| 中文摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 英文縮略词 | 第10-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-25页 |
| ·硫胺素与硫胺素焦磷酸依赖酶概述 | 第11-12页 |
| ·乙酰乳酸合酶概述 | 第12-20页 |
| ·乙酰乳酸合酶的晶体结构 | 第13-14页 |
| ·乙酰乳酸合酶的活性位点 | 第14-17页 |
| ·乙酰乳酸合酶的分类 | 第17-19页 |
| ·乙酰乳酸合酶功能研究 | 第19-20页 |
| ·乙酰乳酸合酶催化机理的研究 | 第20-23页 |
| ·本课题的研究意义 | 第23-25页 |
| 第二章 E. coli AHAS I基因的克隆及表达纯化 | 第25-44页 |
| ·材料与仪器 | 第25-28页 |
| ·菌株及质粒载体 | 第25页 |
| ·所需试剂 | 第25-26页 |
| ·主要仪器 | 第26-27页 |
| ·主要溶液配方 | 第27-28页 |
| ·实验方法 | 第28-36页 |
| ·重组pGEX-4T-1-ilvB质粒的构建 | 第28-32页 |
| ·重组酶AHAS I的表达纯化 | 第32-34页 |
| ·重组酶AHAS I的免疫印迹(Western blot)鉴定 | 第34-35页 |
| ·重组酶AHAS I的浓度测定 | 第35页 |
| ·重组酶AHAS I的活性检测 | 第35-36页 |
| ·重组酶AHAS I的保存 | 第36页 |
| ·实验结果及讨论 | 第36-43页 |
| ·重组pGEX4T-1-ilvB质粒的构建 | 第36-38页 |
| ·重组酶AHAS I的表达纯化 | 第38-40页 |
| ·重组酶AHAS I表达的免疫学鉴定 | 第40页 |
| ·重组酶AHAS I的浓度测定 | 第40页 |
| ·重组酶AHAS I的活性测定 | 第40-42页 |
| ·重组酶AHAS I的保存 | 第42-43页 |
| ·本章小结 | 第43-44页 |
| 第三章 E. coli AHAS I的功能研究 | 第44-67页 |
| ·材料与仪器 | 第44-46页 |
| ·主要试剂 | 第44页 |
| ·主要仪器 | 第44-45页 |
| ·主要溶液配方 | 第45-46页 |
| ·实验方法 | 第46-55页 |
| ·2,3-丁二酮及2,3-戊二酮的合成 | 第46-49页 |
| ·2,3-丁二酮与2,3-戊二酮的定量分析 | 第49-50页 |
| ·L-苯基乙酰基甲醇(L-PAC)的合成 | 第50-54页 |
| ·AHAS I酶法合成L-PAC的定量分析 | 第54-55页 |
| ·实验结果及讨论 | 第55-66页 |
| ·2,3-丁二酮及2,3-戊二酮的合成 | 第55-58页 |
| ·2,3-丁二酮和2,3-戊二酮的定量分析 | 第58-60页 |
| ·L-PAC标准品的制备 | 第60-65页 |
| ·AHAS I酶法合成L-PAC的定量分析 | 第65-66页 |
| ·本章小结 | 第66-67页 |
| 第四章 E. coli AHAS I催化机制的研究 | 第67-78页 |
| 前言 | 第67-68页 |
| ·材料与仪器 | 第68-69页 |
| ·主要试剂 | 第68页 |
| ·主要仪器 | 第68页 |
| ·主要溶液配方 | 第68-69页 |
| ·实验方法 | 第69-70页 |
| ·AHAS I催化合成L-PAC | 第69-70页 |
| ·氘标记的L-PAC的合成 | 第70页 |
| ·实验结果和讨论 | 第70-75页 |
| ·AHAS I催化合成L-PAC | 第70-71页 |
| ·氘标记L-PAC的合成 | 第71-75页 |
| ·本章小结 | 第75-78页 |
| 全文总结 | 第78-79页 |
| 参考文献 | 第79-86页 |
| 附录 | 第86-92页 |
| 致谢 | 第92页 |
