| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-9页 |
| 1. 文献综述 | 第9-17页 |
| ·梨石细胞的研究进展 | 第9-10页 |
| ·石细胞与梨果实品质的关系 | 第9-10页 |
| ·石细胞的发育过程 | 第10页 |
| ·木质素与梨石细胞的联系 | 第10页 |
| ·木质素代谢途径研究进展 | 第10-12页 |
| ·肉桂醇脱氢酶的研究进展 | 第12-14页 |
| ·肉桂醇脱氢酶的特征 | 第12-13页 |
| ·肉桂醇脱氢酶基因的克隆和基因家族分布 | 第13页 |
| ·肉桂醇脱氢酶的表达特征分析 | 第13-14页 |
| ·芥子醇脱氢酶的研究进展 | 第14-16页 |
| ·芥子醇脱氢酶的分子特征 | 第14-15页 |
| ·芥子醇脱氢酶的克隆 | 第15页 |
| ·芥子醇脱氢酶的表达分析 | 第15-16页 |
| ·研究意义 | 第16-17页 |
| 2. 引言 | 第17-18页 |
| 3. 材料与方法 | 第18-31页 |
| ·实验材料 | 第18页 |
| ·实验设计 | 第18-19页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第19-20页 |
| ·菌株、载体和主要试剂 | 第19页 |
| ·主要仪器 | 第19-20页 |
| ·实验方法 | 第20-31页 |
| ·引物设计 | 第20-21页 |
| ·砀山酥梨果实中总RNA的提取 | 第21页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第21-22页 |
| ·PbCAD基因及PbSAD基因中间片段的克隆 | 第22页 |
| ·3’RACE反应 | 第22-24页 |
| ·5’RACE反应 | 第24-25页 |
| ·中间片段、3'RACE和5'RACE PCR产物胶回收 | 第25页 |
| ·胶回收产物的连接、转化和测序 | 第25页 |
| ·生物信息学分析 | 第25-26页 |
| ·PbCAD基因及PbSAD基因原核表达载体的构建 | 第26-28页 |
| ·外源基因的诱导表达及其编码蛋白质的SDS-PAGE分析 | 第28-29页 |
| ·砀山酥梨发育过程中PbCAD基因的qRT-PCR分析 | 第29页 |
| ·PbCAD基因真核表达载体的构建 | 第29-30页 |
| ·PbCAD亚细胞定位 | 第30-31页 |
| 4. 结果与分析 | 第31-55页 |
| ·砀山酥梨果实总RNA的提取 | 第31页 |
| ·PbCAD基因全长克隆 | 第31-32页 |
| ·PbCAD基因核苷酸序列分析 | 第32-34页 |
| ·PbCAD特征分析 | 第34-40页 |
| ·氨基酸理化性质分析 | 第34页 |
| ·PbCAD同源性比对和系统进化树构建 | 第34-36页 |
| ·PbCAD的疏水性分析 | 第36页 |
| ·PbCAD跨膜区分析 | 第36-37页 |
| ·PbCAD信号肽预测 | 第37-38页 |
| ·PbCAD高级结构预测 | 第38-40页 |
| ·PbCAD基因原核表达 | 第40-41页 |
| ·PbCAD基因原核表达载体的构建 | 第40页 |
| ·IPTG诱导重组蛋白的SDS-PAGE电泳 | 第40-41页 |
| ·砀山酥梨发育过程中PbCAD基因qRT-PCR分析 | 第41-43页 |
| ·PbCAD基因真核表达分析 | 第43-45页 |
| ·PbCAD基因真核表达载体的构建 | 第43-44页 |
| ·PbCAD蛋白亚细胞定位 | 第44-45页 |
| ·PbSAD基因全长克隆 | 第45-46页 |
| ·PbSAD基因核苷酸序列分析 | 第46-47页 |
| ·PbSAD特性分析 | 第47-52页 |
| ·氨基酸理化性质分析 | 第47-48页 |
| ·PbSAD同源性比对和系统进化树构建 | 第48-49页 |
| ·PbSAD疏水性分析 | 第49-50页 |
| ·PbSAD跨膜螺旋分析 | 第50-51页 |
| ·PbSAD信号肽分析 | 第51页 |
| ·PbSAD高级结构预测 | 第51-52页 |
| ·PbSAD基因原核表达 | 第52-55页 |
| ·PbSAD基因原核表达载体的构建 | 第52-53页 |
| ·重组蛋白pET32a-PbSAD的SDS-PAGE电泳分析 | 第53-55页 |
| 5. 讨论 | 第55-58页 |
| ·PbCAD基因和PbSAD基因全长克隆及生物信息学分析 | 第55-56页 |
| ·PbCAD基因和PbSAD基因原核表达分析 | 第56页 |
| ·PbCAD基因荧光定量表达分析 | 第56页 |
| ·PbCAD蛋白亚细胞定位 | 第56-58页 |
| 6. 结论 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-64页 |
| 附录 | 第64-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 作者简介 | 第66页 |
| 硕士在读期间发表的论文 | 第66页 |
