| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 缩略语表 | 第8-10页 |
| 1. 前言 | 第10-21页 |
| ·共生固氮的意义 | 第10-11页 |
| ·根瘤器官的发生 | 第11-12页 |
| ·共生信号传导途径模型 | 第12-13页 |
| ·蛋白激酶 | 第13-16页 |
| ·植物类受体激酶 | 第13-14页 |
| ·共生受体激酶 | 第14-16页 |
| ·蛋白质的泛素化修饰 | 第16-20页 |
| ·泛素及泛素化修饰的意义 | 第16-17页 |
| ·泛素化修饰的过程 | 第17-18页 |
| ·E3泛素连接酶 | 第18-19页 |
| ·E3泛素连接酶参与了共生固氮的调控过程 | 第19-20页 |
| ·研究的目的与意义 | 第20-21页 |
| 2. 材料与方法 | 第21-32页 |
| ·材料 | 第21-25页 |
| ·载体与菌株 | 第21-23页 |
| ·植物材料 | 第23页 |
| ·相关培养基及缓冲液 | 第23-25页 |
| ·实验方法 | 第25-26页 |
| ·DNA的相关操作 | 第25页 |
| ·毛根转化 | 第25-26页 |
| ·总RNA的制备 | 第26页 |
| ·Real-Time PCR | 第26-27页 |
| ·Real-Time PCR引物设计及检验 | 第26-27页 |
| ·反转录反应 | 第27页 |
| ·Real-Time PCR反应及检测 | 第27页 |
| ·酵母转化 | 第27-29页 |
| ·醋酸锂(LiAC)高效转化酵母方法一(Clontech) | 第27-28页 |
| ·LiAC法高效转化酵母方法二 | 第28-29页 |
| ·酵母的小范围Mating | 第29页 |
| ·Western Blot | 第29-30页 |
| ·烟草体内瞬时表达异源蛋白 | 第30-32页 |
| ·表达方法 | 第30页 |
| ·烟草蛋白提取 | 第30-31页 |
| ·免疫共沉淀 | 第31页 |
| ·半体外蛋白降解实验分析 | 第31-32页 |
| 3. 结果与分析 | 第32-43页 |
| ·SymRK泛素化修饰位点分析 | 第32-33页 |
| ·SymRK系列缺失及点突变克隆的构建 | 第33-34页 |
| ·SymRK蛋白的半体外降解实验分析 | 第34-38页 |
| ·被SIE3介导降解的SymRK截短片段 | 第34-36页 |
| ·不能被SIE3介导降解的SymRK片段 | 第36-38页 |
| ·SIE3通过形成二聚体行使功能 | 第38-43页 |
| ·在酵母中探究SIE3二聚体的形成 | 第38-39页 |
| ·在烟草中探究SIE3二聚体的形成 | 第39-40页 |
| ·SIE3单体介导的半体外降解实验 | 第40-41页 |
| ·SIE3单体丧失生物学功能 | 第41-43页 |
| 4. 总结与讨论 | 第43-46页 |
| ·总结 | 第43页 |
| ·讨论 | 第43-46页 |
| ·关于SIE3介导的SymRK非蛋白泛素化降解的推测 | 第43-45页 |
| ·SIE3可能以同源二聚体形式发挥功能 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-50页 |
| 附录一：本研究用的引物 | 第50-51页 |
| 附录二：10X Dropout(DO)supplements | 第51-52页 |
| 致谢 | 第52页 |
