中文摘要 | 第1-12页 |
Abstract | 第12-15页 |
1 前言 | 第15-36页 |
·二穗短柄草研究现状 | 第15-17页 |
·二穗短柄草的形态特征 | 第15页 |
·二穗短柄草基因组研究 | 第15-16页 |
·二穗短柄草在抗病上的应用 | 第16页 |
·二穗短柄草在能源上的应用 | 第16-17页 |
·二穗短柄草优点 | 第17页 |
·二穗短柄草突变体库构建 | 第17-19页 |
·基因枪遗传转化 | 第17页 |
·化学诱变 | 第17-18页 |
·T-DNA 插入突变 | 第18页 |
·转座子插入突变 | 第18-19页 |
·Ac/Ds 转座子系统 | 第19-21页 |
·Ac/Ds 转座子系统使用情况 | 第19-20页 |
·一元转座系统 | 第19-20页 |
·二元转座系统 | 第20页 |
·Ac/Ds 转座子系统效率 | 第20页 |
·Ac/Ds 转座子转座优点 | 第20-21页 |
·诱导系统 | 第21-24页 |
·诱导系统的应用 | 第21页 |
·糖皮质激素诱导型系统 | 第21-22页 |
·乙醇诱导型系统 | 第22-23页 |
·四环素诱导系统 | 第23页 |
·四环素阻抑物的四环素诱导系统 | 第23页 |
·四环素阻抑物的四环素失活系统 | 第23页 |
·雌激素诱导系统 | 第23-24页 |
·T-DNA 边界序列的定位 | 第24-27页 |
·TAIL-PCR | 第24-25页 |
·反向 PCR | 第25-26页 |
·接头 PCR(adapter ligation-mediated PCR) | 第26-27页 |
·油菜素内酯 | 第27-33页 |
·油菜素内酯研究进展 | 第27-28页 |
·油菜素内酯的发现 | 第27-28页 |
·油菜素内酯功能研究 | 第28-33页 |
·油菜素内酯对细胞伸长、分裂及维管束发育的影响 | 第28-29页 |
·油菜素内酯对种子萌发的影响 | 第29页 |
·油菜素对植物抗逆性的影响 | 第29页 |
·油菜素内酯对植物育性影响 | 第29页 |
·油菜素内酯信号转导途径 | 第29-31页 |
·油菜素内酯合成途径 | 第31-33页 |
·油菜素内酯各种突变体 | 第33页 |
·本研究的目的和意义 | 第33-36页 |
2 材料与方法 | 第36-57页 |
·实验材料 | 第36-38页 |
·植物材料 | 第36页 |
·菌株和质粒 | 第36页 |
·各种试剂与酶 | 第36-37页 |
·引物 | 第37-38页 |
·试验方法 | 第38-40页 |
·大肠杆菌感受态的制备 | 第38页 |
·大肠杆菌的转化 | 第38页 |
·PCR 筛选菌 | 第38-39页 |
·小量碱法提取质粒 | 第39页 |
·农杆菌 EHA105 感受态的制备 | 第39-40页 |
·冻融法转化农杆菌 | 第40页 |
·载体构建 | 第40-42页 |
·PCR 扩增目的片段 | 第40-41页 |
·TA 克隆 | 第41页 |
·转化、酶切、连接到表达载体 | 第41-42页 |
·二穗短柄草遗传转化和转基因苗的鉴定 | 第42-46页 |
·二穗短柄草的遗传转化 | 第42-46页 |
·诱导愈伤 | 第42-43页 |
·二穗短柄草的侵染 | 第43-44页 |
·二穗短柄草的共培养 | 第44页 |
·二穗短柄草的筛选 | 第44页 |
·二穗短柄草分化 | 第44-45页 |
·二穗短柄草生根 | 第45-46页 |
·二穗短柄草移栽 | 第46页 |
·组培苗的鉴定 | 第46-47页 |
·荧光显微镜鉴定 GFP | 第46页 |
·PCR 鉴定转基因苗 | 第46-47页 |
·CTAB 法提取基因组 | 第46-47页 |
·PCR 检测 | 第47页 |
·T-DNA 定位 | 第47-52页 |
·接头 PCR | 第47-48页 |
·核苷酸接头合成 | 第48页 |
·酶切产物接头连接 | 第48-49页 |
·PCR 扩增未知序列 | 第49-50页 |
·反向 PCR | 第50-52页 |
·乙醇诱导系统研究 | 第52-54页 |
·乙醇诱导 | 第52页 |
·乙醇表达量分析 | 第52-54页 |
·RNA 提取 | 第52-53页 |
·荧光定量 | 第53-54页 |
·乙醇诱导系统 PCR 检测 Ds 瞬时跳跃 | 第54页 |
·地塞米松系统研究 | 第54页 |
·地塞米松诱导 | 第54页 |
·地塞米松诱导系统瞬时 Ds 跳跃 PCR 检测 | 第54页 |
·油菜素内酯缺失突变体研究 | 第54-57页 |
·基因组全长和启动子的克隆 | 第54-55页 |
·基因组全长克隆 | 第54页 |
·启动子克隆 | 第54-55页 |
·不同部位表达量分析 | 第55页 |
·GUS 染色 | 第55页 |
·BR 处理 | 第55-56页 |
·互补试验 | 第56页 |
·组织切片 | 第56-57页 |
3 结果与分析 | 第57-76页 |
·二穗短柄草的遗传转化 | 第57页 |
·载体构建 | 第57-58页 |
·二穗短柄草的转化效率 | 第58-59页 |
·3:1 分离 | 第59-61页 |
·旁邻序列分离 | 第61-62页 |
·乙醇诱导 Ac/Ds 系统和组成型 Ac/Ds 系统 AcTPase 的表达 | 第62-63页 |
·Ds 跳跃 | 第63-65页 |
·突变体收集 | 第65-66页 |
·BR 缺失突变体 | 第66-76页 |
·表型鉴定 | 第66-67页 |
·T-DNA 定位 | 第67-68页 |
·进化树分析 | 第68-69页 |
·基因组全长和启动子克隆 | 第69-70页 |
·不同表达部位分析 | 第70-71页 |
·BR 处理 | 第71-72页 |
·互补试验 | 第72-74页 |
·组织切片 | 第74-76页 |
4 讨论 | 第76-79页 |
5 结论 | 第79-80页 |
参考文献 | 第80-85页 |
致谢 | 第85页 |