| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-12页 |
| 目录 | 第12-16页 |
| 第一篇 AtSARK与SSPP互作调控叶片衰老机制的研究 | 第16-85页 |
| 第一章 引言 | 第17-35页 |
| 第一节 植物叶片衰老 | 第17-19页 |
| ·叶片衰老概述 | 第17-18页 |
| ·蛋白质可逆磷酸化参与叶片衰老调控 | 第18-19页 |
| 第二节 植物叶片衰老中的蛋白激酶 | 第19-26页 |
| ·蛋白激酶分类 | 第19-20页 |
| ·重要的参与叶片衰老调控的蛋白激酶 | 第20-23页 |
| ·类受体蛋白激酶自磷酸化的发生与生物学功能的关系 | 第23-26页 |
| 第三节 植物叶片衰老中的蛋白磷酸酶 | 第26-33页 |
| ·蛋白磷酸酶的分类 | 第26-27页 |
| ·蛋白磷酸酶在植物中的作用 | 第27-30页 |
| ·重要的参与叶片衰老调控的蛋白磷酸酶 | 第30页 |
| ·蛋白磷酸酶对蛋白激酶功能的调控 | 第30-33页 |
| 第五节 课题的提出及意义 | 第33-35页 |
| 第二章 材料与方法 | 第35-45页 |
| 第一节 实验材料 | 第35-36页 |
| ·植物材料与生长条件 | 第35页 |
| ·菌株与载体 | 第35页 |
| ·生化试剂 | 第35-36页 |
| 第二节 实验方法 | 第36-45页 |
| ·拟南芥种植 | 第36页 |
| ·序列分析方法 | 第36页 |
| ·乙烯释放量测定 | 第36页 |
| ·表达载体构建,植物转化,酵母转化 | 第36-37页 |
| ·拟南芥黑暗处理 | 第37-38页 |
| ·点突变质粒构建 | 第38页 |
| ·RNA提取和RT-PCR基因表达分析 | 第38页 |
| ·蛋白质原核表达和纯化 | 第38页 |
| ·拟南芥原生质体的制备与转化 | 第38-39页 |
| ·Pulldown和双分子荧光互补实验 | 第39页 |
| ·磷酸酶活性测定 | 第39页 |
| ·体外磷酸化实验 | 第39-40页 |
| ·酵母双杂交实验 | 第40-45页 |
| 第三章 实验结果 | 第45-77页 |
| 第一节 蛋白磷酸酶SSPP通过与AtSARK互作调控叶片衰老 | 第45-56页 |
| ·SSPP是一个依赖于镁离子的PP2C型蛋白磷酸酶 | 第45-47页 |
| ·过表达SSPP会延缓自然衰老、黑暗诱导的衰老以及AtSARK诱导的衰老 | 第47-52页 |
| ·蛋白磷酸酶SSPP体外催化AtSARK的脱磷酸化 | 第52-54页 |
| ·SSPP能与AtSARK发生互作 | 第54-56页 |
| 第二节 AtSARK自磷酸化关键位点的分析鉴定以及与SSPP互作位点的筛选 | 第56-65页 |
| ·AtSARK自磷酸化位点分析鉴定 | 第56-59页 |
| ·自磷酸化位点突变对AtSARK自磷酸化状态的影响 | 第59-62页 |
| ·AtSARK的部分自磷酸化位点突变对AtSARK与SSPP互作的影响 | 第62-63页 |
| ·AtSARK影响互作位点T189的点突变对AtSARK功能的影响 | 第63-65页 |
| 第三节 AtSARK与SSPP其他互作组分的筛选 | 第65-77页 |
| ·AtSARK的其他候选互作组分筛选 | 第65-73页 |
| ·SSPP的候选互作组分筛选 | 第73-77页 |
| 第四章 讨论 | 第77-85页 |
| 第一节 SSPP参与叶片衰老的分子机制 | 第77-80页 |
| ·SSPP的生化性质 | 第77-78页 |
| ·过表达SSPP能抑制AtSARK的生物学功能 | 第78页 |
| ·过表达SSPP引起乙烯响应下调 | 第78-79页 |
| ·SSPP与AtSARK发生互作 | 第79-80页 |
| 第二节 AtSARK自磷酸化关键位点的鉴定和功能分析 | 第80-82页 |
| ·影响AtSARK自磷酸化状态的氨基酸残基 | 第80-81页 |
| ·SSPP与AtSARK互作机制的探索 | 第81-82页 |
| ·AtSARK的体内功能受到其与SSPP互作的影响 | 第82页 |
| 第三节 AtSARK与SSPP的其他互作组分 | 第82-85页 |
| ·AtSARK互作组分的筛选 | 第82-83页 |
| ·FBAL是衰老下调的AtSARK的互作组分 | 第83页 |
| ·SSPP互作组分筛选发现KPIL是AtSARK和SSPP共同的互作组分 | 第83-85页 |
| 第二篇 大豆GmATG8c的功能验证 | 第85-102页 |
| 第一章 引言 | 第86-90页 |
| 第一节 自噬的概述 | 第86-87页 |
| 第二节 植物自噬的生物学功能 | 第87-88页 |
| 第三节 课题的提出及意义 | 第88-90页 |
| 第二章 材料与方法 | 第90-93页 |
| 第一节 实验材料 | 第90页 |
| ·植物材料与生长条件 | 第90页 |
| ·菌株与载体 | 第90页 |
| ·生化试剂 | 第90页 |
| 第二节 实验方法 | 第90-93页 |
| ·序列分析方法 | 第90页 |
| ·构建,酵母转化以及表达检测 | 第90-91页 |
| ·碱性磷酸酶活性检测(ALP) | 第91页 |
| ·APE1装配检测 | 第91页 |
| ·MDC染色 | 第91-93页 |
| 第三章 实验结果 | 第93-100页 |
| 第一节 GmATG8c是一个响应低氮胁迫的ATG基因 | 第93-95页 |
| 第二节 GmATG8c能部分回补酵母atg8突变体 | 第95-97页 |
| 第三节 过表达GmATG8c能增加自噬小体的积累 | 第97-98页 |
| 第四节 过表达GmATG8c能促进大豆愈伤组织生长 | 第98-100页 |
| 第四章 讨论 | 第100-102页 |
| 创新与突破 | 第102-103页 |
| 参考文献 | 第103-119页 |
| 致谢 | 第119-120页 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第120页 |
