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Exendin-4/HSA长效融合蛋白的构建表达与活性研究

中文摘要第1-6页
Abstract第6-10页
目录第10-12页
英文缩略词表第12-13页
第1章 前言第13-22页
   ·糖尿病的概述第13-17页
     ·糖尿病的定义及类型第13-14页
     ·糖尿病的病因及发病机制第14-16页
     ·糖尿病的治疗及预防策略第16-17页
   ·Exendin-4第17-19页
     ·Exendin-4的来源第17页
     ·Exendin-4的功能及作用原理第17-18页
     ·Exendin-4的研究现状第18-19页
   ·BglBrick方法第19-21页
   ·研究思路第21-22页
第2章 Exendin-4/HSA载体的构建与表达第22-59页
 1 实验材料第22-28页
   ·菌种及载体第22页
   ·主要生化和分子生物学试剂第22-23页
   ·主要培养基及缓冲液配制第23-26页
   ·实验仪器第26-28页
 2 实验方法第28-42页
     ·重组质粒pPICZαA-HSA的构建及鉴定第28-33页
   ·重组质粒pPICZαA-E4的构建及鉴定第33-34页
   ·融合蛋白表达载体的构建第34-36页
   ·重组质粒转化毕赤酵母宿主菌第36-42页
 3 结果第42-57页
   ·重组质粒的构建及鉴定第42-45页
   ·融合蛋白表达载体的构建第45-50页
   ·转化子的构建及菌落PCR鉴定第50-51页
   ·长效融合蛋白的诱导表达第51-53页
   ·长效融合蛋白的分离纯化及蛋白浓度测定第53-57页
 4 讨论第57-59页
第3章 融合蛋白体外生物活性检测方法的建立第59-73页
 1 实验材料第59-60页
   ·细胞株及质粒第59页
   ·主要试剂第59-60页
   ·主要溶液的配置第60页
   ·实验仪器第60页
 2 实验方法第60-66页
   ·细胞培养第60-61页
   ·细胞增殖实验第61-62页
   ·胰岛素含量测定实验第62-63页
   ·cAMP含量检测实验第63-66页
 3 实验结果第66-72页
   ·细胞增殖实验第66-68页
   ·胰岛素含量检测实验第68-70页
   ·cAMP含量的检测第70-72页
 4 讨论第72-73页
第4章 融合蛋白体外生物活性的检测第73-79页
 1 实验材料第73-74页
   ·细胞株第73页
   ·主要试剂第73页
   ·主要实验仪器第73-74页
 2 实验方法第74页
   ·细胞培养第74页
   ·胰岛素含量检测实验第74页
 3 实验结果第74-77页
 4 讨论第77-79页
结论第79-80页
参考文献第80-85页
攻读硕士学位期间发表的学术论文、专利及参加的会议第85-86页
致谢第86页

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