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基于iTRAQ定量蛋白质组学技术筛选螺旋藻形态建成相关蛋白

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-7页
第一章 前言第10-16页
    1.1 螺旋藻形态建成研究进展第10-13页
        1.1.1 影响螺旋藻形态建成因素第10-11页
        1.1.2 螺旋藻形态建成机理第11-13页
    1.2 蛋白质组学研究进展第13-14页
        1.2.1 蛋白组学概述第13页
        1.2.2 蛋白质组学分析技术第13-14页
    1.3 螺旋藻基因工程研究进展第14页
    1.4 选题的意义第14-16页
第二章 材料与方法第16-27页
    2.1 实验材料第16-17页
        2.1.1 藻种及菌种第16页
        2.1.2 主要仪器第16页
        2.1.3 主要试剂第16-17页
    2.2 实验方法第17-27页
        2.2.1 螺旋藻生理指标的测定第17页
        2.2.2 iTRAQ实验流程第17-19页
        2.2.3 蛋白组数据分析第19页
        2.2.4 RNA的提取及质量鉴定第19页
        2.2.5 qRT-PCR验证蛋白质组数据试验流程第19-20页
        2.2.6 原核表达验证蛋白质功能试验流程第20-25页
        2.2.7 螺旋藻基因敲除试验流程第25-27页
第三章 结果与分析第27-58页
    3.1 螺旋藻生理指标的测定第27-29页
        3.1.1 不同形态藻丝体的分离第27-28页
        3.1.2 不同形态藻丝体的形态参数第28页
        3.1.3 不同形态藻丝体生理指标的测定第28-29页
    3.2 蛋白质组学数据分析第29-38页
        3.2.1 数据预处理及归一化第29-30页
        3.2.2 蛋白质谱鉴定的统计结果第30-31页
        3.2.3 两组样品差异蛋白的生物信息学分析第31-37页
        3.2.4 螺旋藻形态建成假定模型第37-38页
    3.3 qRT-PCR验证蛋白质组学数据分析结果第38-50页
        3.3.1 分光光度法测总RNA的纯度第38-39页
        3.3.2 qRT-PCR验证螺旋藻形态建成假定模型第39-44页
        3.3.3 qRT-PCR验证共性差异蛋白第44-50页
    3.4 螺旋藻 pgm 基因在大肠杆菌中的表达和定位第50-56页
        3.4.1 pgm基因的扩增结果第50-51页
        3.4.2 重组质粒pgm-T的检测第51页
        3.4.3 表达载体pET-pgm的构建第51-52页
        3.4.4 融合表达蛋白GFP-pgm(50B)的表达鉴定第52页
        3.4.5 融合蛋白GFP-pgm的表达对大肠杆菌形态的影响第52-56页
    3.5 螺旋藻pgm基因敲除载体的构建第56-58页
        3.5.1 目的片段PCR扩增第56页
        3.5.2 敲除载体构建及检测第56-58页
第四章 总结与展望第58-61页
    4.1 本论文的主要结论第58-59页
    4.2 本论文的创新之处第59-60页
    4.3 本论文的不足和今后进一步工作的建议第60-61页
参考文献第61-69页
发表论文、参加科研情况说明第69-70页
附录第70-74页
致谢第74-75页

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