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c-Abl调控FoxM1稳定性及其转录功能研究

缩略词表第6-8页
摘要第8-11页
Abstract第11-13页
前言第14-23页
    1.非受体酪氨酸激酶c-Abl第14-17页
        1.1 c-Abl的结构及其在细胞中的分布第14页
        1.2 c-Abl的激活第14-15页
        1.3 c-Abl在基因转录调控中的作用第15页
        1.4 c-Abl参与细胞增殖调控第15-16页
        1.5 c-Abl在肿瘤中的作用第16-17页
    2.FoxM1的结构与功能第17-20页
        2.1 FoxM1的结构及其分布第17页
        2.2 FoxM1参与胚胎发育及组织器官再生第17-18页
        2.3 FoxM1参与DNA的复制及有丝分裂过程第18页
        2.4 FoxM1在细胞周期调控中的角色第18-19页
        2.5 FoxM1在肿瘤发生中的作用第19页
        2.6 FoxM在肿瘤细胞中发挥抗凋亡功能第19-20页
        2.7 FoxM1与DNA损伤修复第20页
    3.Aurora-A激酶与细胞周期调控第20-22页
        3.1 Aurora-A的结构和功能第20-21页
        3.2 Aurora-A在细胞周期调控中的作用第21-22页
    4.本课题研究的科学问题第22-23页
材料与方法第23-30页
    1.主要材料和试剂第23-24页
        1.1 细胞、菌株和主要质粒第23页
        1.2 主要试剂第23页
        1.3 主要抗体第23-24页
        1.4 主要设备仪器第24页
    2.实验方法第24-30页
        2.1 主要载体的构建和引物序列第24-25页
        2.2 质粒的转化与提取第25页
        2.3 细胞的培养、传代和冻存第25-26页
        2.4 细胞的转染实验第26页
        2.5 细胞免疫荧光染色实验第26-27页
        2.6 免疫沉淀(IP)和免疫印迹(IB)第27-28页
        2.7 细胞中总RNA的提取和反转录PCR实验第28页
        2.8 荧光实时定量PCR第28页
        2.9 流式细胞仪分析细胞周期第28-29页
        2.10 总RNA的高通量测序(RNA-seq)和基因功能聚类分析第29-30页
结果与分析第30-58页
    1.c-Abl及其相关蛋白Arg与FoxM1在细胞内发生相互作用第30-33页
    2.c-Abl介导内源FoxM1磷酸化修饰第33-35页
    3.c-Abl/Arg能够提高FoxM1的表达水平第35-37页
    4.c-Abl/Arg能够增强FoxM1蛋白的稳定性第37-38页
    5.c-Abl抑制FoxM1经泛素-蛋白酶体途径降解第38-41页
    6.c-Abl对FoxM1的调控影响其下游靶基因的转录表达第41-43页
    7.c-Abl激酶活性特异性抑制剂STI571阻滞细胞周期于有丝分裂期(M期)第43-46页
    8.STI571促进阿霉素诱导Hela细胞的凋亡第46-47页
    9.FoxM1的下游靶基因蛋白Aurora-A参与调控细胞周期M期阻滞第47-50页
    10.c-Abl/Arg参与基因差异表达调控第50-58页
        10.1 MCF-7 及MCF-7 KD(c-abl/arg Knock Down)细胞高通量测序(RNA-seq)数据质量评估第50-52页
        10.2 c-Abl/Arg调控基因的差异表达第52-58页
讨论第58-65页
    1.c-Abl/Arg与FoxM1在细胞内存在相互作用第58-59页
    2.内源性的FoxM1磷酸化作用研究第59页
    3.c-Abl能够调控FoxM1的表达水平第59-60页
    4.c-Abl/Arg调控FoxM1经泛素-蛋白酶体途径降解第60-61页
    5.STI571处理导致细胞周期M期阻滞第61-62页
    6.STI571促进阿霉素诱导Hela细胞的凋亡第62页
    7.Arurora-A激酶参与调控细胞周期M期阻滞第62-63页
    8.c-Abl/Arg调控基因的差异表达第63-65页
结论第65-66页
参考文献第66-75页
附表第75-83页
博士期间发表论文第83-84页
个人简历第84-85页
致谢第85-86页

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