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维甲酸-miR-16-CDC25B通路对多发性骨髓瘤发病机制的研究

附录第1-5页
中文摘要第5-8页
英文摘要第8-12页
前言第12-14页
第一部分 CDC25B在多发性骨髓瘤中的表达及功能研究第14-37页
   ·引言第14-15页
   ·材料第15-19页
     ·细胞株及临床标本第15-16页
     ·主要试剂及检测试剂盒第16页
     ·Western-blotting 相关试剂第16-18页
     ·RNA 制备及荧光定量 PCR 相关试剂盒第18页
     ·主要实验仪器第18-19页
   ·方法第19-29页
     ·细胞培养、冻存、复苏与计数第19-21页
     ·Western blot 法检测 CDC25B 蛋白在多发性骨髓瘤患者中的表达第21-23页
     ·荧光实时定量 PCR( real-time PCR)法检测 CDC25B 在 MM 细胞 U266 和 RPMI8226 中的表达第23-24页
     ·Western blot 检测 CDC25B 在 MM 细胞株 U266 和 RPMI8226 中的表达第24-25页
     ·sh RNA-CDC25B 慢病毒表达载体构建及鉴定第25-26页
     ·包装病毒及感染细胞第26-28页
     ·real-time PCR 及 Western blot 法检测稳定细胞株 CDC25B 表达第28页
     ·CDC25B 基因沉默后对 MM 细胞增殖、细胞周期、细胞凋亡的影响第28-29页
     ·统计学处理第29页
   ·结果第29-34页
     ·CDC25B 在 MM 中的表达第29-30页
     ·sh RNA 干扰后抑制 RPMI8226 CDC25B 的表达第30-31页
     ·shRNA 干扰  CDC25B 后对 RPMI8226 增殖及细胞周期的影响第31-33页
     ·shRNA 干扰 CDC25B 表达后对 RPMI8226 细胞凋亡的影响第33-34页
   ·讨论第34-36页
   ·结论第36-37页
第二部分 miR-16 靶向抑制CDC25B基因后对骨髓瘤细胞生物学特性的研究第37-51页
   ·引言第37-38页
   ·材料第38-39页
     ·材料与试剂第38页
     ·细胞培养第38-39页
   ·方法第39-43页
     ·荧光素酶报告系统检测 mi R-16 对 CDC25B 的影响第39-42页
     ·鉴定 mi R-16 在不同 MM 细胞中的表达第42页
     ·高表达 mi R-16 慢病毒表达载体的构建及鉴定第42-43页
     ·包装病毒及感染细胞株第43页
     ·高表达 mi R-16 后对 MM 细胞增殖、细胞周期、细胞凋亡的影响第43页
     ·统计学处理第43页
   ·结果第43-48页
     ·CDC25B 表达受 mi R-16 调控第43-44页
     ·慢病毒感染骨髓瘤细胞及结果鉴定第44-45页
     ·过表达 mi R-16 后对 MM 细胞 CDC25B 表达的影响第45-46页
     ·过表达 mi R-16 后对 RPMI8226 增殖、细胞周期和凋亡的影响第46-48页
   ·讨论第48-50页
   ·结论第50-51页
第三部分 全反式维甲酸对骨髓瘤细胞生物学效应及其机制研究第51-58页
   ·引言第51-52页
   ·材料与试剂第52页
   ·方法第52-53页
     ·CCK8 法检测 ATRA 作用后骨髓瘤细胞的增殖、FCM 检测 ATRA 作用后 骨髓瘤细胞周期和凋亡第52-53页
     ·real-time PCR Western blot 法检测 mi R-16 和 CDC25B 的表达第53页
     ·统计学处理第53页
   ·结果第53-55页
     ·ATRA 作用 RPMI8226 后对细胞增殖、细胞周期、凋亡的影响第53-55页
     ·ATRA 对 MM 细胞 mi R-16 和 CDC25B 表达的影响第55页
   ·讨论第55-57页
   ·结论第57-58页
全文总结第58-59页
参考文献第59-65页
综述第65-73页
 参考文献第70-73页
致谢第73页

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