| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 第1章 绪论 | 第10-19页 |
| ·VB_(12) 的结构特征及其分类 | 第10-11页 |
| ·VB_(12) 的理化性质 | 第11页 |
| ·VB_(12) 的应用及生物学功能 | 第11-12页 |
| ·VB_(12) 的生物合成途径与代谢 | 第12-13页 |
| ·VB_(12) 的生产菌株 | 第13-16页 |
| ·VB_(12) 的生产菌种 | 第13页 |
| ·丙酸菌的形态生理特性 | 第13-14页 |
| ·丙酸菌的育种技术 | 第14-16页 |
| ·抗生素对微生物的筛选 | 第16页 |
| ·微生物合成VB_(12) 的国内外发酵水平 | 第16-17页 |
| ·VB_(12) 的发展前景 | 第17页 |
| ·课题研究的意义与主要研究目的 | 第17-19页 |
| 第2章 实验材料与方法 | 第19-27页 |
| ·实验材料 | 第19-22页 |
| ·菌种 | 第19页 |
| ·实验仪器 | 第19页 |
| ·其它仪器 | 第19-20页 |
| ·实验试剂 | 第20页 |
| ·其它实验试剂 | 第20页 |
| ·培养基 | 第20-21页 |
| ·实验试剂的配制 | 第21-22页 |
| ·实验方法 | 第22-27页 |
| ·菌体培养流程 | 第22页 |
| ·菌体湿重的测定 | 第22-23页 |
| ·残糖的测定 | 第23页 |
| ·高效液相色谱仪测VB_(12) 含量 | 第23-24页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳操作步骤 | 第24页 |
| ·对已有的不同菌株进行对比筛选 | 第24页 |
| ·VB_(12) 生物合成发酵培养基的初步优化 | 第24-25页 |
| ·对菌株进行遗传操作 | 第25-26页 |
| ·突变株合成VB_(12) 的发酵学研究 | 第26-27页 |
| 第3章 实验内容与结果 | 第27-68页 |
| ·不同丙酸菌的生理研究及其筛选 | 第27-33页 |
| ·六株丙酸菌的个体形态 | 第27-28页 |
| ·六株丙酸菌的菌悬液 | 第28-30页 |
| ·六株丙酸生长情况 | 第30-33页 |
| ·丙酸杆菌发酵工艺优化结果 | 第33-46页 |
| ·培养基中葡萄糖量的影响 | 第33-35页 |
| ·培养基中玉米浆的影响 | 第35-37页 |
| ·玉米浆与葡萄糖共同影响 | 第37-39页 |
| ·VB_(12) 增效因子的筛选 | 第39-42页 |
| ·培养基pH 的影响 | 第42-44页 |
| ·DMBI 加入时间的影响 | 第44-46页 |
| ·单克隆的培养 | 第46-49页 |
| ·多孔板涂布培养单菌落 | 第46-47页 |
| ·厌氧罐固体涂布培养单菌落 | 第47-48页 |
| ·夹层培养单克隆 | 第48-49页 |
| ·反复充氮气法培养单克隆 | 第49页 |
| ·丙酸菌基因组提取及VB_(12) 相关基因的扩增 | 第49-53页 |
| ·丙酸菌基因组DNA 的提取 | 第49-50页 |
| ·对W-T 和pff 的基因组进行对比 | 第50-53页 |
| ·丙酸菌对抗生素敏感研究 | 第53-58页 |
| ·不同浓度的氯霉素对丙酸菌生长的影响 | 第53-55页 |
| ·不同浓度的潮霉素对丙酸菌的影响 | 第55-57页 |
| ·不同浓度的四环素对丙酸菌的影响 | 第57-58页 |
| ·丙酸菌菌株的遗传改造 | 第58-68页 |
| ·大肠质粒的提取以及PCR 克隆大肠质粒[56] | 第58-59页 |
| ·PCR 产物纯化回收 | 第59-60页 |
| ·电激转化结果 | 第60-61页 |
| ·转化子鉴定 | 第61-65页 |
| ·突变株合成VB_(12) 的发酵学研究 | 第65-68页 |
| 结论 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-74页 |
| 致谢 | 第74页 |