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桑树病程相关基因非表达子基因MuNPR1的生物学功能研究

中文摘要第1-10页
英文摘要第10-13页
1 前言第13-24页
   ·植物抗病机制第13-15页
     ·基因对基因假说第13-14页
     ·Avr蛋白与R蛋白的相互作用第14页
     ·R基因的信号传导第14-15页
     ·防卫假说第15页
   ·植物抗病基因第15-16页
     ·蛋白激酶类第15页
     ·LRR类第15-16页
     ·受体类蛋白激酶第16页
     ·NBS-LRR类第16页
   ·NPR1研究进展第16-22页
     ·NPR1基因的发现第16-17页
     ·NPR1蛋白的结构第17-18页
     ·NPR1的存在形式第18页
     ·NPR与植物抗病性第18-22页
   ·本研究的目的意义第22-24页
2 材料与方法第24-38页
   ·实验材料第24-25页
     ·植物材料第24页
     ·载体和菌株第24页
     ·试剂第24页
     ·主要仪器第24-25页
     ·引物第25页
   ·实验方法第25-38页
     ·MuNPR1基因的克隆第25-29页
       ·桑树叶片总RNA的提取第25-26页
       ·cDNA的合成第26页
       ·PCR扩增第26-27页
       ·目的片段的回收与检测第27-28页
       ·大肠杆菌感受态细胞的制备第28页
       ·目的片段与克隆载体的连接、转化第28-29页
       ·序列测定第29页
     ·MuNPR1生物信息学分析第29页
     ·MuNPR1植物表达载体的构建第29-31页
       ·质粒的提取第29-30页
       ·质粒的酶切和目的片段回收第30页
       ·pBI121-MuNPR1的构建第30-31页
     ·转基因拟南芥的获得第31-35页
       ·农杆菌GV3101感受态细胞的制备第31页
       ·农杆菌GV3101感受态细胞的转化第31-32页
       ·拟南芥的无土栽培第32页
       ·拟南芥的转化第32-33页
       ·转基因拟南芥的鉴定第33页
       ·转基因拟南芥中MuNPR1的表达分析第33-35页
     ·MuNPR1基因的生物学功能分析第35-38页
       ·Pst DC3000接种拟南芥第35页
       ·胼胝质染色第35页
       ·Pst DC3000的cfu值测定第35-36页
       ·H2O2和O2-的染色分析第36页
       ·MuNPR1与PR基因表达关系分析第36-37页
       ·转基因拟南芥的干旱、盐胁迫处理第37-38页
3 结果与分析第38-54页
   ·桑树MuNPR1基因克隆及其生物信息学分析第38-44页
     ·MuNPR1基因的克隆第38-39页
     ·桑树MuNPR1基因编码蛋白质的结构和基本理化性质分析第39-41页
     ·MuNPR1基因进化分析第41-44页
   ·桑树MuNPR在桑树中的组织表达特异性分析第44页
   ·MuNPR1的生物学功能分析第44-54页
     ·植物表达载体的构建第44-45页
     ·转基因拟南芥的鉴定第45-46页
     ·MuNPR1基因的生物学功能分析第46-54页
       ·转基因拟南芥的表型分析第46-47页
       ·桑树MuNPR1基因影响植物对Pst DC3000的抗性第47-50页
       ·MuNPR1对PR基因的调控分析第50-51页
       ·桑树MuNPR1基因影响植物的耐盐性第51-52页
       ·桑树MuNPR1基因影响植物的抗旱性第52-54页
4 讨论第54-57页
   ·MuNPR1的生物学功能第54页
   ·MuNPR1的作用机制第54-57页
5 结论第57-58页
参考文献第58-63页
致谢第63页

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