            2.2.4.3 初定位第25页
            2.2.4.4 精细定位第25页
        2.2.5 克隆突变基因全长、胶产物回收及测序第25-27页
        2.2.6 点突变的dCAPS验证第27页
        2.2.7 mRNA序列和蛋白序列比对第27-28页
            2.2.7.1 RNA提取第27-28页
            2.2.7.2 DNA消化第28页
            2.2.7.3 RNA逆转录第28页
        2.2.8 T-DNA插入突变体鉴定第28-29页
        2.2.9 miR156-SPLs途径相关基因表达检测第29-30页
            2.2.9.1 miRNA逆转第29页
            2.2.9.2 qRT-PCR检测第29-30页
        2.2.10 遗传验证-拟南芥双突构建及纯合筛选第30页
        2.2.11 GUS染色第30页
        2.2.12 拟南芥抗旱生理指标测定第30-32页
            2.2.12.1 拟南芥在干旱胁迫下的成活率第30-31页
            2.2.12.2 拟南芥离体叶片失水率第31页
            2.2.12.3 拟南芥根长第31-32页
第三章 结果与分析第32-48页
    3.1 突变体的获得第32页
    3.2 突变体del1表型考察第32-34页
    3.3 突变体del1的图位克隆第34-37页
        3.3.1 突变体del1的初定位连锁分析第34-35页
        3.3.2 突变体del1的精细定位第35-37页
    3.4 候选区间内基因功能分析第37-39页
        3.4.1 突变基因克隆测序检验第37页
        3.4.2 突变位点的dCAPS鉴定第37-38页
        3.4.3 mRNA序列比对第38页
        3.4.4 蛋白序列比对第38-39页
    3.5 等位互补测定分析第39-40页
    3.6 qRT-PCR检测突变体del1中阶段转变相关途径基因的表达第40-42页
    3.7 DEL1和miR156-SPLs途径相关突变体遗传关系分析第42-44页
        3.7.1 DEL1和SPL3遗传关系分析第42-43页
        3.7.2 DEL1和miR172遗传关系分析第43-44页
    3.8 突变体抗旱生理指标测定第44-48页
        3.8.1 突变体在干旱胁迫下的成活率第44-45页
        3.8.2 突变体离体叶片失水率测定第45-46页
        3.8.3 突变体在干旱条件下的相对根长第46-48页
第四章 小结与讨论第48-50页
参考文献第50-58页
附表第58-61页
个人简介第61-62页
致谢第62页

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