附录 | 第1-5页 |
中文摘要 | 第5-8页 |
英文摘要 | 第8-12页 |
前言 | 第12-14页 |
第一部分 CDC25B在多发性骨髓瘤中的表达及功能研究 | 第14-37页 |
·引言 | 第14-15页 |
·材料 | 第15-19页 |
·细胞株及临床标本 | 第15-16页 |
·主要试剂及检测试剂盒 | 第16页 |
·Western-blotting 相关试剂 | 第16-18页 |
·RNA 制备及荧光定量 PCR 相关试剂盒 | 第18页 |
·主要实验仪器 | 第18-19页 |
·方法 | 第19-29页 |
·细胞培养、冻存、复苏与计数 | 第19-21页 |
·Western blot 法检测 CDC25B 蛋白在多发性骨髓瘤患者中的表达 | 第21-23页 |
·荧光实时定量 PCR( real-time PCR)法检测 CDC25B 在 MM 细胞 U266 和 RPMI8226 中的表达 | 第23-24页 |
·Western blot 检测 CDC25B 在 MM 细胞株 U266 和 RPMI8226 中的表达 | 第24-25页 |
·sh RNA-CDC25B 慢病毒表达载体构建及鉴定 | 第25-26页 |
·包装病毒及感染细胞 | 第26-28页 |
·real-time PCR 及 Western blot 法检测稳定细胞株 CDC25B 表达 | 第28页 |
·CDC25B 基因沉默后对 MM 细胞增殖、细胞周期、细胞凋亡的影响 | 第28-29页 |
·统计学处理 | 第29页 |
·结果 | 第29-34页 |
·CDC25B 在 MM 中的表达 | 第29-30页 |
·sh RNA 干扰后抑制 RPMI8226 CDC25B 的表达 | 第30-31页 |
·shRNA 干扰 CDC25B 后对 RPMI8226 增殖及细胞周期的影响 | 第31-33页 |
·shRNA 干扰 CDC25B 表达后对 RPMI8226 细胞凋亡的影响 | 第33-34页 |
·讨论 | 第34-36页 |
·结论 | 第36-37页 |
第二部分 miR-16 靶向抑制CDC25B基因后对骨髓瘤细胞生物学特性的研究 | 第37-51页 |
·引言 | 第37-38页 |
·材料 | 第38-39页 |
·材料与试剂 | 第38页 |
·细胞培养 | 第38-39页 |
·方法 | 第39-43页 |
·荧光素酶报告系统检测 mi R-16 对 CDC25B 的影响 | 第39-42页 |
·鉴定 mi R-16 在不同 MM 细胞中的表达 | 第42页 |
·高表达 mi R-16 慢病毒表达载体的构建及鉴定 | 第42-43页 |
·包装病毒及感染细胞株 | 第43页 |
·高表达 mi R-16 后对 MM 细胞增殖、细胞周期、细胞凋亡的影响 | 第43页 |
·统计学处理 | 第43页 |
·结果 | 第43-48页 |
·CDC25B 表达受 mi R-16 调控 | 第43-44页 |
·慢病毒感染骨髓瘤细胞及结果鉴定 | 第44-45页 |
·过表达 mi R-16 后对 MM 细胞 CDC25B 表达的影响 | 第45-46页 |
·过表达 mi R-16 后对 RPMI8226 增殖、细胞周期和凋亡的影响 | 第46-48页 |
·讨论 | 第48-50页 |
·结论 | 第50-51页 |
第三部分 全反式维甲酸对骨髓瘤细胞生物学效应及其机制研究 | 第51-58页 |
·引言 | 第51-52页 |
·材料与试剂 | 第52页 |
·方法 | 第52-53页 |
·CCK8 法检测 ATRA 作用后骨髓瘤细胞的增殖、FCM 检测 ATRA 作用后 骨髓瘤细胞周期和凋亡 | 第52-53页 |
·real-time PCR Western blot 法检测 mi R-16 和 CDC25B 的表达 | 第53页 |
·统计学处理 | 第53页 |
·结果 | 第53-55页 |
·ATRA 作用 RPMI8226 后对细胞增殖、细胞周期、凋亡的影响 | 第53-55页 |
·ATRA 对 MM 细胞 mi R-16 和 CDC25B 表达的影响 | 第55页 |
·讨论 | 第55-57页 |
·结论 | 第57-58页 |
全文总结 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-65页 |
综述 | 第65-73页 |
参考文献 | 第70-73页 |
致谢 | 第73页 |