摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
缩略语表 | 第8-9页 |
目录 | 第9-13页 |
研究的目的和意义 | 第13-14页 |
1 文献综述 | 第14-27页 |
·棉花组织培养的研究进展 | 第14页 |
·影响棉花组织培养再生主要因素 | 第14-17页 |
·基因型 | 第14-15页 |
·外植体的选择 | 第15-17页 |
·子叶节为外植体诱导丛生芽和以茎尖为受体的转化体系 | 第15-16页 |
·农杆菌介导的转化花粉授粉后进而获得转化植株 | 第16-17页 |
·激素 | 第17页 |
·棉花遗传转化常用的方法 | 第17-21页 |
·农杆菌介导法 | 第17-20页 |
·花粉管通道法 | 第20页 |
·基因枪法 | 第20-21页 |
·其他方法 | 第21页 |
·棉花转基因的研究进展 | 第21-25页 |
·棉花抗虫基因工程研究进展 | 第21-22页 |
·棉花纤维品质改良的研究进展 | 第22-25页 |
·棉花纤维发育相关 SM 基因的简介 | 第25-27页 |
2 以新陆早 45 号下胚轴为外植体再生体系的建立 | 第27-34页 |
·实验材料 | 第27页 |
·培养基 | 第27-28页 |
·苗培养基(1/2MS) | 第27页 |
·愈伤组织诱导培养基 | 第27页 |
·胚性愈伤组织诱导培养基(YP) | 第27-28页 |
·分化培养基(YF) | 第28页 |
·生根培养基(F5) | 第28页 |
·实验方法 | 第28-29页 |
·外植体的制备 | 第28页 |
·愈伤组织的诱导与继代 | 第28页 |
·胚性愈伤组织的诱导 | 第28页 |
·分化培养 | 第28-29页 |
·生根培养 | 第29页 |
·再生苗的嫁接 | 第29页 |
·结果与分析 | 第29-32页 |
·不同激素组织对愈伤组织的诱导 | 第29-31页 |
·胚性愈伤组织的诱导与分化 | 第31页 |
·生根培养及嫁接成活 | 第31-32页 |
·讨论 | 第32-34页 |
3 农杆菌介导新陆早 33 号胚性愈伤组织的转化体系建立 | 第34-46页 |
·实验材料 | 第34页 |
·实验试剂 | 第34-37页 |
·SDS 碱裂解法提取质粒 DNA 所需试剂 | 第34-35页 |
·棉花基因组 DNA 提取所需试剂 | 第35页 |
·电泳缓冲液 | 第35-36页 |
·细菌培养基 | 第36页 |
·胚性愈伤转化培养基 | 第36页 |
·抗生素 | 第36-37页 |
·实验仪器 | 第37页 |
·菌株 | 第37页 |
·实验方法 | 第37-41页 |
·质粒 DNA 的提取 | 第37-38页 |
·农杆菌感受态的制备及转化 | 第38页 |
·农杆菌感受态的制备 | 第38页 |
·采用冻融法将含有目的基因的质粒转化至农杆菌 | 第38页 |
·菌液的制备 | 第38-39页 |
·农杆菌介导转化棉花胚性愈伤组织 | 第39页 |
·转化后材料的分子鉴定 | 第39-40页 |
·胚性愈伤组织和转基因植株的 DNA 提取(CTAB 法) | 第39-40页 |
·胚性愈伤组织和转基因植株的 PCR 检测 | 第40页 |
·阳性植株的移栽及抗性鉴定 | 第40-41页 |
·结果 | 第41-44页 |
·受体胚性愈伤组织的选择 | 第41页 |
·抗性胚性愈伤组织的获得和植株再生 | 第41-42页 |
·抗性胚性愈伤的分子检测 | 第42页 |
·转基因植株的分子检测 | 第42-44页 |
·嫁接 | 第44页 |
·讨论 | 第44-46页 |
·关于受体胚性愈伤组织的状态 | 第44-45页 |
·关于农杆菌的侵染 | 第45页 |
·转基因植株后代的鉴定 | 第45-46页 |
4 以成熟胚为受体转基因体系的建立 | 第46-60页 |
·实验材料 | 第46页 |
·实验仪器 | 第46页 |
·培养基 | 第46-48页 |
·成熟胚转化培养基 | 第46-47页 |
·细菌培养基 | 第47页 |
·GUS 染液配制 | 第47-48页 |
·载体和菌株 | 第48页 |
·方法 | 第48-52页 |
·转基因棉花叶片 DNA 提取步骤 | 第48-49页 |
·GUS 组织化学检测的步骤 | 第49页 |
·农杆菌介导棉花成熟胚的转化 | 第49-50页 |
·不同转化条件的设计 | 第50-51页 |
·液浓度梯度的设计 | 第50页 |
·不同侵染时间的比较 | 第50页 |
·表面活性剂的应用 | 第50页 |
·棉花基因型的筛选 | 第50-51页 |
·抗生素浓度的筛选 | 第51页 |
·生根培养 | 第51-52页 |
·结果与分析 | 第52-57页 |
·不同菌液浓度的比较 | 第52页 |
·不同侵染时间的比较 | 第52页 |
·表面活性剂的影响 | 第52页 |
·棉花基因型对转化效率的影响 | 第52-55页 |
·抗生素浓度对转化效率的影响 | 第55页 |
·生根培养 | 第55页 |
·PCR 检测结果 | 第55页 |
·kan 叶片喷施 | 第55-57页 |
·讨论 | 第57-60页 |
·关于农杆菌侵染条件 | 第57页 |
·关于表面活性剂的作用 | 第57-58页 |
·关于棉花基因型 | 第58页 |
·关于抗生素 | 第58页 |
·转基因材料后代分析 | 第58-60页 |
5 结论与展望 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-66页 |
个人简介 | 第66-67页 |
致谢 | 第67页 |