摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
目录 | 第6-10页 |
第1章 绪论 | 第10-16页 |
·研究背景 | 第10-11页 |
·C 型凝集素超家族 | 第10页 |
·DC-SIGN 家族与 LSECtin | 第10-11页 |
·国内外研究进展 | 第11-14页 |
·LSECtin 膜相互作用蛋白的发现 | 第11页 |
·表达克隆筛选相互作用蛋白的应用 | 第11-14页 |
·本研究的目的与意义 | 第14-16页 |
第2章 表达克隆筛选 LSECtin 相互作用蛋白体系建立 | 第16-24页 |
·实验材料 | 第16页 |
·试剂 | 第16页 |
·质粒 | 第16页 |
·细胞 | 第16页 |
·实验方法 | 第16-18页 |
·抗体纯化 | 第16页 |
·细胞培养 | 第16-17页 |
·质粒制备 | 第17页 |
·细胞预处理 | 第17页 |
·磷酸钙转染 | 第17页 |
·LSECtin 蛋白粘附 | 第17-18页 |
·Hirt 法提取细胞中质粒 | 第18页 |
·实验结果 | 第18-22页 |
·转染体系建立 | 第19-20页 |
·LSECtin 流式抗体的纯化与鉴定 | 第20-21页 |
·粘附筛选体系建立 | 第21-22页 |
·讨论 | 第22-23页 |
·本章小结 | 第23-24页 |
第3章 表达克隆筛选 LSECtin 相互作用蛋白 | 第24-34页 |
·实验材料 | 第24页 |
·试剂、文库 | 第24页 |
·实验方法 | 第24-27页 |
·文库扩增 | 第24页 |
·细胞培养 | 第24页 |
·细胞预处理 | 第24页 |
·磷酸钙转染 | 第24-25页 |
·LSECtin 蛋白粘附 | 第25页 |
·Hirt 法提取细胞中质粒 | 第25-26页 |
·电转化阳性文库 | 第26页 |
·阳性文库扩增 | 第26-27页 |
·实验结果 | 第27-31页 |
·1#文库筛选结果 | 第27-28页 |
·2#文库筛选结果 | 第28-30页 |
·3#文库筛选结果 | 第30-31页 |
·讨论 | 第31-32页 |
·本章小结 | 第32-34页 |
第4章 LSECtin 与候选蛋白相互作用验证 | 第34-44页 |
·实验材料 | 第34页 |
·质粒、菌株及细胞 | 第34页 |
·培养基 | 第34页 |
·试剂 | 第34页 |
·实验方法 | 第34-40页 |
·候选蛋白表达载体构建 | 第34-38页 |
·CO-IP 验证相互作用 | 第38-39页 |
·Western Blot 检测 | 第39-40页 |
·实验结果 | 第40-42页 |
·目的片段的扩增 | 第41页 |
·目的片段双酶切鉴定结果 | 第41-42页 |
·讨论 | 第42页 |
·本章小结 | 第42-44页 |
结论 | 第44-46页 |
参考文献 | 第46-50页 |
附录 | 第50-58页 |
攻读硕士学位期间所发表的学术论文 | 第58-60页 |
致谢 | 第60页 |