| 摘要 | 第5-7页 |
| 英文摘要 | 第7-8页 |
| 1 绪论 | 第12-32页 |
| 1.1 口蹄疫及口蹄疫疫苗概述 | 第12-20页 |
| 1.1.1 口蹄疫发展 | 第12-13页 |
| 1.1.2 口蹄疫病毒 | 第13-17页 |
| 1.1.2.1 口蹄疫病毒的发现 | 第13-14页 |
| 1.1.2.2 口蹄疫病毒结构及稳定性 | 第14-17页 |
| 1.1.3 口蹄疫疫苗种类 | 第17-20页 |
| 1.1.3.1 灭活病毒疫苗 | 第18页 |
| 1.1.3.2 亚单位疫苗 | 第18-20页 |
| 1.1.3.3 减毒活病毒疫苗 | 第20页 |
| 1.2 口蹄疫疫苗分离纯化方法 | 第20-24页 |
| 1.2.1 超速离心法 | 第21页 |
| 1.2.2 沉淀法 | 第21-22页 |
| 1.2.3 超滤法 | 第22页 |
| 1.2.4 色谱法 | 第22-24页 |
| 1.2.4.1 亲和色谱 | 第23页 |
| 1.2.4.2 凝胶过滤色谱 | 第23-24页 |
| 1.2.4.3 疏水色谱 | 第24页 |
| 1.2.4.4 离子交换色谱 | 第24页 |
| 1.3 蛋白质色谱过程中的构象变化研究 | 第24-30页 |
| 1.3.1 影响蛋白质色谱过程中构象变化的因素 | 第24-26页 |
| 1.3.2 蛋白质色谱过程中构象变化的研究方法 | 第26-29页 |
| 1.3.2.1 光谱法 | 第26-27页 |
| 1.3.2.2 色谱法 | 第27页 |
| 1.3.2.3 核磁共振法(NMR) | 第27页 |
| 1.3.2.4 氢氘交换质谱(HDX-MS) | 第27-28页 |
| 1.3.2.5 热力学分析法 | 第28-29页 |
| 1.3.3 超大孔提高蛋白质在色谱过程的稳定性 | 第29-30页 |
| 1.4 课题的立项依据及研究内容 | 第30-32页 |
| 2 离子交换介质孔径对灭活FMDV纯化过程结构和稳定性的影响 | 第32-50页 |
| 2.1 引言 | 第32-33页 |
| 2.2 实验材料与仪器 | 第33-35页 |
| 2.2.1 实验材料与试剂 | 第33-35页 |
| 2.2.2 实验仪器 | 第35页 |
| 2.3 实验方法 | 第35-38页 |
| 2.3.1 离子交换色谱介质的表征 | 第35-36页 |
| 2.3.2 灭活口蹄疫病毒纯品制备 | 第36页 |
| 2.3.3 高效液相法测定灭活口蹄疫灭活病毒疫苗 | 第36页 |
| 2.3.4 激光共聚焦 | 第36-37页 |
| 2.3.5 离子交换色谱进样电导测定 | 第37页 |
| 2.3.6 灭活FMDV纯品以及原料的离子交换色谱 | 第37-38页 |
| 2.3.7 差示扫描量热分析 | 第38页 |
| 2.4 实验结果与讨论 | 第38-47页 |
| 2.4.1 离子交换介质的基本性能 | 第38-39页 |
| 2.4.2 激光共聚焦观察灭活FMDV在不同孔径介质上的静态吸 | 第39-40页 |
| 2.4.3 IEC进样电导确定 | 第40-42页 |
| 2.4.4 介质孔径对灭活FMDV纯化收率的影响 | 第42-45页 |
| 2.4.5 灭活FMDV与介质吸附后热稳定性的变化 | 第45-47页 |
| 2.5 本章小结 | 第47-50页 |
| 3 大孔离子交换色谱纯化灭活FMDV的工艺建立及优化 | 第50-68页 |
| 3.1 引言 | 第50-51页 |
| 3.2 实验材料与仪器 | 第51-52页 |
| 3.2.1 实验材料与试剂 | 第51页 |
| 3.2.2 实验仪器 | 第51-52页 |
| 3.3 实验方法 | 第52-57页 |
| 3.3.1 不同进样蛋白浓度的灭活FMDV原料液的IEC | 第52-53页 |
| 3.3.2 灭活FMDV动态结合载量的测定 | 第53页 |
| 3.3.3 不同停留时间的灭活FMDV原料液的IEC | 第53页 |
| 3.3.4 激光共聚焦 | 第53-54页 |
| 3.3.5 离子交换色谱纯化灭活FMDV | 第54页 |
| 3.3.6 离子交换色谱和凝胶过滤色谱纯化灭活FMDV工艺放大 | 第54页 |
| 3.3.7 考马斯亮蓝法测定蛋白质浓度 | 第54-55页 |
| 3.3.8 DNA浓度测定 | 第55-56页 |
| 3.3.8.1 主要试剂 | 第55页 |
| 3.3.8.2 DNA标准曲线制备 | 第55页 |
| 3.3.8.3 样品测定 | 第55-56页 |
| 3.3.9 SDS-PAGE纯度测定 | 第56-57页 |
| 3.3.9.1 主要试剂配置 | 第56页 |
| 3.3.9.2 SDS-PAGE操作 | 第56-57页 |
| 3.4 实验结果与讨论 | 第57-65页 |
| 3.4.1 FMDV原料液的蛋白浓度对纯化收率的影响 | 第57-58页 |
| 3.4.2 IEC停留时间对灭活FMDV收率的影响 | 第58-60页 |
| 3.4.3 介质孔径对灭活FMDV动态结合载量的影响 | 第60-62页 |
| 3.4.4 离子交换色谱纯化灭活FMDV | 第62页 |
| 3.4.5 大孔离子交换色谱结合凝胶过滤色谱纯化灭活FMDV | 第62-65页 |
| 3.5 本章小结 | 第65-68页 |
| 4 结论 | 第68-70页 |
| 参考文献 | 第70-78页 |
| 个人简历及发表文章目录 | 第78-80页 |
| 致谢 | 第80页 |
