摘要 | 第1-3页 |
Abstract | 第3-7页 |
第1章 前言 | 第7-19页 |
·花粉管壁的重要作用 | 第7-14页 |
·花粉管的生长及花粉管壁的组成 | 第7-8页 |
·花粉管果胶壁的组成和分布 | 第8-9页 |
·果胶甲基酯酶(PMEs)对花粉管果胶壁的调控 | 第9-10页 |
·PMEs活性的调控 | 第10-11页 |
·PMEs相关基因的背景及其对花粉管生长的影响 | 第11-14页 |
·生长素响应因子(ARF)家族的相关研究 | 第14-17页 |
·ARF家族基因的表达分布及其分子保守性 | 第14-15页 |
·ARF家族基因的表达调控及其作用机制 | 第15页 |
·ARF17缺失对植物花粉壁发育的影响 | 第15-17页 |
·生长素对花粉管生长的调控作用 | 第17-18页 |
·本课题的研究内容和意义 | 第18-19页 |
第2章 材料与方法 | 第19-37页 |
·实验材料 | 第19页 |
·植物材料 | 第19页 |
·菌株 | 第19页 |
·质粒 | 第19页 |
·实验试剂 | 第19-20页 |
·实验仪器 | 第20-21页 |
·实验方法 | 第21-35页 |
·拟南芥的种植和培养 | 第21页 |
·拟南芥花粉收集 | 第21页 |
·拟南芥花粉管的萌发和培养 | 第21-22页 |
·拟南芥花粉管萌发率和长度统计 | 第22页 |
·植物总DNA提取 | 第22页 |
·花粉管RNA抽取 | 第22-23页 |
·RNA反转录 | 第23页 |
·PCR扩增目的片段 | 第23-24页 |
·PCR鉴定阳性克隆 | 第24页 |
·Real Time PCR | 第24-25页 |
·抽提大肠杆菌质粒 | 第25页 |
·双酶切反应 | 第25页 |
·T4酶连接片段 | 第25页 |
·重组酶重组片段 | 第25-26页 |
·转化大肠杆菌 | 第26页 |
·农杆菌感受态制备 | 第26页 |
·转化农杆菌 | 第26-27页 |
·侵染拟南芥植株 | 第27页 |
·筛选拟南芥阳性转基因植株 | 第27-28页 |
·花粉管壁染色 | 第28页 |
·原核表达蛋白及其纯化 | 第28-29页 |
·SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第29-30页 |
·凝胶迁移实验(EMSA) | 第30-31页 |
·染色质免疫共沉淀(ChIP) | 第31-35页 |
·烟草瞬时转化实验 | 第35页 |
·实验所用引物序列和软件网站 | 第35-37页 |
第3章 结果 | 第37-46页 |
·arf17花粉及其花粉管的分离 | 第37-38页 |
·arf17花粉萌发延迟,花粉管生长缓慢 | 第38-39页 |
·arf17的花粉管胼胝质壁无显著异常 | 第39-40页 |
·arf17的花粉管果胶壁修饰异常 | 第40-42页 |
·PME家族相关的基因在arf17中表达下调 | 第42-43页 |
·ARF17对PME家族成员AT2G47550有直接的调控作用 | 第43-46页 |
第4章 讨论 | 第46-48页 |
·ARF17 对花粉壁和花粉管壁的调控有差异 | 第46-47页 |
·生长素与花药发育、花粉管伸长 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-54页 |
致谢 | 第54-55页 |