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柿单宁基于AMPK和miRNA调节非酒精性脂肪肝和前脂肪细胞分化的分子机制

摘要第1-13页
Abstract第13-17页
縮略语第17-19页
第一章 绪论第19-42页
 1 问题的由来第19-20页
 2 NAFLD形成的可能机制第20-22页
   ·脂肪积累第20-21页
   ·氧化应激与炎症因子第21-22页
 3 植物多酚调节NAFLD的机制第22-33页
   ·降低脂肪的吸收第23-24页
   ·激活AMPK调节脂质代谢第24-29页
   ·MicroRNA与脂质代谢调节第29-33页
 4 miRNA与前脂肪细胞分化及脂肪代谢调控第33-38页
   ·前脂肪细胞的分化过程第34-36页
   ·miRNA通过PPARγ和C/EBPα调节前脂肪细胞的分化,抑制脂肪合成第36-38页
 5 柿及其提取物降脂作用研究概况第38-40页
   ·柿及其提取物降脂作用研究现状第38页
   ·目前柿及其提取物降脂研究的不足第38-40页
 6 本研究的目的意义及主要内容第40-42页
   ·本研究的目的与意义第40页
   ·技术路线第40-41页
   ·本研究的主要内容第41-42页
第二章 柿单宁对高胆固醇模型大鼠体内降脂效果确证及机理初探第42-66页
 前言第42-43页
 1 材料与方法第43-50页
   ·实验材料和仪器设备第43-45页
     ·实验材料第43页
     ·实验动物与饲料第43页
     ·主要试剂第43-44页
     ·主要仪器设备第44-45页
   ·实验方法第45-50页
     ·柿单宁提取第45页
     ·实验动物与分组第45-46页
     ·血脂、肝脂和粪脂的测定第46-47页
     ·血清天冬氨酸转氨酶、丙氨酸转氨酶、卵磷脂胆固醇酰基转移酶和3-羟基-3-甲基-戊二酰辅酶A还原酶的测定第47页
     ·肝组织和胸主动脉形态学第47-48页
     ·血清与肝脏的抗氧化能力和脂质过氧化产物丙二醛的测定第48页
     ·柿单宁体外抑制胰脂酶与胆固醇酯酶活性第48-49页
     ·柿单宁体外与胆固醇酯酶、胆固醇胶束化溶液、胆汁酸结合第49-50页
     ·统计分析第50页
 2 结果与分析第50-65页
   ·柿单宁对高胆固醇膳食大鼠体重的影响第50-51页
   ·柿单宁对高胆固醇膳食大鼠血脂、肝脂和粪脂的影响第51-54页
   ·柿单宁对高胆固醇膳食大鼠血清转氨酶、肝脏与主动脉形态学的影响第54-57页
   ·柿单宁对高胆固醇膳食大鼠血清LCAT和HMG-CoAR酶活的影响第57-58页
   ·柿单宁对高胆固醇膳食大鼠大鼠血清、肝脏抗氧化活性和脂质过氧化的影响第58-60页
   ·柿单宁对体外胰脂酶和胆固醇酯酶活性的影响第60-62页
   ·柿单宁对体外胆固醇胶束化以及结合胆固醇、胆汁酸的影响第62-65页
 3 小结第65-66页
第三章 基于AMPK途径的柿单宁调节高脂饲料诱导大鼠NAFLD脂质代谢的机制研究第66-89页
 前言第66-67页
 1 材料与方法第67-74页
   ·实验材料和仪器设备第67-69页
     ·实验材料第67页
     ·实验动物与饲料第67-68页
     ·抗体与主要试剂第68-69页
     ·主要仪器设备第69页
   ·实验方法第69-74页
     ·柿单宁提取及柿粉的制备第69页
     ·实验动物与分组第69-70页
     ·血脂、肝脂和粪脂的测定第70页
     ·AST、ALT、ALP、胰岛素、瘦素和炎症因子的测定第70页
     ·抗氧化指标的测定第70-71页
     ·肝组织形态学检测第71页
     ·蛋白免疫印迹第71-72页
     ·细胞内总RNA的提取第72页
     ·实时荧光定量PCR第72-73页
     ·统计分析第73-74页
 2 结果与分析第74-88页
   ·柿单宁和柿果对高脂膳食诱导大鼠体重、脏器重量和能量摄入的影响第74-75页
   ·柿单宁和柿果对高脂膳食诱导大鼠肝组织形态的影响第75-76页
   ·柿单宁和柿果对高脂膳食诱导大鼠血脂、肝脂的影响第76-78页
   ·柿单宁和柿果对高脂膳食诱导大鼠粪脂和胆酸的影响第78-79页
   ·柿单宁和柿果调控高脂膳食诱导大鼠肝脏脂质代谢的机制第79-83页
   ·柿单宁和柿果对大鼠炎症、抗氧化指标和NFκB的影响第83-88页
 3 小结第88-89页
第四章 柿单宁在L02细胞体系中降低肝细胞单纯性脂肪积累的机制第89-115页
 前言第89-90页
 1 材料与方法第90-95页
   ·实验材料和仪器设备第90-91页
     ·实验材料第90页
     ·主要试剂第90页
     ·主要仪器设备第90-91页
     ·主要溶液的配制第91页
   ·实验方法第91-95页
     ·细胞培养第91-92页
     ·油酸、柿单宁及其主要特征单元对L02的细胞增殖的影响第92页
     ·油酸诱导人肝细胞L02脂肪积累第92页
     ·油红O染色第92-93页
     ·细胞内甘油三酯的测定第93页
     ·细胞内总RNA的提取第93页
     ·实时荧光定量PCR第93-94页
     ·蛋白免疫印迹第94页
     ·统计分析第94-95页
 2 结果与分析第95-114页
   ·油酸诱导L02肝细胞脂肪变性模型的建立第95-97页
   ·柿单宁及其主要特征单元对L02增殖活力的影响第97-98页
   ·柿单宁及其主要特征单元对L02脂肪积累的影响第98-103页
   ·柿单宁及其主要特征单元对L02细胞脂质代谢相关基因表达的影响第103-108页
   ·柿单宁及其主要特征单元对L02细胞miR-122,miR33b及其下游基因的影响第108-114页
 3 小结第114-115页
第五章 柿单宁抑制小鼠前脂肪细胞3T3-L1成脂分化的作用机制第115-135页
 前言第115-116页
 1 材料与方法第116-121页
   ·实验材料和仪器设备第116-118页
     ·实验材料第116页
     ·主要试剂第116-117页
     ·主要仪器设备第117页
     ·主要溶液的配制第117-118页
   ·实验方法第118-121页
     ·细胞培养第118页
     ·柿单宁对前脂肪细胞3T3-L1的细胞增殖的影响第118页
     ·前脂肪细胞3T3-L1诱导分化第118页
     ·油红O染色第118页
     ·细胞内甘油三酯的测定第118-119页
     ·细胞周期的测定第119页
     ·细胞内总RNA的提取第119-120页
     ·实时荧光定量PCR第120页
     ·蛋白免疫印迹第120-121页
     ·统计分析第121页
 2 结果与分析第121-134页
   ·柿单宁对前脂肪细胞3T3-L1增殖活力的影响第121-122页
   ·柿单宁对3T3-L1细胞脂质积累的影响第122-123页
   ·柿单宁抑制3T3-L1分化主要发生在细胞分化早期第123-125页
   ·柿单宁阻碍3T3-L1分化早期阶段的细胞周期进程第125-126页
   ·柿单宁对3T3-L1分化过程中基因表达的影响第126-129页
   ·柿单宁抑制3T3-L1的分化不是通过AMPK途径第129-131页
   ·柿单宁通过miR-27及其靶点PPARγ抑制3T3-L1的分化第131-134页
 3 小结第134-135页
第六章 柿单宁特征结构单元抑制小鼠前脂肪细胞3T3-L1成脂分化的作用机制第135-153页
 前言第135页
 1 材料与方法第135-137页
   ·实验材料和仪器设备第135-137页
     ·实验材料第135页
     ·主要试剂第135-136页
     ·主要仪器设备第136-137页
     ·主要溶液的配制第137页
   ·实验方法第137页
 2 结果与分析第137-152页
   ·柿单宁主要特征单元对前脂肪细胞3T3-L1增殖活力的影响第137-138页
   ·柿单宁主要特征单元对3T3-L1细胞脂质积累的影响第138-141页
   ·柿单宁主要特征单元抑制3T3-L1分化主要发生在细胞分化早期第141-143页
   ·柿单宁主要特征单元阻碍3T3-L1分化早期阶段的细胞周期进程第143-145页
   ·柿单宁主要特征单元对3T3-L1分化过程中基因表达的影响第145-147页
   ·柿单宁主要特征单元抑制3T3-L1的分化不是通过AMPK途径第147-149页
   ·柿单宁主要特征单元通过miR-27及其靶点PPARγ抑制3T3-L1的分化第149-152页
 3 小结第152-153页
第七章 结论与展望第153-155页
参考文献第155-183页
附录第183-184页
在读期间发表论文第184-186页
致谢第186页

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