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棉纤维细胞分化和发育功能基因的研究

中文摘要第1-14页
英文摘要第14-17页
第一章 文献综述第17-30页
 1. 引言(棉纤维分化和发育研究的意义)第17页
 2. 棉纤维细胞的分化、发育第17-24页
  2.1 棉纤维细胞的分化、发育及纤维素合成第17-19页
   2.1.1 棉纤维原始细胞分化、突起的时间第17-18页
   2.1.2 纤维细胞突起的部位第18页
   2.1.3 纤维原始细胞分化的数量第18-19页
   2.1.4 纤维分化过程的物质代谢第19页
   2.1.5 棉纤维细胞分化的基因调控第19页
  2.2 纤维细胞的伸长第19-22页
   2.2.1 棉纤维伸长速度、伸长期与相关酶的调节作用第20页
   2.2.2 影响棉纤维细胞伸长的作用因子第20-22页
    2.2.2.1 膨压对纤维细胞伸长的调控作用第20-21页
    2.2.2.2 棉纤维细胞初生壁的形成与纤维细胞的伸长第21页
    2.2.2.3 初生壁的组成成分变化与相关酶的调节作用第21-22页
  2.3 棉纤维细胞次生壁合成和增厚第22-24页
   2.3.1 次生壁形成的时间第22页
   2.3.2 次生壁化学组成的变化第22-23页
   2.3.3 纤维素的生物合成第23-24页
    2.3.3.1 纤维素合成的前提及来源第23页
    2.3.3.2 纤维素合成酶的研究第23-24页
  2.4 脱水成熟第24页
 3. 纤维突变体在分子生物学研究中的利用第24-26页
  3.1 纤维突变体应用于纤维细胞突起分化的研究第25页
  3.2 纤维突变体在分子标记辅助育种中的利用第25-26页
  3.3 纤维突变体在纤维相关基因结构和功能研究上的应用第26页
 4. 小结第26-27页
 参考文献第27-30页
第二章 棉花材料RNA、DNA提取和基因片段的克隆第30-42页
 1 前言第30页
 2. 材料和方法第30-35页
  2.1 材料第30页
  2.2 方法第30-35页
   2.2.1 棉花RNA高离子高强度、高pH值提取液的提取第30-31页
    2.2.1.1 玻璃器皿和溶液的预处理第30-31页
    2.2.1.2 高离子强度、高pH值提取液配制第31页
    2.2.1.3 提取步骤第31页
   2.2.2 棉花RNA Trizol提取法提取第31页
   2.2.3 棉花RNA异硫氢酸胍提取法提取第31页
   2.2.4 棉花基因组DNA高离子、高pH值提取液提取第31页
   2.2.5 RNA、DNA紫外光谱及电泳分析第31-32页
   2.2.6 RT-PCR检测RNA第32页
   2.2.7 PCR检测DNA并克隆基因片段第32-33页
    2.2.7.1 PCR反应第32页
    2.2.7.2 PCR产物克隆到质粒中第32-33页
   2.2.8 Northern杂交检测RNA的完整性第33-35页
 3. 结果与分析第35-38页
  3.1 RNA、DNA纯度和得率比较第35-37页
   3.1.1 不同提取方法所提的RNA纯度及得率比较第35-36页
   3.1.2 用高离子、高pH值法所提棉花DNA的纯度和得率第36-37页
  3.2 RNA、DNA紫外光谱分析第37页
   3.2.1 不同提取方法的RNA紫外光谱分析第37页
   3.2.2 高离子、高pH值法所提棉花DNA的紫外光谱分析第37页
  3.3 RNA、DNA电泳分析第37页
   3.3.1 不同提取方法的所提的RNA电泳分析比较第37页
   3.3.2 高离子高pH值法所提棉花DNA及其酶切分析第37页
  3.4 RT-PCR及Northern杂交分析第37-38页
  3.5 PCR反应及基因片段克隆第38页
 4. 讨论第38-39页
 5. 总结第39页
 参考文献第39-42页
第三章 蔗糖合成酶及蔗糖酶对棉纤维分化和突起的调节作用第42-55页
 1. 前言第42页
 2. 材料与方法第42-44页
  2.1 材料第42-43页
   2.1.1 制样第43页
  2.2 方法第43-44页
   2.2.1 蔗糖的微量测定第43页
   2.2.2 可溶性总糖的测定第43页
   2.2.3 蔗糖合成酶活性的测定第43-44页
   2.2.4 苹果酸含量测定第44页
   2.2.5 蔗糖酶的测定第44页
 3. 结果与分析第44-51页
  3.1 可溶性总糖、蔗糖及蔗糖合成酶在-1DPA5个材料胚珠内的含量变化第44-45页
  3.2 可溶性总糖、蔗糖及蔗糖合成酶在ODPA5个材料胚珠内的含量变化第45-46页
  3.3 可溶性总糖、蔗糖及蔗糖合成酶在5DPA5个材料胚珠内的含量变化第46-47页
  3.4 蔗糖合成酶在开花5天内5个材料胚珠中的含量变化第47-48页
  3.5 蔗糖在开花5天内5个材料胚珠中的含量变化第48-49页
  3.6 可溶性总糖在开花5天内5个材料胚珠中的含量变化第49页
  3.7 苹果酸在开花5天内4个材料胚珠中的含量变化第49-51页
  3.8 蔗糖酶在开花5天内5个材料胚珠中的活性变化第51页
 4. 讨论第51-53页
  4.1 蔗糖合成酶对纤维细胞突起和发育的调节作用第51-52页
  4.2 膨压对纤维细胞突起和初始发育的作用第52页
  4.3 蔗糖酶对纤维细胞突起和初始发育的作用第52-53页
 5. 总结第53-54页
 参考文献第54-55页
第四章 棉纤维细胞伸长与相关的基因的调控第55-73页
 1. 前言第55页
 2. 材料与方法第55-60页
  2.1 材料第55-56页
   2.1.1 制样第55-56页
  2.2 方法第56-60页
   2.2.1 纤维长度的测定第56页
   2.2.2 胚珠含水量的测定第56页
   2.2.3 苹果酸含量的测定第56页
   2.2.4 木葡聚糖含量的测定第56页
   2.2.5 Expansin基因、PEPCase基因及木葡聚糖转移酶基因的Northern杂交第56页
   2.2.6 PEPCage(磷酸烯醇式羧化酶)活性的测定第56-57页
   2.2.7 Expansin及木葡聚糖转移酶基因的Southern杂交第57-60页
 3. 结果与分析第60-67页
  3.1 棉胚珠在发育过程中的形态变化第60页
  3.2 棉纤维细胞伸长的动态变化第60-61页
  3.3 各个材料胚珠中含水量的变化第61-62页
  3.4 纤维细胞、胚和种皮细胞中木葡聚糖含量的变化第62页
  3.5 纤维细胞、胚和种皮细胞中苹果酸含量的变化第62-63页
  3.6 PEPCase在不同棉花材料不同组织部位的Northern杂交和酶活性变化第63-66页
  3.7 Expansin及木葡聚糖转移酶基因的Northern杂交结果第66页
  3.8 Expansin及木葡聚糖转移酶基因的Southern杂交结果第66页
  3.9 Expansm及木葡聚糖转移酶基因的cDNA克隆第66-67页
 4. 讨论第67-69页
  4.1 苹果酸、水分及PEPCage对纤维细胞发育的调节作用第67-68页
  4.2 木葡聚糖转移酶对纤维细胞伸长的调节作用第68-69页
  4.3 Expansin蛋白对纤维细胞伸长的调节作用第69页
 5. 总结第69-70页
 参考文献第70-73页
第五章 影响纤维素合成相关酶的调控作用第73-83页
 1. 前言第73页
 2. 材料与方法第73-74页
  2.1 材料第73-74页
   2.1.1 制样第73-74页
  2.2 方法第74页
   2.2.1 可溶性糖及蔗糖含量的测定第74页
   2.2.2 蔗糖合成酶活性的测定第74页
   2.2.3 蔗糖酶活性的测定第74页
   2.2.4 纤维素含量的测定第74页
   2.2.5 纤维素合成酶基因的Northern杂交第74页
   2.2.6 纤维素合成酶基因的Southern杂交第74页
 3. 结果与分析第74-80页
  3.1 纤维、胚和种皮细胞中蔗糖含量的变化第74-76页
  3.2 纤维、胚和种皮细胞中的可溶性总糖含量的变化第76-77页
  3.3 纤维、胚和种皮细胞中的纤维素含量的变化第77-78页
  3.4 纤维、胚和种皮细胞中的蔗糖合成酶活性的变化第78页
  3.5 纤维、胚和种皮细胞中的蔗糖酶活性的变化第78-79页
  3.6 纤维素合成酶基因在纤维、胚和种皮细胞中的Northern杂交结果第79-80页
  3.7 纤维素合成酶基因的Southern杂交结果第80页
 4. 讨论第80-82页
  4.1 蔗糖合成酶在纤维细胞初生壁合成期及次生壁增厚期的调控作用第80-81页
  4.2 蔗糖酶在纤维细胞初生壁合成期及次生壁增厚期的调控作用第81页
  4.3 纤维素合成酶基因对纤维素合成的调控作用第81-82页
 5. 总结第82-83页
 参考文献第83页

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