| 摘要 | 第3-8页 |
| ABSTRACT | 第8-14页 |
| 前言 | 第18-20页 |
| 第一章 NBD多肽改善TNF-α抑制成骨分化模型建立及验证 | 第20-33页 |
| 1 材料与试剂 | 第21-23页 |
| 1.1 主要仪器和设备 | 第21-22页 |
| 1.2 主要试剂和药品 | 第22页 |
| 1.3 细胞培养的主要试剂及配制 | 第22-23页 |
| 1.4 细胞系 | 第23页 |
| 2 实验方法 | 第23-25页 |
| 2.1 细胞培养 | 第23页 |
| 2.2 实验设计及分组 | 第23-25页 |
| 2.3 统计学分析 | 第25页 |
| 3 结果 | 第25-27页 |
| 3.1 ALP染色测定结果 | 第25-26页 |
| 3.2 ALP荧光活性测定结果 | 第26-27页 |
| 4 讨论 | 第27-30页 |
| 4.1 成骨模型中使用的成骨细胞系 | 第27-28页 |
| 4.2 肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF) | 第28-29页 |
| 4.3 NBD多肽的对炎症反应的调节 | 第29-30页 |
| 参考文献 | 第30-33页 |
| 第二章 基于iTRAQ技术NBD多肽改善TNF-α抑制成骨细胞分化的蛋白质组学分析 | 第33-82页 |
| 1 材料与试剂 | 第34-37页 |
| 1.1 仪器设备 | 第34-35页 |
| 1.2 主要试剂 | 第35页 |
| 1.3 主要试剂配制 | 第35-37页 |
| 1.4 细胞培养及分组 | 第37页 |
| 2 实验方法 | 第37-43页 |
| 2.1 细胞蛋白样品提取及定量 | 第37-40页 |
| 2.2 ESI质谱鉴定 | 第40-41页 |
| 2.3 数据分析 | 第41-43页 |
| 3 结果 | 第43-68页 |
| 3.1 蛋白质定量 | 第43页 |
| 3.2 定量信息统计 | 第43-44页 |
| 3.3 B组与BT组差异蛋白鉴定结果 | 第44-55页 |
| 3.4 BT组与BTP组差异蛋白鉴定结果 | 第55-66页 |
| 3.5 B VS BT与BT VS BTP三组间交集差异蛋白 | 第66-68页 |
| 4 讨论 | 第68-76页 |
| 4.1 蛋白质组学与成骨分化研究 | 第68-70页 |
| 4.2 蛋白质组学主要技术 | 第70-71页 |
| 4.3 iTRAQ技术原理及优点 | 第71-74页 |
| 4.4 炎症刺激成骨细胞分化过程中表达差异的蛋白质 | 第74-76页 |
| 5 本章小结 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-82页 |
| 第三章 NBD多肽改善TNF-α抑制成骨细胞分化相关差异蛋白的MRM表达验证 | 第82-94页 |
| 1 材料与试剂 | 第82-83页 |
| 1.1 仪器设备 | 第82-83页 |
| 1.2 主要试剂 | 第83页 |
| 1.3 细胞系 | 第83页 |
| 2 实验方法 | 第83-86页 |
| 2.1 标准肽段储备液制备 | 第84页 |
| 2.2 内标多肽同位素标记 | 第84页 |
| 2.3 细胞样本制备 | 第84页 |
| 2.4 液相色谱分离条件 | 第84页 |
| 2.5 质谱分析条件 | 第84-86页 |
| 3 结果 | 第86-89页 |
| 3.1 目标蛋白Transition筛选及质谱参数优化 | 第86-87页 |
| 3.2 目标蛋白定量检测 | 第87-89页 |
| 4 讨论 | 第89-91页 |
| 4.1 基于质谱的多反应监测(Multiple Reaction Monitoring,MRM)技术 | 第89-91页 |
| 4.2 差异蛋白在NBD多肽改善TNF-α抑制成骨分化动态过程中的表达 | 第91页 |
| 参考文献 | 第91-94页 |
| 致谢 | 第94-95页 |
