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甜菜坏死黄脉病毒侵染本生烟和大果甜菜的生物学、转录组学和蛋白质组学研究

摘要第1-5页
Abstract第5-7页
縮略词表第7-12页
第一章 文献综述第12-39页
   ·转录组学及其在病毒与植物互作研究中的应用第13-20页
     ·转录组学概述第13-14页
     ·转录组学研究技术第14-16页
     ·转录组测序在植物病毒研究中的应用第16-20页
   ·蛋白组学及其在病毒与植物互作研究中的应用第20-28页
     ·蛋白组学概述第20页
     ·蛋白组学研究技术第20-22页
     ·蛋白质组学在植物与病毒互作研究中的应用第22-28页
   ·甜菜坏死黄脉病毒的研究进展第28-38页
     ·甜菜坏死黄脉病毒概述第28-36页
     ·甜菜坏死黄脉病毒株系分类第36-38页
   ·本论文研究的目的及意义第38-39页
第二章 材料与方法第39-54页
   ·实验材料第39-40页
     ·毒源和抗血清第39页
     ·植物材料和培养条件第39页
     ·菌种和载体第39页
     ·侵染性克隆第39-40页
     ·引物设计和序列测定第40页
     ·酶和化学试剂第40页
   ·试剂配制第40-46页
     ·常用溶液和试剂第40-41页
     ·具体实验所用溶液和试剂第41-46页
   ·实验方法第46-54页
     ·高温高压蒸汽灭菌第46页
     ·λ/HindⅢ+EcoRⅠMarker的制备第46页
     ·重组克隆的构建第46-47页
     ·BNYVV接种寄主植物及检测第47-49页
     ·PEG介导法转化本生烟原生质体第49-50页
     ·农杆菌浸润法瞬时表达目的蛋白第50-51页
     ·蛋白质双向电泳实验第51-52页
     ·real-time PCR检测植物内源基因转录水平的表达差异第52-54页
第三章 甜菜坏死黄脉病毒RNA5在不同寄主植物上系统侵染能力的比较研究第54-69页
   ·RNA4和RNA5在不同寄主上系统侵染能力的比较第54-58页
     ·RNA4和RNA5在不同寄主上系统侵染能力的检测第54-56页
     ·RNA4和RNA5系统运动能力的比较第56-58页
   ·RNA4和RNA5复制能力的比较第58-62页
     ·BNYVV转染本生烟原生质体体系的建立及条件优化第58-61页
     ·RNA4和RNA5在本生烟原生质体上复制积累量的比较第61-62页
   ·RNA5的非翻译区对其在本生烟系统侵染不稳定的影响第62-66页
     ·RNA4与RNA5重组病毒在不同寄主上系统侵染能力的比较第63-65页
     ·RNA4与RNA5重组病毒在本生烟原生质体中复制积累量的比较第65-66页
   ·小结与讨论第66-69页
     ·RNA5的复制能力是系统侵染不稳定的关键原因第66-67页
     ·RNA5的复制积累量主要与其非翻译区密切相关第67-68页
     ·RNA5在不同寄主上复制积累量存在差异可能的原因第68-69页
第四章 受甜菜坏死黄脉病毒侵染的本生烟的转录组测序及分析第69-90页
   ·RNA4可加重BNYVV在本生烟上的症状第69-71页
     ·BNYVV不同组分侵染本生烟的症状差异第69页
     ·BNYVV不同组分侵染本生烟对病毒CP积累量的影响第69-71页
   ·RNA4编码的p31蛋白在细胞内的定位第71-75页
     ·p31蛋白融合RFP在植物细胞中的定位第71-73页
     ·p31蛋白融合GFP在植物细胞中的定位第73-74页
     ·p31和importinα在植物细胞核中存在互作第74-75页
   ·本生烟转录组测序第75-86页
     ·测序RNA样品的提取与检测第75-76页
     ·转录组测序的拼接与注释第76-80页
     ·转录组数据差异比较分析第80-81页
     ·病害症状相关因子的筛选第81-84页
     ·qPCR方法验证测序结果第84-86页
   ·赤霉素喷施对RNA4产生症状的影响第86-87页
   ·小结与讨论第87-90页
     ·BN4侵染改变本生烟转录组表达可能的机制第87-88页
     ·BN4对植物防御机制相关基因的影响第88页
     ·BN4加重本生烟病害症状的原因分析第88-90页
第五章 受甜菜坏死黄脉病毒侵染的大果甜菜的转录组和sRNA测序及分析第90-111页
   ·BNYVV侵染大果甜菜的症状和分子检测第90-91页
   ·大果甜菜转录组测序第91-99页
     ·转录组测序的De novo拼接与注释第91-94页
     ·大果甜菜的SSRs发掘第94-95页
     ·转录组数据的差异比较分析第95-96页
     ·qPCR方法验证测序第96-99页
   ·受BNYVV侵染的大果甜菜的sRNAs高通量测序分析第99-107页
     ·大果甜菜sRNAs高通量测序第99页
     ·样品之间不同sRNAs的群体构成第99-102页
     ·sRNA的长度分析第102-104页
     ·viRNA正负义链的极性分布和5'端核苷酸偏好性第104-106页
     ·viRNAs在病毒基因组上的分布第106-107页
   ·小结与讨论第107-111页
     ·BNYVV侵染对大果甜菜基因表达的影响第107-109页
     ·BNYVV不同基因组RNA产生sRNA的表达特征第109-111页
第六章 受甜菜坏死黄脉病毒侵染的本生烟差异蛋白质组学初步研究第111-122页
   ·BNYVV不同组分侵染本生烟后叶片蛋白质双向电泳图谱分析第111-114页
     ·本生烟叶片蛋白双向电泳条件的优化第111-112页
     ·本生烟叶片蛋白双向电泳分析第112-114页
   ·BNYVV不同组分侵染本生烟后叶片蛋白质组的差异分析第114-118页
     ·差异表达蛋白点的筛选第114-116页
     ·蛋白质点的质谱鉴定第116-118页
   ·小结与讨论第118-122页
     ·蛋白质双向电泳的条件优化第118-119页
     ·BNYVV侵染后本生烟叶片组织蛋白质组差异的结果分析第119-122页
第七章 结论与展望第122-124页
   ·结论第122页
   ·展望第122-124页
参考文献第124-141页
致谢第141-143页
个人简介第143-145页
附录Ⅰ:引物列表第145-146页
附录Ⅱ:本生烟unigenes的代谢通路注释第146-151页
附录Ⅲ:第四章qRT-PCR检测所用到的引物列表第151-154页
附录Ⅳ:大果甜菜unigenes的代谢通路注释第154-161页
附录Ⅴ:第五章qRT-PCR检测所用到的引物列表第161-162页

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