| 摘要 | 第1-9页 |
| 英文摘要 | 第9-11页 |
| 1. 前言 | 第11-18页 |
| ·SARS 冠状病毒及SARS 研究进展 | 第11-15页 |
| ·SARS-CoV 在冠状病毒家族中的分类学地位 | 第11页 |
| ·SARS-CoV 的分子生物学特性 | 第11-12页 |
| ·SARS-CoV 的结构蛋白及其生物学功能 | 第12-13页 |
| ·SARS 疫苗的研究 | 第13-15页 |
| ·免疫佐剂的研究进展 | 第15-17页 |
| ·铝佐剂、MF59 以及磷酸钙佐剂 | 第15-16页 |
| ·细胞因子佐剂 | 第16页 |
| ·CpG ODN | 第16页 |
| ·霍乱毒素B 亚单位 （Cholera Toxin B subunit，CTB） | 第16-17页 |
| ·实验目的与意义 | 第17-18页 |
| 2. 材料与方法 | 第18-32页 |
| ·材料 | 第18-19页 |
| ·菌株与载体 | 第18页 |
| ·实验动物 | 第18页 |
| ·主要试剂 | 第18页 |
| ·标准参照物 | 第18-19页 |
| ·主要仪器设备 | 第19页 |
| ·实验方法 | 第19-32页 |
| ·SARS-CoV S1 基因及霍乱毒素B 亚单位的亚克隆及原核表达 | 第19-24页 |
| ·SARS-CoV S1 蛋白及CTB 蛋白多克隆抗体制备 | 第24页 |
| ·真核表达质粒的构建及体外瞬时表达检测 | 第24-26页 |
| ·真核表达质粒的大量制备 | 第26-27页 |
| ·实验动物分组及其处理 | 第27-28页 |
| ·试验材料采取及处理 | 第28-29页 |
| ·免疫小鼠T 淋巴细胞增殖实验 | 第29页 |
| ·免疫小鼠脾脏及外周血T 淋巴细胞亚型检测 | 第29页 |
| ·酶联免疫吸附实验 （ELISA） 检测外周血中抗S1 蛋白抗体 | 第29-30页 |
| ·免疫小鼠脾脏及外周血特异性细胞毒性T 淋巴细胞实验 | 第30页 |
| ·小鼠外周血IFN-γ的检测 | 第30-31页 |
| ·小鼠外周血IL-4 的检测 | 第31页 |
| ·数据处理 | 第31-32页 |
| 3. 结果与分析 | 第32-56页 |
| ·SARS-CoV S1 基因及霍乱毒素B 亚单位的亚克隆及原核表达 | 第32-39页 |
| ·重组质粒pGE-S1 与pGE-CTB 的构建与鉴定 | 第32-34页 |
| ·SARS-CoV S1 基因的原核表达、鉴定与纯化 | 第34-37页 |
| ·CTB 基因的原核表达、鉴定与纯化 | 第37-39页 |
| ·SARS-CoV S1 蛋白与CTB 蛋白多克隆抗体制备及效价检测 | 第39-41页 |
| ·真核表达质粒的构建及体外瞬时表达检测 | 第41-47页 |
| ·真核表达质粒pVAX-S1、pVAX-CTB 和pVAX-S1-CTB 的构建 | 第41-43页 |
| ·真核表达质粒体外瞬时表达检测 | 第43-47页 |
| ·小鼠脾脏及外周血T 淋巴细胞增殖功能动态变化 | 第47-48页 |
| ·脾脏T 淋巴细胞增殖功能动态变化 | 第47页 |
| ·外周血T 淋巴细胞增殖动态变化 | 第47-48页 |
| ·免疫小鼠脾脏及外周血T 淋巴细胞亚型动态变化 | 第48-52页 |
| ·脾脏CD4~+T 淋巴细胞动态变化 | 第48-49页 |
| ·外周血CD4~+T 淋巴细胞动态变化 | 第49-50页 |
| ·脾脏CD8~+T 淋巴细胞动态变化 | 第50-51页 |
| ·外周血CD8~+T 淋巴细胞动态变化 | 第51-52页 |
| ·免疫小鼠脾脏及血液特异性细胞毒性T 淋巴细胞活性检测 | 第52-53页 |
| ·脾脏特异性细胞毒性T 淋巴细胞活性检测 | 第52-53页 |
| ·外周血特异性细胞毒性T 淋巴细胞活性检测 | 第53页 |
| ·小鼠外周血抗SARS-CoV S1 IgG 抗体含量动态变化 | 第53-54页 |
| ·小鼠外周血IFN-γ的检测 | 第54-55页 |
| ·小鼠外周血IL-4 的检测 | 第55-56页 |
| 4. 讨论 | 第56-63页 |
| ·真核表达载体的选择 | 第56页 |
| ·SARS-CoV S1 基因和佐剂CTB 重组质粒联合免疫设计 | 第56-57页 |
| ·SARS-CoV S1 蛋白及霍乱毒素B 亚单位的原核表达 | 第57-58页 |
| ·重组真核表达质粒体外瞬时转染分析 | 第58页 |
| ·脾脏及外周血T 淋巴细胞增殖活性分析 | 第58-59页 |
| ·脾脏及外周血T 淋巴细胞亚群动态变化及特异性T 淋巴细胞毒性检测结果分析.. | 第59-60页 |
| ·脾脏及外周血CD4~+T 淋巴细胞动态变化结果分析 | 第59页 |
| ·脾脏及外周血CD8~+T 淋巴细胞动态变化结果分析 | 第59-60页 |
| ·脾脏及外周血特异性T 淋巴细胞毒性结果分析 | 第60页 |
| ·小鼠外周血抗SARS-CoV S1 IgG 抗体含量动态变化分析 | 第60-61页 |
| ·细胞因子IL-4 及IFN-γ含量分析 | 第61-63页 |
| 5. 结论 | 第63-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-70页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第70页 |
