含抗除草剂标记的水稻叶绿体转化载体的构建及分子鉴定
| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 1 绪论 | 第10-22页 |
| ·叶绿体基因组简介 | 第10-13页 |
| ·叶绿体基因组的特点 | 第10-11页 |
| ·叶绿体基因的表达调控 | 第11-13页 |
| ·叶绿体基因工程的研究现状 | 第13-21页 |
| ·叶绿体转化技术的原理 | 第15-16页 |
| ·叶绿体转化的特点 | 第16页 |
| ·叶绿体转化的过程及选择标记 | 第16-18页 |
| ·叶绿体转化的方法 | 第18-19页 |
| ·单子叶植物中的叶绿体基因工程 | 第19页 |
| ·叶绿体转化技术的应用 | 第19-21页 |
| ·本课题研究的目的与意义 | 第21-22页 |
| 2 研究内容及技术路线 | 第22-23页 |
| 3 适用于水稻叶绿体转化的标记基因的筛选 | 第23-31页 |
| ·实验材料 | 第23页 |
| ·植物材料 | 第23页 |
| ·培养基 | 第23页 |
| ·试剂 | 第23页 |
| ·实验方法 | 第23-24页 |
| ·诱导水稻愈伤 | 第24页 |
| ·配制筛选培养基 | 第24页 |
| ·检测愈伤组织对3种筛选剂的敏感性 | 第24页 |
| ·结果与分析 | 第24-28页 |
| ·水稻愈伤组织对除草剂Basta的敏感情况 | 第24-26页 |
| ·水稻愈伤组织对草甘膦的敏感情况 | 第26-27页 |
| ·水稻愈伤组织对莠去津的敏感情况 | 第27-28页 |
| ·讨论 | 第28-31页 |
| ·Basta、草甘膦对水稻愈伤组织的影响 | 第28-29页 |
| ·莠去津对水稻愈伤组织的影响 | 第29-31页 |
| 4 水稻叶绿体转化载体的构建及功能检测 | 第31-52页 |
| ·实验材料 | 第31-32页 |
| ·植物材料 | 第31页 |
| ·菌株及载体 | 第31页 |
| ·工具酶和试剂盒 | 第31页 |
| ·培养基和试剂 | 第31-32页 |
| ·实验所用的引物 | 第32页 |
| ·实验方法 | 第32-42页 |
| ·大肠杆菌(DH10B)感受态的制备 | 第32-33页 |
| ·水稻叶绿体表达载体pBS的构建 | 第33-37页 |
| ·水稻叶绿体转化载体pBS的原核表达检测 | 第37-39页 |
| ·基因枪转化 | 第39-41页 |
| ·抗性愈伤的筛选及分化 | 第41页 |
| ·抗性愈伤组织的荧光表达检测 | 第41-42页 |
| ·结果与分析 | 第42-50页 |
| ·水稻叶绿体表达载体pBS的构建 | 第42-46页 |
| ·载体pBS在大肠杆菌中的表达 | 第46-48页 |
| ·基因枪法转化水稻日本晴愈伤组织 | 第48-50页 |
| ·讨论 | 第50-52页 |
| 5 γ射线对基因枪遗传转化的影响 | 第52-62页 |
| ·实验材料 | 第52-53页 |
| ·植物材料 | 第52页 |
| ·菌株及载体 | 第52页 |
| ·工具酶和试剂盒 | 第52-53页 |
| ·培养基和试剂 | 第53页 |
| ·实验方法 | 第53-55页 |
| ·载体pC1301-egfp的构建 | 第53-54页 |
| ·诱导水稻日本晴愈伤组织 | 第54页 |
| ·辐照处理 | 第54页 |
| ·基因枪转化并进行辐照处理 | 第54-55页 |
| ·结果与分析 | 第55-60页 |
| ·载体pC1301-egfp的构建 | 第55-56页 |
| ·γ射线对愈伤组织生长的影响 | 第56-58页 |
| ·γ射线对基因枪转化效率的影响 | 第58-60页 |
| ·讨论 | 第60-62页 |
| 结论与创新 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-71页 |
| 附录1 | 第71-77页 |
| 附录2 | 第77-79页 |
| 附录3 | 第79-80页 |
| 攻读学位期间主要的研究成果 | 第80-81页 |
| 致谢 | 第81-82页 |
