| 摘要 | 第1-12页 |
| Abstract | 第12-14页 |
| 缩略语录 | 第14-16页 |
| 1 前言 | 第16-25页 |
| ·研究背景 | 第16-17页 |
| ·药物遗传毒性分子机理研究进展 | 第17-22页 |
| ·喹噁啉类药物遗传毒性研究进展 | 第17-18页 |
| ·拓扑异构酶抑制机理研究进展 | 第18-19页 |
| ·自由基与氧化性DNA损伤研究进展 | 第19-20页 |
| ·小分子化合物与DNA结合作用研究进展 | 第20-21页 |
| ·DNA损伤修复酶 | 第21-22页 |
| ·目的与意义 | 第22-25页 |
| ·研究思路 | 第22-23页 |
| ·研究内容 | 第23-24页 |
| ·研究目的与意义 | 第24-25页 |
| 2 材料与方法 | 第25-46页 |
| ·细胞系 | 第25页 |
| ·药品和试剂 | 第25-27页 |
| ·主要仪器和设备 | 第27-28页 |
| ·溶液配制 | 第28-31页 |
| ·细胞的复苏、传代与冻存 | 第31页 |
| ·MTT法检测喹噁啉类药物对HepG2细胞和V79细胞活力的影响 | 第31-32页 |
| ·单细胞凝胶电泳(彗星实验)检测各种喹噁啉药物致细胞DNA断裂效应 | 第32-33页 |
| ·喹烯酮与核酸结合检测 | 第33页 |
| ·紫外吸收光谱法检测喹烯酮和脱二氧喹烯酮与小牛胸腺DNA结合作用 | 第33页 |
| ·HPLC法检测喹烯酮和脱二氧喹烯酮与单核苷酸加合作用 | 第33页 |
| ·喹烯酮作用下自由基检测 | 第33-37页 |
| ·荧光探针测定细胞内ROS | 第33-34页 |
| ·NBT还原法检测喹烯酮代谢产生超氧阴离子自由基 | 第34页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳检测喹烯酮对DNA影响 | 第34-35页 |
| ·荧光探针检测喹烯酮处理后胞内超氧阴离子自由基 | 第35页 |
| ·ELISA检测试剂盒检测8-OHdG | 第35-36页 |
| ·喹烯酮代谢物的检测 | 第36-37页 |
| ·拓扑异构酶活性检测 | 第37-38页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳检测喹烯酮作用下拓扑异构酶Ⅱ活性 | 第37页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳检测喹烯酮作用下HepG2细胞拓扑异构酶活性 | 第37-38页 |
| ·TARDIS技术检测DNA-TopoⅡ复合物 | 第38页 |
| ·线粒体DNA突变检测 | 第38-41页 |
| ·高盐沉淀法提取线粒体DNA | 第39页 |
| ·线粒体DNA基因引物设计 | 第39-41页 |
| ·PCR扩增反应 | 第41页 |
| ·测序 | 第41页 |
| ·实时荧光定量PCR检测相关基因的mRNA的表达 | 第41-46页 |
| ·总RNA的提取 | 第41-42页 |
| ·总RNA纯度及完整性的检测 | 第42页 |
| ·逆转录反应 | 第42-43页 |
| ·实时荧光定量PCR检测目的基因mRNA表达水平 | 第43-45页 |
| ·统计学分析 | 第45-46页 |
| 3 结果 | 第46-71页 |
| ·HepG2细胞和V79细胞培养 | 第46页 |
| ·喹噁啉类药物对真核细胞活力影响 | 第46-49页 |
| ·对HepG2细胞细胞活力影响 | 第46-48页 |
| ·对V79细胞细胞活力影响 | 第48-49页 |
| ·喹噁啉类药物对真核细胞DNA断裂的影响 | 第49-54页 |
| ·喹烯酮与DNA结合的研究 | 第54-57页 |
| ·喹烯酮与小牛胸腺DNA结合作用 | 第54-55页 |
| ·喹烯酮与单核苷酸结合作用的研究 | 第55-57页 |
| ·喹烯酮代谢产生自由基 | 第57-63页 |
| ·喹烯酮作用HepG2细胞后胞内自由基释放的时效量效关系 | 第57页 |
| ·喹烯酮在代谢酶作用下代谢产生超氧阴离子自由基 | 第57-58页 |
| ·喹烯酮代谢对DNA的损伤 | 第58-60页 |
| ·喹烯酮引起HepG2细胞产生超氧阴离子自由基 | 第60页 |
| ·喹烯酮和脱二氧喹烯酮对HepG2细胞超氧阴离子自由基的影响 | 第60-61页 |
| ·自由基清除剂对喹烯酮诱导HepG2细胞超氧阴离子自由基的影响 | 第61页 |
| ·喹烯酮诱导HepG2细胞产生8-OHdG | 第61-62页 |
| ·喹稀酮作用HepG2细胞代谢物鉴定结果 | 第62-63页 |
| ·喹烯酮对拓扑异构酶Ⅱ的活性影响 | 第63-66页 |
| ·喹烯酮抑制拓扑异构Ⅱ活性 | 第63-64页 |
| ·喹烯酮抑制HepG2细胞拓扑异构酶活性 | 第64-65页 |
| ·喹烯酮诱导HepG2细胞产生稳定的DNA-TopoⅡ复合物 | 第65-66页 |
| ·喹烯酮诱导HepG2细胞线粒体DNA突变 | 第66-68页 |
| ·线粒体DNA提取物鉴定 | 第66-67页 |
| ·喹烯酮诱导线粒体DNA突变 | 第67-68页 |
| ·喹烯酮对HepG2细胞基因表达的影响 | 第68-71页 |
| ·RNA质量的鉴定 | 第68-69页 |
| ·喹烯酮对HepG2细胞基因表达的影响 | 第69-71页 |
| 4 讨论 | 第71-86页 |
| ·细胞、药物以及毒性指标的选择 | 第71-74页 |
| ·毒性判断指标以及指标研究方法的选择 | 第71-72页 |
| ·细胞、药物、作用时间和剂量的选择 | 第72-74页 |
| ·喹烯酮氧化性DNA损伤的机理 | 第74-80页 |
| ·喹烯酮诱导ROS产生的种类与来源 | 第74-76页 |
| ·ROS与DNA损伤关系 | 第76-77页 |
| ·ROS与线粒体DNA损伤 | 第77-79页 |
| ·ROS介导的DNA损伤修复酶抑制与DNA断裂损伤的关系 | 第79-80页 |
| ·拓扑异构酶Ⅱ活性抑制与DNA断裂损伤关系 | 第80-83页 |
| ·DNA加合物与DNA损伤关系 | 第83-86页 |
| 5 全文总结 | 第86-87页 |
| 6 文献综述 | 第87-102页 |
| 参考文献 | 第102-120页 |
| 致谢 | 第120-121页 |
| 附录 | 第121-135页 |
