中文摘要 | 第1-14页 |
英文摘要 | 第14-17页 |
第一章 文献综述 | 第17-30页 |
1. 引言(棉纤维分化和发育研究的意义) | 第17页 |
2. 棉纤维细胞的分化、发育 | 第17-24页 |
2.1 棉纤维细胞的分化、发育及纤维素合成 | 第17-19页 |
2.1.1 棉纤维原始细胞分化、突起的时间 | 第17-18页 |
2.1.2 纤维细胞突起的部位 | 第18页 |
2.1.3 纤维原始细胞分化的数量 | 第18-19页 |
2.1.4 纤维分化过程的物质代谢 | 第19页 |
2.1.5 棉纤维细胞分化的基因调控 | 第19页 |
2.2 纤维细胞的伸长 | 第19-22页 |
2.2.1 棉纤维伸长速度、伸长期与相关酶的调节作用 | 第20页 |
2.2.2 影响棉纤维细胞伸长的作用因子 | 第20-22页 |
2.2.2.1 膨压对纤维细胞伸长的调控作用 | 第20-21页 |
2.2.2.2 棉纤维细胞初生壁的形成与纤维细胞的伸长 | 第21页 |
2.2.2.3 初生壁的组成成分变化与相关酶的调节作用 | 第21-22页 |
2.3 棉纤维细胞次生壁合成和增厚 | 第22-24页 |
2.3.1 次生壁形成的时间 | 第22页 |
2.3.2 次生壁化学组成的变化 | 第22-23页 |
2.3.3 纤维素的生物合成 | 第23-24页 |
2.3.3.1 纤维素合成的前提及来源 | 第23页 |
2.3.3.2 纤维素合成酶的研究 | 第23-24页 |
2.4 脱水成熟 | 第24页 |
3. 纤维突变体在分子生物学研究中的利用 | 第24-26页 |
3.1 纤维突变体应用于纤维细胞突起分化的研究 | 第25页 |
3.2 纤维突变体在分子标记辅助育种中的利用 | 第25-26页 |
3.3 纤维突变体在纤维相关基因结构和功能研究上的应用 | 第26页 |
4. 小结 | 第26-27页 |
参考文献 | 第27-30页 |
第二章 棉花材料RNA、DNA提取和基因片段的克隆 | 第30-42页 |
1 前言 | 第30页 |
2. 材料和方法 | 第30-35页 |
2.1 材料 | 第30页 |
2.2 方法 | 第30-35页 |
2.2.1 棉花RNA高离子高强度、高pH值提取液的提取 | 第30-31页 |
2.2.1.1 玻璃器皿和溶液的预处理 | 第30-31页 |
2.2.1.2 高离子强度、高pH值提取液配制 | 第31页 |
2.2.1.3 提取步骤 | 第31页 |
2.2.2 棉花RNA Trizol提取法提取 | 第31页 |
2.2.3 棉花RNA异硫氢酸胍提取法提取 | 第31页 |
2.2.4 棉花基因组DNA高离子、高pH值提取液提取 | 第31页 |
2.2.5 RNA、DNA紫外光谱及电泳分析 | 第31-32页 |
2.2.6 RT-PCR检测RNA | 第32页 |
2.2.7 PCR检测DNA并克隆基因片段 | 第32-33页 |
2.2.7.1 PCR反应 | 第32页 |
2.2.7.2 PCR产物克隆到质粒中 | 第32-33页 |
2.2.8 Northern杂交检测RNA的完整性 | 第33-35页 |
3. 结果与分析 | 第35-38页 |
3.1 RNA、DNA纯度和得率比较 | 第35-37页 |
3.1.1 不同提取方法所提的RNA纯度及得率比较 | 第35-36页 |
3.1.2 用高离子、高pH值法所提棉花DNA的纯度和得率 | 第36-37页 |
3.2 RNA、DNA紫外光谱分析 | 第37页 |
3.2.1 不同提取方法的RNA紫外光谱分析 | 第37页 |
3.2.2 高离子、高pH值法所提棉花DNA的紫外光谱分析 | 第37页 |
3.3 RNA、DNA电泳分析 | 第37页 |
3.3.1 不同提取方法的所提的RNA电泳分析比较 | 第37页 |
3.3.2 高离子高pH值法所提棉花DNA及其酶切分析 | 第37页 |
3.4 RT-PCR及Northern杂交分析 | 第37-38页 |
3.5 PCR反应及基因片段克隆 | 第38页 |
4. 讨论 | 第38-39页 |
5. 总结 | 第39页 |
参考文献 | 第39-42页 |
第三章 蔗糖合成酶及蔗糖酶对棉纤维分化和突起的调节作用 | 第42-55页 |
1. 前言 | 第42页 |
2. 材料与方法 | 第42-44页 |
2.1 材料 | 第42-43页 |
2.1.1 制样 | 第43页 |
2.2 方法 | 第43-44页 |
2.2.1 蔗糖的微量测定 | 第43页 |
2.2.2 可溶性总糖的测定 | 第43页 |
2.2.3 蔗糖合成酶活性的测定 | 第43-44页 |
2.2.4 苹果酸含量测定 | 第44页 |
2.2.5 蔗糖酶的测定 | 第44页 |
3. 结果与分析 | 第44-51页 |
3.1 可溶性总糖、蔗糖及蔗糖合成酶在-1DPA5个材料胚珠内的含量变化 | 第44-45页 |
3.2 可溶性总糖、蔗糖及蔗糖合成酶在ODPA5个材料胚珠内的含量变化 | 第45-46页 |
3.3 可溶性总糖、蔗糖及蔗糖合成酶在5DPA5个材料胚珠内的含量变化 | 第46-47页 |
3.4 蔗糖合成酶在开花5天内5个材料胚珠中的含量变化 | 第47-48页 |
3.5 蔗糖在开花5天内5个材料胚珠中的含量变化 | 第48-49页 |
3.6 可溶性总糖在开花5天内5个材料胚珠中的含量变化 | 第49页 |
3.7 苹果酸在开花5天内4个材料胚珠中的含量变化 | 第49-51页 |
3.8 蔗糖酶在开花5天内5个材料胚珠中的活性变化 | 第51页 |
4. 讨论 | 第51-53页 |
4.1 蔗糖合成酶对纤维细胞突起和发育的调节作用 | 第51-52页 |
4.2 膨压对纤维细胞突起和初始发育的作用 | 第52页 |
4.3 蔗糖酶对纤维细胞突起和初始发育的作用 | 第52-53页 |
5. 总结 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-55页 |
第四章 棉纤维细胞伸长与相关的基因的调控 | 第55-73页 |
1. 前言 | 第55页 |
2. 材料与方法 | 第55-60页 |
2.1 材料 | 第55-56页 |
2.1.1 制样 | 第55-56页 |
2.2 方法 | 第56-60页 |
2.2.1 纤维长度的测定 | 第56页 |
2.2.2 胚珠含水量的测定 | 第56页 |
2.2.3 苹果酸含量的测定 | 第56页 |
2.2.4 木葡聚糖含量的测定 | 第56页 |
2.2.5 Expansin基因、PEPCase基因及木葡聚糖转移酶基因的Northern杂交 | 第56页 |
2.2.6 PEPCage(磷酸烯醇式羧化酶)活性的测定 | 第56-57页 |
2.2.7 Expansin及木葡聚糖转移酶基因的Southern杂交 | 第57-60页 |
3. 结果与分析 | 第60-67页 |
3.1 棉胚珠在发育过程中的形态变化 | 第60页 |
3.2 棉纤维细胞伸长的动态变化 | 第60-61页 |
3.3 各个材料胚珠中含水量的变化 | 第61-62页 |
3.4 纤维细胞、胚和种皮细胞中木葡聚糖含量的变化 | 第62页 |
3.5 纤维细胞、胚和种皮细胞中苹果酸含量的变化 | 第62-63页 |
3.6 PEPCase在不同棉花材料不同组织部位的Northern杂交和酶活性变化 | 第63-66页 |
3.7 Expansin及木葡聚糖转移酶基因的Northern杂交结果 | 第66页 |
3.8 Expansin及木葡聚糖转移酶基因的Southern杂交结果 | 第66页 |
3.9 Expansm及木葡聚糖转移酶基因的cDNA克隆 | 第66-67页 |
4. 讨论 | 第67-69页 |
4.1 苹果酸、水分及PEPCage对纤维细胞发育的调节作用 | 第67-68页 |
4.2 木葡聚糖转移酶对纤维细胞伸长的调节作用 | 第68-69页 |
4.3 Expansin蛋白对纤维细胞伸长的调节作用 | 第69页 |
5. 总结 | 第69-70页 |
参考文献 | 第70-73页 |
第五章 影响纤维素合成相关酶的调控作用 | 第73-83页 |
1. 前言 | 第73页 |
2. 材料与方法 | 第73-74页 |
2.1 材料 | 第73-74页 |
2.1.1 制样 | 第73-74页 |
2.2 方法 | 第74页 |
2.2.1 可溶性糖及蔗糖含量的测定 | 第74页 |
2.2.2 蔗糖合成酶活性的测定 | 第74页 |
2.2.3 蔗糖酶活性的测定 | 第74页 |
2.2.4 纤维素含量的测定 | 第74页 |
2.2.5 纤维素合成酶基因的Northern杂交 | 第74页 |
2.2.6 纤维素合成酶基因的Southern杂交 | 第74页 |
3. 结果与分析 | 第74-80页 |
3.1 纤维、胚和种皮细胞中蔗糖含量的变化 | 第74-76页 |
3.2 纤维、胚和种皮细胞中的可溶性总糖含量的变化 | 第76-77页 |
3.3 纤维、胚和种皮细胞中的纤维素含量的变化 | 第77-78页 |
3.4 纤维、胚和种皮细胞中的蔗糖合成酶活性的变化 | 第78页 |
3.5 纤维、胚和种皮细胞中的蔗糖酶活性的变化 | 第78-79页 |
3.6 纤维素合成酶基因在纤维、胚和种皮细胞中的Northern杂交结果 | 第79-80页 |
3.7 纤维素合成酶基因的Southern杂交结果 | 第80页 |
4. 讨论 | 第80-82页 |
4.1 蔗糖合成酶在纤维细胞初生壁合成期及次生壁增厚期的调控作用 | 第80-81页 |
4.2 蔗糖酶在纤维细胞初生壁合成期及次生壁增厚期的调控作用 | 第81页 |
4.3 纤维素合成酶基因对纤维素合成的调控作用 | 第81-82页 |
5. 总结 | 第82-83页 |
参考文献 | 第83页 |