| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-8页 |
| 缩写表 | 第8-9页 |
| 第1章 绪论 | 第9-19页 |
| ·本研究课题的学术背景及其理论与实际意义 | 第9-10页 |
| ·基因工程抗体研究进展概述 | 第10-16页 |
| ·人源化改造抗体 | 第11-14页 |
| ·噬菌体展示技术构建抗体库 | 第14-15页 |
| ·核糖体展示技术构建抗体库 | 第15-16页 |
| ·基因工程抗体概述总结 | 第16页 |
| ·本研究课题的意义及主要研究内容 | 第16页 |
| ·技术路线 | 第16-17页 |
| ·技术路线图 | 第17-19页 |
| 第2章 蛋白纯化方法的建立及优化 | 第19-39页 |
| ·实验材料 | 第19-22页 |
| ·样本 | 第19页 |
| ·主要材料 | 第19-20页 |
| ·试剂配制 | 第20-21页 |
| ·主要仪器 | 第21-22页 |
| ·实验方法 | 第22-31页 |
| ·PTWIN1-P24 重组质粒的扩增 | 第22-23页 |
| ·PTWIN1-P24 重组质粒的表达 | 第23-25页 |
| ·P24 抗原纯化及鉴定 | 第25-26页 |
| ·EV71/VP1 基因的扩增和克隆 | 第26-29页 |
| ·PTWIN1-VP1 重组质粒的构建 | 第29页 |
| ·PTWIN1-VP1 重组质粒鉴定 | 第29-30页 |
| ·PTWIN1-VP1 重组质粒的表达、纯化及抗原性鉴定 | 第30-31页 |
| ·实验结果及分析 | 第31-37页 |
| ·HIV-1/P24 抗原表达结果 | 第31-32页 |
| ·P24 抗原性质鉴定 | 第32-33页 |
| ·EV71/VP1 抗原表达结果 | 第33-37页 |
| ·本章小结 | 第37-39页 |
| 第3章 特异性抗体分泌细胞筛选方法的建立和优化 | 第39-57页 |
| ·实验材料 | 第40-41页 |
| ·样本 | 第40页 |
| ·主要材料 | 第40-41页 |
| ·试剂配制 | 第41页 |
| ·主要仪器 | 第41页 |
| ·实验方法 | 第41-48页 |
| ·PBMC 的分离 | 第41-42页 |
| ·ELISA 法检测抗体效价 | 第42页 |
| ·间接免疫荧光法检测抗体效价 | 第42-43页 |
| ·细胞永生化 | 第43-44页 |
| ·树脂柱偶联 HIV-1/P24 抗原进行细胞筛选 | 第44-46页 |
| ·纳米磁珠偶联 HIV-1/P24 抗原进行细胞筛选 | 第46-47页 |
| ·树脂柱偶联 EV71/VP1 抗原进行细胞筛选 | 第47页 |
| ·纳米磁珠偶联 VP1 抗原进行细胞筛选 | 第47页 |
| ·人源化单克隆抗体基因扩增 | 第47-48页 |
| ·人源化单克隆抗体效价检测 | 第48页 |
| ·实验结果及分析 | 第48-56页 |
| ·PBMC 分离结果 | 第48页 |
| ·抗体效价检测结果 | 第48-51页 |
| ·细胞永生化结果 | 第51-53页 |
| ·P24 抗体分泌细胞筛选结果 | 第53-54页 |
| ·VP1 抗体分泌细胞筛选结果 | 第54-55页 |
| ·人源化单克隆抗体基因扩增结果 | 第55-56页 |
| ·本章小结 | 第56-57页 |
| 结论 | 第57-59页 |
| 参考文献 | 第59-63页 |
| 附录 A 原核表达载体 PTWIN1 MAP | 第63-65页 |
| 攻读硕士学位期间取得成果 | 第65-67页 |
| 致谢 | 第67页 |
