| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 第一篇 文献综述 | 第12-34页 |
| 第一章 猪链球菌2型的研究进展 | 第12-26页 |
| 1 病原学 | 第12页 |
| 2 流行病学 | 第12-13页 |
| 3 毒力因子 | 第13-16页 |
| ·荚膜多糖(CPS) | 第13页 |
| ·溶菌酶释放蛋白(MRP)和胞外因子(EF) | 第13-14页 |
| ·溶血素(SLY) | 第14页 |
| ·甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH) | 第14页 |
| ·纤连蛋白结合蛋白(FBPS) | 第14页 |
| ·二元信号转导系统 | 第14-15页 |
| ·89Kb毒力岛 | 第15页 |
| ·SortaseA蛋白(SrtA) | 第15页 |
| ·血清浑浊因子(OFS) | 第15页 |
| ·其他毒力因子 | 第15-16页 |
| 4 猪链球菌病的诊断与鉴定 | 第16-17页 |
| ·临床症状 | 第16页 |
| ·病理变化 | 第16页 |
| ·诊断 | 第16-17页 |
| 5 猪链球菌2型感染模型 | 第17-19页 |
| ·猪 | 第17页 |
| ·小鼠 | 第17-18页 |
| ·斑马鱼 | 第18-19页 |
| 参考文献 | 第19-26页 |
| 第二章 RTX的研究进展 | 第26-30页 |
| 1 RTX的结构 | 第26-27页 |
| ·RTX的基因结构 | 第26-27页 |
| ·RTX的蛋白结构 | 第27页 |
| 2 RTX的种类 | 第27-28页 |
| 3 RTX在猪链球菌中的功能研究 | 第28-29页 |
| 4 RTX在其他细菌中的功能研究 | 第29-30页 |
| ·RTX在胸膜肺炎放线杆菌的功能研究 | 第29页 |
| ·RTX在大肠杆菌中的功能研究 | 第29-30页 |
| 参考文献 | 第30-34页 |
| 第二篇 试验部分 | 第34-82页 |
| 第三章 rfeA生物信息学分析及其在猪链球菌不同菌株中的分布 | 第34-50页 |
| 摘要 | 第34页 |
| 1 材料 | 第34-35页 |
| ·菌株及引物 | 第34-35页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第35页 |
| 2 方法 | 第35-38页 |
| ·ZY05719和T15全基因组的提取 | 第35-36页 |
| ·核酸浓度检测及全基因组测序 | 第36-37页 |
| ·强毒株ZY05719和弱毒株T15全基因组比对 | 第37页 |
| ·对rfeA基本信息学分析 | 第37页 |
| ·引物的设计 | 第37页 |
| ·不同猪链球菌rfeA基因的扩增 | 第37-38页 |
| 3 结果 | 第38-46页 |
| ·强毒株与弱毒株全基因组比对 | 第38-42页 |
| ·rfeA生物学特征 | 第42-43页 |
| ·不同菌株中rfeA基因的分布 | 第43-46页 |
| 4 讨论 | 第46-47页 |
| ABSTRACT | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-50页 |
| 第四章 猪链球菌2型rfeA基因缺失株及互补株的构建及其生物学特性分析 | 第50-66页 |
| 摘要 | 第50页 |
| 1 材料 | 第50-52页 |
| ·菌株、质粒和引物 | 第50-52页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第52页 |
| 2 方法 | 第52-57页 |
| ·rfeA基因缺失株载体的构建和鉴定 | 第52-54页 |
| ·rfeA基因敲除株的构建和鉴定 | 第54-56页 |
| ·互补株的构建 | 第56页 |
| ·野生株、缺失株和互补株的毒力试验 | 第56-57页 |
| ·野生株、缺失株、互补株生物学性状分析 | 第57页 |
| 3 结果 | 第57-61页 |
| ·rfeA缺失株的构建 | 第57-58页 |
| ·rfeA互补株的构建 | 第58-59页 |
| ·rfeA野生株、缺失株、互补株的毒力比较 | 第59-60页 |
| ·rfeA野生株、缺失株和互补株的生物学特性分析 | 第60-61页 |
| 4 讨论 | 第61-63页 |
| ABSTRACT | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-66页 |
| 第五章 rfeA对野生株、缺失株和互补株可能毒力因子的转录水平的影响 | 第66-74页 |
| 摘要 | 第66页 |
| 1 材料 | 第66-67页 |
| ·菌株与引物 | 第66-67页 |
| ·试剂与仪器 | 第67页 |
| 2 方法 | 第67-69页 |
| ·野生株、缺失株和互补株RNA的提取 | 第67-68页 |
| ·RNA反转录 | 第68-69页 |
| ·野生株、缺失株和互补株荧光定量PCR | 第69页 |
| 3 结果 | 第69-70页 |
| ·野生株、缺失株和互补株的RNA的提取 | 第69-70页 |
| ·rfeA对毒力基因及其邻近基因转录的影响 | 第70页 |
| 4 讨论 | 第70-71页 |
| ABSTRACT | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-74页 |
| 第六章 猪链球菌2型RfeA的原核表达及特性分析 | 第74-82页 |
| 摘要 | 第74页 |
| 1 材料 | 第74-75页 |
| ·菌株、质粒 | 第74页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第74-75页 |
| 2 方法 | 第75-76页 |
| ·rfeA全基因合成以及pET32a-rfeA重组质粒构建 | 第75页 |
| ·pET32a-rfeA重组质粒的鉴定 | 第75页 |
| ·RfeA的表达 | 第75页 |
| ·RfeA蛋白的Western blotting分析 | 第75-76页 |
| 3 结果 | 第76-78页 |
| ·密码子优化 | 第76-77页 |
| ·重组菌的PCR鉴定 | 第77-78页 |
| ·重组蛋白的Western blot鉴定 | 第78页 |
| 4 讨论 | 第78-79页 |
| ABSTRACT | 第79-80页 |
| 参考文献 | 第80-82页 |
| 全文总结 | 第82-84页 |
| 致谢 | 第84页 |
