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枯草芽孢杆菌生产γ-聚谷氨酸过程中副产物积累和粗原料利用的研究

致谢第1-6页
摘要第6-7页
ABSTRACT第7-13页
第一章 绪论第13-33页
   ·引言第13页
   ·γ-PGA的生产菌、合成途径及调控网络第13-22页
     ·γ-PGA的来源第13-15页
       ·γ-DL-PGA的生产者第14页
       ·γ-D-PGA的生产者第14页
       ·γ-PGA的生产者第14-15页
     ·非核糖体的氨基酸聚合模式第15-18页
       ·γ-PGA合成的硫模板机制第16-17页
       ·γ-PGA合成的肽键连接机制第17-18页
     ·生物合成γ-PGA的多酶复合体第18-20页
       ·PgsB单位第19-20页
       ·PgsC单位第20页
       ·PgsA单位第20页
       ·PgsE单位第20页
     ·γ-PGA生物合成的调控网络第20-22页
   ·微生物发酵生产γ-PGA及产物分离纯化第22-28页
     ·培养基组分和培养条件对γ-PGA生产菌的影响第22-25页
       ·碳源对发酵的影响第22-23页
       ·氮源对发酵的影响第23-24页
       ·金属离子对发酵的影响第24页
       ·溶氧和pH值对发酵的影响第24页
       ·补料发酵工艺第24-25页
     ·改造基因工程菌生产γ-PGA第25页
     ·产品的分离纯化第25-28页
   ·γ-PGA产品的应用第28-31页
     ·在医药领域的应用第28-29页
     ·在工业领域的应用第29页
     ·在农业领域的应用第29-31页
       ·制备高吸水树脂第29-30页
       ·作为缓释材料第30-31页
       ·作为饲料添加剂第31页
   ·本论文的研究思路和主要研究内容第31-33页
第二章 实验材料与方法第33-42页
   ·菌种第33页
   ·仪器与试剂第33-35页
     ·主要仪器第33-35页
     ·主要试剂及标准第35页
     ·膜分离设备组件第35页
   ·培养基和培养方法第35-36页
     ·培养基第35-36页
       ·枯草杆菌ZJU-7培养基第35-36页
       ·枯草杆菌HB-1培养基第36页
     ·枯草杆菌培养方法第36页
   ·产物y-PGA分离纯化方法第36-37页
     ·发酵液微滤除菌第37页
     ·微滤参数测定第37页
     ·超滤浓缩、盐析和脱盐第37页
     ·喷雾干燥第37页
   ·分析测定方法第37-42页
     ·CO_2和O_2在线测定第37-38页
     ·pH值测定第38页
     ·黏度测定第38页
     ·生物量的测定第38-39页
     ·葡萄糖和谷氨酸的测定第39页
     ·木糖和还原总糖的测定第39-40页
     ·γ-PGA的测定方法第40-42页
       ·γ-PGA含量的粗测第40页
       ·γ-PGA的酸水解测定第40页
       ·γ-PGA的分子量测定第40-41页
       ·枯草杆菌代谢副产物的测定第41页
       ·料液离子强度测定第41-42页
第三章 枯草杆菌产PGA过程中副产物积累的研究第42-53页
   ·前言第42页
   ·材料与方法第42-43页
     ·菌株第42-43页
     ·培养基第43页
     ·培养方法第43页
     ·分析测定方法第43页
   ·实验结果与讨论第43-52页
     ·流加发酵过程第43-44页
     ·发酵主要副产物的测定第44-46页
     ·发酵主要副产物的影响第46-49页
       ·副产物对细胞生长的影响第46-48页
       ·副产物对合成γ-PGA的影响第48-49页
     ·不同pH值下发酵的副产物积累情况第49-52页
   ·小结第52-53页
第四章 枯草杆菌合成γ-PGA代谢网络模型和通量计算第53-65页
   ·前言第53-54页
   ·材料与方法第54页
     ·菌株第54页
     ·培养基第54页
     ·培养方法第54页
     ·分析测定方法第54页
     ·代谢模型建立和通量计算方法第54页
   ·实验结果与讨论第54-64页
     ·枯草杆菌合成γ-PGA相关中心碳代谢网络模型的构建第54-58页
     ·代谢通量计算第58页
     ·不同pH值对代谢网络的影响第58-64页
       ·实验测得的代谢流通量第59页
       ·不同pH值对代谢通量分配的影响第59-61页
       ·不同pH值下的能量代谢和细胞生物量变化第61-64页
   ·小结第64-65页
第五章 利用粗原料水解液发酵生产γ-PGA的研究第65-83页
   ·前言第65页
   ·材料与方法第65-68页
     ·菌株第65页
     ·培养基和培养方法第65-66页
       ·培养基第65-66页
       ·培养方法第66页
     ·产物鉴定第66页
     ·测定方法第66页
     ·利用木糖生产γ-PGA菌株的筛选第66页
     ·菌株的形态观察第66页
     ·菌株16S rDNA扩增和鉴定第66-67页
       ·细菌基因组DNA提第66-67页
       ·16S rDNA扩增和测序第67页
       ·序列分析比对第67页
     ·木质纤维素废料水解方法第67-68页
   ·实验结果与讨论第68-82页
     ·菌种筛选结果第68页
     ·产物鉴定结果第68-69页
     ·菌种鉴定第69-70页
       ·菌种形态特征第69页
       ·菌种16S rDNA序列分析鉴定第69-70页
     ·不同糖类碳源对枯草杆菌生长和γ-PGA产量的影响第70-71页
     ·利用木糖发酵生产γ-PGA第71-74页
       ·批次发酵实验第71-73页
       ·流加发酵实验第73-74页
     ·利用葡萄糖和模拟混合糖液批次发酵生产γ-PGA第74-77页
       ·葡萄糖为主要碳源批次发酵第74-75页
       ·模拟混合糖液为主要碳源批次发酵第75-77页
     ·利用纤维质水解液批次发酵生产γ-PGA第77-80页
       ·不同初始还原总糖浓度的影响第77-78页
       ·纤维质水解液为碳源批次发酵第78-80页
     ·不同碳源发酵生产γ-PGA的比较第80-82页
   ·小结第82-83页
第六章 γ-PGA分离纯化的中试放大研究第83-93页
   ·前言第83页
   ·材料与方法第83-84页
     ·实验材料第83-84页
       ·发酵液第83-84页
       ·膜分离装置及组件第84页
     ·微滤除菌第84页
       ·不同稀释倍数的发酵液微滤除菌第84页
       ·微滤参数测定第84页
     ·超滤浓缩、脱盐和干燥第84页
     ·分析测定方法第84页
   ·实验结果与讨论第84-92页
     ·微滤除菌中试实验研究第84-87页
       ·发酵液pH值对微滤除菌的影响第84-86页
       ·温度对微滤除菌的影响第86-87页
     ·超滤最佳浓缩倍数的确定第87-89页
     ·应用超滤法对γ-PGA沉淀脱盐第89-90页
     ·喷雾干燥进口温度的影响第90-92页
   ·小结第92-93页
第七章 结论与展望第93-96页
   ·主要结论第93-94页
   ·展望第94-96页
参考文献第96-109页
攻读博士学位期间的科研成果第109页

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