| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-18页 |
| 引言 | 第18-21页 |
| 第一章 文献综述 | 第21-28页 |
| 1 生长激素（GH）的研究进展 | 第21-24页 |
| ·生长激素生理功能 | 第21-22页 |
| ·生长激素的测定 | 第22-23页 |
| ·鱼类 GH 的克隆和表达 | 第23-24页 |
| 2 类胰岛素促生长因子（IGFs）研究进展 | 第24-26页 |
| ·IGFs 的结构和生理功能 | 第25页 |
| ·IGFs 基因克隆和表达 | 第25-26页 |
| 3 未来研究展望 | 第26-28页 |
| 第二章 半滑舌鳎 GH、IGF-I 和 IGF-II 的原核表达和活性分析 | 第28-63页 |
| 第一节 半滑舌鳎 IGF-I 的原核表达及生物活性分析 | 第28-47页 |
| 1 材料与方法 | 第28-42页 |
| ·试验用鱼 | 第29页 |
| ·相关试剂的配制 | 第29-34页 |
| ·实验流程图 | 第34页 |
| ·半滑舌鳎 IGF-I 成熟肽的克隆 | 第34-38页 |
| ·重组表达载体的构建 | 第38-39页 |
| ·重组质粒在大肠杆菌中的诱导表达与检测 | 第39-41页 |
| ·重组蛋白纯化和复性 | 第41-42页 |
| 2 结果与分析 | 第42-45页 |
| ·半滑舌鳎 IGF-I 成熟肽克隆 | 第42页 |
| ·IGF-I/PET28a 重组质粒的构建 | 第42-43页 |
| ·重组质粒在大肠杆菌 BL21(DE3)中的表达 | 第43页 |
| ·IGF-I 融合蛋白的 Western-blotting 验证 | 第43-44页 |
| ·IGF-I/PET28a 融合蛋白的纯化 | 第44页 |
| ·重组蛋白的生物活性检测 | 第44-45页 |
| 3 讨论 | 第45-47页 |
| 第二节 半滑舌鳎 IGF-II 原核表达及活性分析 | 第47-55页 |
| 1 材料和方法 | 第47-49页 |
| ·实验用鱼 | 第47页 |
| ·IGF-Ⅱ成熟肽的克隆 | 第47-48页 |
| ·IGF-Ⅱ/pET28a 重组质粒的构建 | 第48页 |
| ·重组 IGF-Ⅱ/pET28a 质粒在大肠杆菌中诱导表达 | 第48页 |
| ·IGF-Ⅱ融合蛋白 western-blotting 验证 | 第48页 |
| ·IGF-Ⅱ融合蛋白纯化和复性 | 第48-49页 |
| ·IGF-Ⅱ融合蛋白生物活性检测 | 第49页 |
| 2 结果 | 第49-53页 |
| ·半滑舌鳎 IGF-Ⅱ成熟肽的克隆 | 第49-50页 |
| ·IGF-Ⅱ/PET28a 重组质粒的构建 | 第50页 |
| ·重组质粒在大肠杆菌 BL21(DE3)中的表达 | 第50-51页 |
| ·IGF-Ⅱ融合蛋白的 western-blotting 验证 | 第51-52页 |
| ·IGF-Ⅱ/PET28a 融合蛋白的纯化 | 第52页 |
| ·重组蛋白的生物活性检测 | 第52-53页 |
| 3 讨论 | 第53-55页 |
| 第三节 半滑舌鳎 GH 原核表达及活性分析 | 第55-63页 |
| 1 材料和方法 | 第55-57页 |
| ·实验用鱼 | 第55页 |
| ·GH 成熟肽的克隆 | 第55页 |
| ·构建原核表达载体 | 第55-56页 |
| ·重组 GH/pET28a 质粒在大肠杆菌中诱导表达 | 第56页 |
| ·GH 融合蛋白 western-blotting 验证 | 第56-57页 |
| ·GH 融合蛋白纯化和复性 | 第57页 |
| ·GH 融合蛋白的 ELISA 测定 | 第57页 |
| ·GH 融合蛋白的生物活性检测 | 第57页 |
| ·数据处理 | 第57页 |
| 2 结果 | 第57-60页 |
| ·半滑舌鳎 GH 成熟肽的克隆 | 第57页 |
| ·GH/PET28a 重组质粒的构建 | 第57-58页 |
| ·重组质粒在大肠杆菌 BL21(DE3)中的表达 | 第58-59页 |
| ·IGF-Ⅱ融合蛋白的 western-blotting 验证 | 第59-60页 |
| ·GH 融合蛋白的 ELISA 测定 | 第60页 |
| ·GH 融合蛋白的生物活性检测 | 第60页 |
| 3 讨论 | 第60-63页 |
| 第三章 重组 GH 和 IGF-I 对半滑舌鳎幼鱼生长的影响及机制研究 | 第63-77页 |
| 1 材料与方法 | 第64-66页 |
| ·实验鱼来源与规格 | 第64页 |
| ·重组牛 GH 和重组半滑舌鳎 IGF-I 来源 | 第64页 |
| ·实验设计 | 第64-65页 |
| ·生长分析 | 第65页 |
| ·饵料转化效率分析 | 第65页 |
| ·血清激素水平测定 | 第65-66页 |
| ·肠道消化酶表达水平测定 | 第66页 |
| ·数据统计分析 | 第66页 |
| 2 结果 | 第66-74页 |
| ·重组牛 GH 对半滑舌鳎生长的影响 | 第66-69页 |
| ·重组半滑舌鳎 IGF-I 对半滑舌鳎生长的影响 | 第69-70页 |
| ·血清 GH 和 IGF-I 的表达水平变化 | 第70-72页 |
| ·肠道消化酶水平变化 | 第72-74页 |
| 3 讨论 | 第74-77页 |
| 第四章 半滑舌鳎 GH 与 IGF-I 对卵巢发育的调控作用及机制研究 | 第77-85页 |
| 1 实验材料和方法 | 第78-80页 |
| ·实验鱼 | 第78页 |
| ·取样方法及样品处理 | 第78页 |
| ·性腺分期鉴定 | 第78页 |
| ·总 RNA 提取和 cDNA 的合成 | 第78页 |
| ·实时定量 PCR 检测 | 第78-80页 |
| ·血清中 GH 和 IGF-I 的测定 | 第80页 |
| ·数据处理 | 第80页 |
| 2 结果与分析 | 第80-83页 |
| ·卵巢发育分期 | 第80页 |
| ·垂体 GH mRNA 在卵巢不同发育阶段的表达特性 | 第80-81页 |
| ·脑、垂体、肝脏和性腺 IGF-I mRNA 在卵巢不同发育阶段的表达特性 | 第81-82页 |
| ·血清中 GH 和 IGF-I 浓度 | 第82-83页 |
| 3 讨论 | 第83-85页 |
| 结论 | 第85-86页 |
| 参考文献 | 第86-97页 |
| 致谢 | 第97页 |
