中文摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-10页 |
目录 | 第10-12页 |
英文缩略词表 | 第12-13页 |
第1章 前言 | 第13-22页 |
·糖尿病的概述 | 第13-17页 |
·糖尿病的定义及类型 | 第13-14页 |
·糖尿病的病因及发病机制 | 第14-16页 |
·糖尿病的治疗及预防策略 | 第16-17页 |
·Exendin-4 | 第17-19页 |
·Exendin-4的来源 | 第17页 |
·Exendin-4的功能及作用原理 | 第17-18页 |
·Exendin-4的研究现状 | 第18-19页 |
·BglBrick方法 | 第19-21页 |
·研究思路 | 第21-22页 |
第2章 Exendin-4/HSA载体的构建与表达 | 第22-59页 |
1 实验材料 | 第22-28页 |
·菌种及载体 | 第22页 |
·主要生化和分子生物学试剂 | 第22-23页 |
·主要培养基及缓冲液配制 | 第23-26页 |
·实验仪器 | 第26-28页 |
2 实验方法 | 第28-42页 |
·重组质粒pPICZαA-HSA的构建及鉴定 | 第28-33页 |
·重组质粒pPICZαA-E4的构建及鉴定 | 第33-34页 |
·融合蛋白表达载体的构建 | 第34-36页 |
·重组质粒转化毕赤酵母宿主菌 | 第36-42页 |
3 结果 | 第42-57页 |
·重组质粒的构建及鉴定 | 第42-45页 |
·融合蛋白表达载体的构建 | 第45-50页 |
·转化子的构建及菌落PCR鉴定 | 第50-51页 |
·长效融合蛋白的诱导表达 | 第51-53页 |
·长效融合蛋白的分离纯化及蛋白浓度测定 | 第53-57页 |
4 讨论 | 第57-59页 |
第3章 融合蛋白体外生物活性检测方法的建立 | 第59-73页 |
1 实验材料 | 第59-60页 |
·细胞株及质粒 | 第59页 |
·主要试剂 | 第59-60页 |
·主要溶液的配置 | 第60页 |
·实验仪器 | 第60页 |
2 实验方法 | 第60-66页 |
·细胞培养 | 第60-61页 |
·细胞增殖实验 | 第61-62页 |
·胰岛素含量测定实验 | 第62-63页 |
·cAMP含量检测实验 | 第63-66页 |
3 实验结果 | 第66-72页 |
·细胞增殖实验 | 第66-68页 |
·胰岛素含量检测实验 | 第68-70页 |
·cAMP含量的检测 | 第70-72页 |
4 讨论 | 第72-73页 |
第4章 融合蛋白体外生物活性的检测 | 第73-79页 |
1 实验材料 | 第73-74页 |
·细胞株 | 第73页 |
·主要试剂 | 第73页 |
·主要实验仪器 | 第73-74页 |
2 实验方法 | 第74页 |
·细胞培养 | 第74页 |
·胰岛素含量检测实验 | 第74页 |
3 实验结果 | 第74-77页 |
4 讨论 | 第77-79页 |
结论 | 第79-80页 |
参考文献 | 第80-85页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文、专利及参加的会议 | 第85-86页 |
致谢 | 第86页 |