摘要 | 第6-8页 |
Absract | 第8-9页 |
缩略语和部分专有名词 | 第10-13页 |
引言 | 第13-30页 |
前言 | 第30-32页 |
实验研究工作 | 第32-50页 |
实验材料和实验方法 | 第32-50页 |
实验材料 | 第32-40页 |
实验方法 | 第40-50页 |
实验结果 | 第50-83页 |
1. 参与肠道病毒复制的宿主因子的筛选 | 第50页 |
2. EV71病毒的非结构蛋白3A能与ACBD3相互作用 | 第50-56页 |
2.1 免疫共沉淀实验证实与ACBD3相互作用的病毒蛋白 | 第50-51页 |
2.2 GST Pull Down实验证实与ACBD3相互作用的病毒蛋白 | 第51页 |
2.3 Confocal实验证实与ACBD3相互作用的病毒蛋白 | 第51页 |
2.4 EV71病毒的非结构蛋白与ACBD3相互作用 | 第51-56页 |
3. ACBD3与其他肠道病毒3A蛋白的相互作用 | 第56页 |
4. ACBD3在肠道病毒复制过程中的作用 | 第56-62页 |
4.1 敲低细胞内ACBD3的表达能抑制EV71病毒的复制 | 第56-57页 |
4.2 敲除细胞内ACBD3的表达抑制EV71病毒的复制 | 第57-58页 |
4.3 回复ACBD3的表达促进EV71病毒的复制 | 第58-60页 |
4.4 ACBD3在病毒入侵细胞阶段不起作用 | 第60页 |
4.5 ACBD3对其他肠道病毒复制的影响 | 第60-62页 |
5. EV71-3A与ACBD3相互作用位点的确定 | 第62-64页 |
5.1 ACBD3蛋白的C端在与EV71-3A结合过程中起作用 | 第62-63页 |
5.2 病毒蛋白3A的C端在与ACBD3结果过程中起作用 | 第63页 |
5.3 病毒蛋白3A第44位的异亮氨酸及第54位的组氨酸为EV71病毒复制所需的关键氨基酸 | 第63-64页 |
6. 宿主因子GBF1及ARF1在EV71病毒复制过程中的作用 | 第64-69页 |
6.1 免疫荧光实验验证GBF1或ARF1与EV71-3A的相互作用 | 第65页 |
6.2 敲低细胞内GBF1或ARF1的表达对EV71病毒复制的影响 | 第65-66页 |
6.3 分子筛层析检测GBF1及ARF1 | 第66页 |
6.4 Confocal实验验证GBF1/ARF1与EV71-3A的定位情况 | 第66-69页 |
7. PI4KB在EV71病毒复制过程中的作用 | 第69-71页 |
7.1 PI4KB的抑制剂对EV71病毒复制的作用 | 第69页 |
7.2 敲低细胞内PI4KB的表达对EV71病毒复制的影响 | 第69-70页 |
7.3 敲除细胞内PI4KB的表达对EV71病毒复制的影响 | 第70-71页 |
8. 宿主因子ACBD3参与肠道病毒复制的机制 | 第71-74页 |
8.1 外源转染条件下,EV71-3A促进ACBD3与PI4KB的结合 | 第71-72页 |
8.2 EV71病毒感染促进ACBD3与PI4KB的结合 | 第72页 |
8.3 Confocal实验验证感染前后ACBD3与PI4KB间的定位情况 | 第72-74页 |
8.4 EV71病毒的3A蛋白的第44位异亮氨酸及第54位的组氨酸在促进ACBD3与PI4KB间的结合过程中起重要作用 | 第74页 |
9. EV71病毒感染导致胞内PI4P增加,且这一现象依赖于宿主因子ACBD3 | 第74-77页 |
9.1 流式检测分析EV71病毒感染前后胞内PI4P的变化 | 第75页 |
9.2 Confocal实验检测病毒感染前后胞内PI4P的定位 | 第75-76页 |
9.3 ACBD3在PI4P的生成过程中起重要作用 | 第76-77页 |
10. EV71病毒感染能形成病毒复制中心,宿主因子ACBD3在病毒复制中心形成过程中起重要作用 | 第77-80页 |
10.1 Confocal实验验证EV71病毒感染细胞能形成“病毒复制中心” | 第77页 |
10.2 分子筛层析实验证实EV71病毒感染形成大分子复合物 | 第77页 |
10.3 宿主因子ACBD3在EV71病毒复制中心形成过程中起重要作用 | 第77-80页 |
11. 宿主因子PI4KB在其他肠道病毒复制过程中的作用 | 第80-83页 |
讨论 | 第83-88页 |
总结 | 第88-89页 |
参考文献 | 第89-102页 |
博士在学期间发表的学术论文 | 第102-103页 |
致谢 | 第103页 |