| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-9页 |
| 引言 | 第9-11页 |
| 第1章 绪论 | 第11-23页 |
| ·海洋抗肿瘤药物 | 第11-17页 |
| ·海洋药物概述 | 第11-12页 |
| ·抗肿瘤药物的研究进展 | 第12-13页 |
| ·海洋微生物抗肿瘤活性物质的研究进展 | 第13-14页 |
| ·海洋细菌是开发新型抗癌药物的新来源 | 第14-17页 |
| ·天然抗肿瘤药物的研究方法 | 第17-20页 |
| ·抗肿瘤药物筛选的有效性研究 | 第17-18页 |
| ·活性物质的纯化与检测 | 第18-20页 |
| ·抗肿瘤药物作用机理 | 第20-22页 |
| ·以细胞凋亡为靶点 | 第20页 |
| ·以肿瘤新生血管为靶点 | 第20页 |
| ·MAPK信号通路 | 第20-21页 |
| ·微管抑制剂 | 第21-22页 |
| ·端粒酶 | 第22页 |
| ·选题的目的与研究内容 | 第22-23页 |
| 第2章 南极抗肿瘤微生物的筛选及菌种鉴定 | 第23-33页 |
| ·材料 | 第23-25页 |
| ·实验材料 | 第23页 |
| ·试验试剂 | 第23-24页 |
| ·培养基 | 第24页 |
| ·实验仪器 | 第24-25页 |
| ·方法 | 第25-27页 |
| ·南极抗肿瘤微生物的筛选 | 第25-26页 |
| ·南极抗肿瘤微生物的菌种鉴定 | 第26-27页 |
| ·结果与分析 | 第27-31页 |
| ·南极抗肿瘤微生物的筛选结果 | 第27-28页 |
| ·菌株N11-8的菌种鉴定 | 第28-31页 |
| ·讨论 | 第31-33页 |
| 第3章 南极海洋芽孢杆菌多肽PBN11-8的分离纯化 | 第33-47页 |
| ·材料 | 第33-35页 |
| ·实验材料 | 第33页 |
| ·试验试剂 | 第33页 |
| ·培养基 | 第33-34页 |
| ·溶剂 | 第34页 |
| ·实验仪器 | 第34-35页 |
| ·方法 | 第35-39页 |
| ·南极海洋芽孢杆菌N11-8的发酵培养 | 第35页 |
| ·超滤处理 | 第35页 |
| ·硫酸铵沉淀处理 | 第35-36页 |
| ·离子交换色谱分离 | 第36页 |
| ·制备型高效液相色谱分离 | 第36-37页 |
| ·高效液相色谱检测分离多肽的纯度 | 第37页 |
| ·SDS-PAGE检测分离多肽的纯度 | 第37-38页 |
| ·ESI质谱检测分离多肽的分子量 | 第38页 |
| ·分离多肽的N-端氨基酸序列的测定 | 第38-39页 |
| ·结果与分析 | 第39-43页 |
| ·超滤得到活性组分 | 第39页 |
| ·硫酸铵沉淀得到活性组分 | 第39页 |
| ·离子交换色谱分离获得活性组分 | 第39-40页 |
| ·制备型高效液相色谱分离获得的活性组分 | 第40-41页 |
| ·高效液相色谱对PBN11-8的纯度检测 | 第41-42页 |
| ·SDS-PAGE对PBN11-8的纯度检测 | 第42-43页 |
| ·ESI质谱对PBN11-8的分子量测定 | 第43页 |
| ·PBN11-8的N端氨基酸序列测定结果 | 第43页 |
| ·讨论 | 第43-47页 |
| 第4章 PBN11-8的抗肿瘤活性 | 第47-57页 |
| ·材料 | 第47-48页 |
| ·实验材料 | 第47页 |
| ·实验试剂 | 第47-48页 |
| ·实验仪器 | 第48页 |
| ·方法 | 第48-50页 |
| ·PBN11-8对人肝癌细胞BEL-7402增殖的抑制作用 | 第48页 |
| ·PBN11-8对人卵巢癌细胞NIH:OVCAR-3增殖的抑制作用 | 第48页 |
| ·PBN11-8对人肾透明细胞腺癌细胞786-0增殖的抑制作用 | 第48-49页 |
| ·PBN11-8对人大细胞肺癌细胞NCl-H460增殖的抑制作用 | 第49页 |
| ·PBN11-8对人正常肝细胞L-02增殖的抑制作用 | 第49页 |
| ·PBN11-8对BEL-7402细胞形态变化的影响 | 第49页 |
| ·PBN11-8对BEL-7402细胞迁移和侵袭的影响 | 第49-50页 |
| ·结果与分析 | 第50-55页 |
| ·PBN11-8抑制BEL-7402的细胞增殖 | 第50-51页 |
| ·PBN11-8抑制NIH:OVCAR-3细胞增殖 | 第51页 |
| ·PBN11-8对786-0的细胞增殖有抑制作用 | 第51-52页 |
| ·PBN11-8对NCl-H460的细胞增殖有抑制作用 | 第52页 |
| ·PBN11-8对人正常肝癌细胞L-02的增殖抑制作用相对较小 | 第52-53页 |
| ·PBN11-8改变BEL-7402的细胞形态 | 第53-54页 |
| ·PBN11-8抑制BEL-7402的细胞迁移和侵袭 | 第54-55页 |
| ·讨论 | 第55-57页 |
| 本文结论 | 第57-59页 |
| 参考文献 | 第59-63页 |
| 附录 | 第63-67页 |
| 1. 细胞的复苏 | 第63页 |
| 2 细胞传代培养 | 第63页 |
| 3 细胞计数 | 第63-64页 |
| 4. 抗肿瘤活性检测(MTT) | 第64页 |
| 5. 蛋白多肽浓度测定 | 第64-67页 |
| 致谢 | 第67-69页 |
| 攻读学位期问发表学术论文目录 | 第69-73页 |