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水稻PCD及抗病相关基因SPL5的功能分析

附件第1-6页
摘要第6-7页
Abstract第7-9页
缩略表第9-10页
第一章 文献综述第10-24页
 1 细胞程序性死亡(PCD)概述第10页
 2 植物类病变突变体(LMM)第10-11页
 3 LMM的一般特征第11-12页
 4 LMM在PCD研究中的作用第12-14页
   ·鞘脂类LMM在PCD中的作用第12-13页
   ·Ca~(2+)相关LMM与PCD的联系第13页
   ·叶绿体相关LMM在PCD中的作用第13-14页
 5 植物PCD及抗病信号途径中的信号分子第14-19页
   ·活性氧(ROS)及一氧化氮(NO)第14-16页
   ·植物激素第16-19页
     ·水杨酸(SA)信号途径第16-17页
     ·茉莉酸(JA)及乙烯(ET)信号途径第17-18页
     ·其他激素的作用第18-19页
 6 水稻LMM的研究进展第19-20页
 7 RNA剪接及可变剪接第20-23页
   ·pre-mRNA剪接的基本过程第20-21页
   ·pre-mRNA剪接过程中的剪接因子第21-22页
   ·可变剪接及其生物学功能第22-23页
 8 本研究的内容和意义第23-24页
第二章 水稻SPL5基因的组织表达分析及亚细胞定位第24-40页
 1 材料和方法第24-33页
   ·植物材料第24页
   ·质粒和菌株第24页
   ·水稻SPL5基因的组织表达分析第24-28页
     ·水稻育苗及取样第24-25页
     ·总RNA的提取第25页
     ·总RNA的纯化第25-26页
     ·cDNA第一链的合成第26页
     ·半定量RT-PCR表达分析第26-27页
     ·实时荧光定量PCR(qPCR)表达分析第27-28页
   ·水稻SPL5基因的GUS组织化学染色第28-30页
     ·pCAMBIA1300-SPL5 pro::SPL5:GUS表达载体的构建第28页
     ·根癌农杆菌介导的水稻遗传转化第28-30页
   ·水稻SPL5基因的亚细胞定位第30-33页
     ·pCAMBIA1300S::EGFP:SPL5亚细胞定位载体的构建第30页
     ·基因枪轰击法转化洋葱表皮细胞第30-32页
     ·农杆菌侵染法转化烟草表皮细胞第32-33页
     ·激光共聚焦显微镜成像检测第33页
 2 结果分析第33-37页
   ·水稻SPL5基因在不同组织中的RT-PCR及qPCR表达分析第33-34页
   ·水稻SPL5基因的GUS组织化学染色第34-35页
     ·pCAMBIA1300-SPL5 pro::SPL5:GUS表达载体的构建第34-35页
     ·SPL5 pro::SPL5:GUS转基因水稻的构建及抗性愈伤的GUS染色第35页
   ·水稻SPL5基因的亚细胞定位第35-37页
     ·pCAMBIA1300S::EGFP:SPL5表达载体的构建第35-36页
     ·SPL5在洋葱表皮细胞中的亚细胞定位第36页
     ·SPL5在烟草原生质体中的亚细胞定位第36-37页
 3 讨论第37-40页
第三章 SPL5调控的PCD及抗病信号途径分析第40-50页
 1 材料和方法第40-43页
   ·植物材料第40-41页
   ·基因芯片的制作第41页
     ·总RNA的提取及纯化第41页
     ·芯片杂交第41页
   ·差异基因的筛选及其生物信息学分析第41-42页
   ·差异基因的qPCR表达分析第42页
   ·高效液相色谱检测第42-43页
     ·Tryptophan,Tryptamine,Serotonin的提取第42页
     ·高效液相色谱检测第42-43页
 2 结果分析第43-47页
   ·差异基因的筛选及其功能分类第43-44页
   ·差异基因的聚类及pathway分析第44-45页
   ·差异基因的qPCR表达分析第45-47页
   ·高效液相色谱检测第47页
 3 讨论第47-50页
第四章 SPL5对水稻基因的可变剪接调控分析第50-54页
 1 材料和方法第50-51页
   ·植物材料第50页
   ·转录组测序第50页
   ·可变剪接差异基因的筛选及其生物信息学分析第50-51页
 2 结果分析第51-53页
   ·可变剪接差异基因的筛选第51页
   ·可变剪接差异基因的功能分类第51-53页
 3 讨论第53-54页
参考文献第54-66页
附录第66-68页
致谢第68-70页
攻读硕士学位期间发表的学术论文目录第70-72页

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