| 致谢 | 第1-7页 |
| 摘要 | 第7-8页 |
| 1. 文献综述 | 第8-19页 |
| ·防御素的种类、分布及结构 | 第8-10页 |
| ·防御素的生物学活性 | 第10-11页 |
| ·抗菌活性 | 第10页 |
| ·抗病毒活性 | 第10-11页 |
| ·抗肿瘤活性 | 第11页 |
| ·抗寄生虫活性 | 第11页 |
| ·防御素的作用机理 | 第11-13页 |
| ·防御素的分子改造 | 第13-15页 |
| ·原核表达系统 | 第15-17页 |
| ·猪β-防御素的研究状况 | 第17-19页 |
| 2. 引言 | 第19-20页 |
| 3. 材料与方法 | 第20-31页 |
| ·实验材料 | 第20-21页 |
| ·基因片段、质粒和菌种 | 第20页 |
| ·酶和试剂盒 | 第20页 |
| ·培养基 | 第20页 |
| ·主要试剂及配制 | 第20页 |
| ·主要的仪器与设备 | 第20-21页 |
| ·主要应用软件 | 第21页 |
| ·实验方法 | 第21-31页 |
| ·定点突变基因的引物设计与合成 | 第21-22页 |
| ·PCR扩增获得目的基因 | 第22页 |
| ·PCR产物的凝胶回收 | 第22-23页 |
| ·克隆载体的构建 | 第23页 |
| ·感受态细胞的制备与转化 | 第23-24页 |
| ·重组质粒的提取 | 第24-25页 |
| ·重组质粒的筛选和鉴定 | 第25-26页 |
| ·表达载体的构建 | 第26页 |
| ·表达载体的筛选和鉴定 | 第26页 |
| ·SDS-PAGE电泳 | 第26-28页 |
| ·重组工程菌株BL21-pET30a-mpBD2的诱导表达 | 第28页 |
| ·重组目的蛋白的提取和纯化 | 第28-29页 |
| ·蛋白浓度的测定 | 第29-30页 |
| ·蛋白功能活性的分析 | 第30-31页 |
| 4. 结果与分析 | 第31-39页 |
| ·PCR扩增获得定点突变目的基因 | 第31页 |
| ·pMD19-T-mpBD2重组质粒PCR鉴定 | 第31-32页 |
| ·pMD19-T-mpBD2重组质粒双酶切鉴定 | 第32页 |
| ·pMD19-T-mPBD2重组质粒的测序鉴定 | 第32-33页 |
| ·pET30a-mpBD2重组质粒PCR鉴定 | 第33页 |
| ·pET30a-mpBD2重组质粒双酶切鉴定 | 第33-34页 |
| ·pET30a-mpBD2重组质粒测序鉴定 | 第34页 |
| ·目的蛋白的诱导表达及纯化 | 第34-35页 |
| ·目的蛋白对E.Coli29522的抑菌活性分析 | 第35-37页 |
| ·目的蛋白对S.aureus29523的抑菌活性分析 | 第37-38页 |
| ·目的蛋白的溶血活性分析 | 第38-39页 |
| 5. 结论与讨论 | 第39-41页 |
| ·讨论 | 第39-40页 |
| ·结论 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-48页 |
| 英文摘要 | 第48-50页 |
| 附件 | 第50-53页 |