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高尔基体蛋白ACBD3参与肠道病毒复制的机制研究

摘要第6-8页
Absract第8-9页
缩略语和部分专有名词第10-13页
引言第13-30页
前言第30-32页
实验研究工作第32-50页
    实验材料和实验方法第32-50页
        实验材料第32-40页
        实验方法第40-50页
实验结果第50-83页
    1. 参与肠道病毒复制的宿主因子的筛选第50页
    2. EV71病毒的非结构蛋白3A能与ACBD3相互作用第50-56页
        2.1 免疫共沉淀实验证实与ACBD3相互作用的病毒蛋白第50-51页
        2.2 GST Pull Down实验证实与ACBD3相互作用的病毒蛋白第51页
        2.3 Confocal实验证实与ACBD3相互作用的病毒蛋白第51页
        2.4 EV71病毒的非结构蛋白与ACBD3相互作用第51-56页
    3. ACBD3与其他肠道病毒3A蛋白的相互作用第56页
    4. ACBD3在肠道病毒复制过程中的作用第56-62页
        4.1 敲低细胞内ACBD3的表达能抑制EV71病毒的复制第56-57页
        4.2 敲除细胞内ACBD3的表达抑制EV71病毒的复制第57-58页
        4.3 回复ACBD3的表达促进EV71病毒的复制第58-60页
        4.4 ACBD3在病毒入侵细胞阶段不起作用第60页
        4.5 ACBD3对其他肠道病毒复制的影响第60-62页
    5. EV71-3A与ACBD3相互作用位点的确定第62-64页
        5.1 ACBD3蛋白的C端在与EV71-3A结合过程中起作用第62-63页
        5.2 病毒蛋白3A的C端在与ACBD3结果过程中起作用第63页
        5.3 病毒蛋白3A第44位的异亮氨酸及第54位的组氨酸为EV71病毒复制所需的关键氨基酸第63-64页
    6. 宿主因子GBF1及ARF1在EV71病毒复制过程中的作用第64-69页
        6.1 免疫荧光实验验证GBF1或ARF1与EV71-3A的相互作用第65页
        6.2 敲低细胞内GBF1或ARF1的表达对EV71病毒复制的影响第65-66页
        6.3 分子筛层析检测GBF1及ARF1第66页
        6.4 Confocal实验验证GBF1/ARF1与EV71-3A的定位情况第66-69页
    7. PI4KB在EV71病毒复制过程中的作用第69-71页
        7.1 PI4KB的抑制剂对EV71病毒复制的作用第69页
        7.2 敲低细胞内PI4KB的表达对EV71病毒复制的影响第69-70页
        7.3 敲除细胞内PI4KB的表达对EV71病毒复制的影响第70-71页
    8. 宿主因子ACBD3参与肠道病毒复制的机制第71-74页
        8.1 外源转染条件下,EV71-3A促进ACBD3与PI4KB的结合第71-72页
        8.2 EV71病毒感染促进ACBD3与PI4KB的结合第72页
        8.3 Confocal实验验证感染前后ACBD3与PI4KB间的定位情况第72-74页
        8.4 EV71病毒的3A蛋白的第44位异亮氨酸及第54位的组氨酸在促进ACBD3与PI4KB间的结合过程中起重要作用第74页
    9. EV71病毒感染导致胞内PI4P增加,且这一现象依赖于宿主因子ACBD3第74-77页
        9.1 流式检测分析EV71病毒感染前后胞内PI4P的变化第75页
        9.2 Confocal实验检测病毒感染前后胞内PI4P的定位第75-76页
        9.3 ACBD3在PI4P的生成过程中起重要作用第76-77页
    10. EV71病毒感染能形成病毒复制中心,宿主因子ACBD3在病毒复制中心形成过程中起重要作用第77-80页
        10.1 Confocal实验验证EV71病毒感染细胞能形成“病毒复制中心”第77页
        10.2 分子筛层析实验证实EV71病毒感染形成大分子复合物第77页
        10.3 宿主因子ACBD3在EV71病毒复制中心形成过程中起重要作用第77-80页
    11. 宿主因子PI4KB在其他肠道病毒复制过程中的作用第80-83页
讨论第83-88页
总结第88-89页
参考文献第89-102页
博士在学期间发表的学术论文第102-103页
致谢第103页

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