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猪CYP3A29羟化代谢T-2毒素的分子机制研究

目录第1-8页
摘要第8-11页
Abstract第11-14页
缩略语表第14-16页
1 前言第16-25页
   ·立题依据第16-17页
   ·国内外研究现状与发展趋势第17-23页
     ·T-2毒素及其代谢第17-19页
     ·CYP3A29的分布,表达及代谢特点第19-20页
     ·CYP3A29的结构及其结构功能关系的研究第20-23页
   ·科学假设第23-24页
   ·研究的意义第24-25页
2 材料与方法第25-41页
   ·材料第25-28页
     ·药品和试剂第25-26页
     ·仪器和设备第26-27页
     ·溶液配制第27-28页
   ·基本操作第28-31页
     ·感受态大肠杆菌DH5α的制备第28-29页
     ·大肠杆菌DH1OBac感受态的制备第29页
     ·Sf9昆虫细胞的复苏第29页
     ·Sf9昆虫细胞的传代第29页
     ·细胞冻存第29-30页
     ·SDS-PAGE分析第30-31页
     ·Western blot分析第31页
   ·CYP3A29代谢T-2毒素的关键氨基酸残基的的确定第31-33页
     ·CYP3A29一级结构分析第31-32页
     ·CYP3A29二级结构分析第32页
     ·CYP3A29同源建模第32页
     ·CYP3A29模型与T-2的对接第32-33页
   ·突变体构建及表达第33-38页
     ·突变体构建第33-36页
     ·CYP3A29基因转染第36-38页
     ·重组蛋白SDS-PAGE及Western blot分析第38页
   ·硝苯地平HPLC方法学考察第38-39页
   ·CYP3A29及其突变体活性第39页
   ·液质联用测重组蛋白代谢T-2毒素第39-40页
   ·等温滴定量热测重组蛋白代谢T-2毒素第40页
   ·数据处理第40-41页
     ·液相数据的处理第40页
     ·液相质谱数据的处理第40页
     ·等温滴定数据的处理第40-41页
3. 结果第41-57页
   ·CYP3A29代谢T-2的关键氨基酸的确定第41-48页
     ·CYP3A29的一级结构特点第41-42页
     ·二级结构特点分析第42-44页
     ·CYP3A29模型第44-47页
     ·T-2毒素对接CYP3A29模型第47-48页
   ·突变体功能分析第48-51页
     ·突变体构建及表达鉴定第48-51页
   ·突变体活性分析第51-57页
     ·HPLC方法学第51-52页
     ·突变体的代谢活性研究第52-53页
     ·液质对CYP3A29代谢T-2的研究第53-55页
     ·等温滴定量热仪对CYP3A29代谢T-2的研究第55-57页
4 讨论第57-64页
   ·CYP3A29生物信息学分析第57-59页
   ·CYP3A29的表达第59-60页
   ·CYP3A29结构功能特点第60-62页
   ·T-2毒素的代谢第62-64页
5 结论第64-65页
6 P450酶在药物代谢中的结构和功能研究(文献综述)第65-76页
   ·P450酶在药物代谢中的作用第65-67页
   ·P450酶的结构和功能的研究第67-74页
     ·P450酶的一级结构的研究第67-68页
     ·P450酶的高级结构的研究第68-74页
   ·小结第74-76页
参考文献第76-87页
致谢第87-88页
作者简介第88-89页
附录第89-93页

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