| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-19页 |
| 第一章 引言 | 第19-37页 |
| ·国内外研究现状 | 第19-35页 |
| ·真菌中小RNA的发现 | 第19-24页 |
| ·小RNA发生相关蛋白 | 第24-33页 |
| ·真菌小RNA的生成及其作用机制 | 第33-34页 |
| ·尖孢镰刀菌的研究概况及目前存在的问题 | 第34-35页 |
| ·研究目的及意义 | 第35页 |
| ·研究内容与技术路线 | 第35-37页 |
| ·研究内容 | 第35-36页 |
| ·技术路线 | 第36-37页 |
| 第二章 粘团专化型尖孢镰刀菌Dicer基因功能的研究 | 第37-69页 |
| ·前言 | 第37-38页 |
| ·方法 | 第38-53页 |
| ·寻找10种尖孢镰刀菌Dcr基因序列并进行生物信息学分析 | 第38页 |
| ·RT-PCR验证Dcr基因 | 第38-43页 |
| ·构建Dcr基因敲除盒 | 第43-47页 |
| ·原生质体制备 | 第47-48页 |
| ·原生质体转化 | 第48-49页 |
| ·PCR验证Dcr基因敲除突变体 | 第49-50页 |
| ·Southern杂交验证Dcr基因敲除突变体 | 第50-52页 |
| ·Dcr基因突变体与野生型菌株生长表型的比较 | 第52-53页 |
| ·Dcr基因突变体与野生型菌菌株对甘蓝致病力的比较 | 第53页 |
| ·结果 | 第53-66页 |
| ·11种尖孢镰刀菌Dcr基因的生物信息学分析结果 | 第53-58页 |
| ·提取总RNA检测 | 第58页 |
| ·RT-PCR检测Dcr基因结果 | 第58页 |
| ·Dcr基因敲除载体构建菌液PCR结果 | 第58-59页 |
| ·Dcr基因敲除盒酶切验证结果 | 第59页 |
| ·Dcr基因突变体与野生型菌株分生孢子、幼殖体及原生质体的制得 | 第59-60页 |
| ·潮霉素及新霉素抑菌浓度的确定 | 第60页 |
| ·原生质体的再生及转化子生长情况 | 第60-61页 |
| ·Dcr基因突变体的获得及PCR验证结果 | 第61-62页 |
| ·Dcr基因突变体Southern杂交结果 | 第62页 |
| ·Dcr基因突变体与野生型菌株的生长表型比较结果 | 第62-66页 |
| ·Dcr基因突变体与野生型菌株对甘蓝致病力的比较结果 | 第66页 |
| ·讨论 | 第66-68页 |
| ·结论 | 第68-69页 |
| 第三章 粘团专化型尖孢镰刀菌Argonaute 基因功能的研究 | 第69-85页 |
| ·前言 | 第69-70页 |
| ·方法 | 第70-72页 |
| ·寻找10种尖孢镰刀菌的Ago基因序列并进行生物信息学分析 | 第70页 |
| ·RT-PCR验证Ago基因 | 第70页 |
| ·构建Ago基因敲除盒 | 第70-71页 |
| ·原生质体制备 | 第71页 |
| ·原生质转化 | 第71页 |
| ·PCR验证Ago基因敲除突变体 | 第71页 |
| ·Southen验证Ago基因敲除突变体 | 第71-72页 |
| ·Ago基因突变体与野生型菌株生长表型的比较 | 第72页 |
| ·Ago基因突变体与野生型菌菌株对甘蓝致病力的比较 | 第72页 |
| ·结果 | 第72-84页 |
| ·11种尖孢镰刀菌Ago基因的生物信息学分析结果 | 第72-76页 |
| ·RT-PCR检测Ago基因结果 | 第76页 |
| ·Ago基因敲除载体构建菌液PCR结果 | 第76-77页 |
| ·Ago基因突变体的获得及PCR验证结果 | 第77页 |
| ·Ago基因敲除突变体Southern杂交结果 | 第77-78页 |
| ·Ago基因突变体与野生型菌株的生长表型比较结果 | 第78-83页 |
| ·Ago基因突变体与野生型菌株对甘蓝致病力的比较结果 | 第83-84页 |
| ·讨论 | 第84页 |
| ·结论 | 第84-85页 |
| 第四章 粘团专化型尖孢镰刀菌Rdrp基因功能的研究 | 第85-100页 |
| ·前言 | 第85-86页 |
| ·方法 | 第86-88页 |
| ·寻找10种尖孢镰刀菌的Rdrp基因序列并进行生物信息学分析 | 第86页 |
| ·RT-PCR验证Rdrp基因 | 第86页 |
| ·构建Rdrp基因敲除盒 | 第86-87页 |
| ·原生质体制备 | 第87页 |
| ·原生质转化 | 第87页 |
| ·PCR验证Rdrp基因敲除突变体 | 第87页 |
| ·Southen验证Rdrp基因敲除突变体 | 第87页 |
| ·Rdrp基因突变体与野生型菌株生长表型的比较 | 第87-88页 |
| ·Rdrp基因突变体与野生型菌菌株对甘蓝致病力的比较 | 第88页 |
| ·结果 | 第88-99页 |
| ·11种尖孢镰刀菌Rdrp基因的生物信息学分析结果 | 第88-92页 |
| ·RT-PCR检测Rdrp基因结果 | 第92页 |
| ·Rdrp基因敲除载体构建菌液PCR结果 | 第92-93页 |
| ·Rdrp基因突变体的获得及PCR验证结果 | 第93-94页 |
| ·Rdrp基因敲除突变体Southern杂交结果 | 第94页 |
| ·Rdrp基因突变体与野生型菌株的生长表型比较结果 | 第94-98页 |
| ·Rdrp基因突变体与野生型菌株对甘蓝致病力的比较结果 | 第98-99页 |
| ·讨论 | 第99页 |
| ·结论 | 第99-100页 |
| 第五章 结论与展望 | 第100-101页 |
| 参考文献 | 第101-112页 |
| 致谢 | 第112-113页 |
| 个人简历 | 第113-114页 |
| 发表文章 | 第114页 |