摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
第一章 前言 | 第10-16页 |
1.1 螺旋藻形态建成研究进展 | 第10-13页 |
1.1.1 影响螺旋藻形态建成因素 | 第10-11页 |
1.1.2 螺旋藻形态建成机理 | 第11-13页 |
1.2 蛋白质组学研究进展 | 第13-14页 |
1.2.1 蛋白组学概述 | 第13页 |
1.2.2 蛋白质组学分析技术 | 第13-14页 |
1.3 螺旋藻基因工程研究进展 | 第14页 |
1.4 选题的意义 | 第14-16页 |
第二章 材料与方法 | 第16-27页 |
2.1 实验材料 | 第16-17页 |
2.1.1 藻种及菌种 | 第16页 |
2.1.2 主要仪器 | 第16页 |
2.1.3 主要试剂 | 第16-17页 |
2.2 实验方法 | 第17-27页 |
2.2.1 螺旋藻生理指标的测定 | 第17页 |
2.2.2 iTRAQ实验流程 | 第17-19页 |
2.2.3 蛋白组数据分析 | 第19页 |
2.2.4 RNA的提取及质量鉴定 | 第19页 |
2.2.5 qRT-PCR验证蛋白质组数据试验流程 | 第19-20页 |
2.2.6 原核表达验证蛋白质功能试验流程 | 第20-25页 |
2.2.7 螺旋藻基因敲除试验流程 | 第25-27页 |
第三章 结果与分析 | 第27-58页 |
3.1 螺旋藻生理指标的测定 | 第27-29页 |
3.1.1 不同形态藻丝体的分离 | 第27-28页 |
3.1.2 不同形态藻丝体的形态参数 | 第28页 |
3.1.3 不同形态藻丝体生理指标的测定 | 第28-29页 |
3.2 蛋白质组学数据分析 | 第29-38页 |
3.2.1 数据预处理及归一化 | 第29-30页 |
3.2.2 蛋白质谱鉴定的统计结果 | 第30-31页 |
3.2.3 两组样品差异蛋白的生物信息学分析 | 第31-37页 |
3.2.4 螺旋藻形态建成假定模型 | 第37-38页 |
3.3 qRT-PCR验证蛋白质组学数据分析结果 | 第38-50页 |
3.3.1 分光光度法测总RNA的纯度 | 第38-39页 |
3.3.2 qRT-PCR验证螺旋藻形态建成假定模型 | 第39-44页 |
3.3.3 qRT-PCR验证共性差异蛋白 | 第44-50页 |
3.4 螺旋藻 pgm 基因在大肠杆菌中的表达和定位 | 第50-56页 |
3.4.1 pgm基因的扩增结果 | 第50-51页 |
3.4.2 重组质粒pgm-T的检测 | 第51页 |
3.4.3 表达载体pET-pgm的构建 | 第51-52页 |
3.4.4 融合表达蛋白GFP-pgm(50B)的表达鉴定 | 第52页 |
3.4.5 融合蛋白GFP-pgm的表达对大肠杆菌形态的影响 | 第52-56页 |
3.5 螺旋藻pgm基因敲除载体的构建 | 第56-58页 |
3.5.1 目的片段PCR扩增 | 第56页 |
3.5.2 敲除载体构建及检测 | 第56-58页 |
第四章 总结与展望 | 第58-61页 |
4.1 本论文的主要结论 | 第58-59页 |
4.2 本论文的创新之处 | 第59-60页 |
4.3 本论文的不足和今后进一步工作的建议 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-69页 |
发表论文、参加科研情况说明 | 第69-70页 |
附录 | 第70-74页 |
致谢 | 第74-75页 |