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基于光节律诱导的家蚕孵化节律及分子机制研究

中文摘要第1-6页
Abstract第6-12页
第一章 文献综述第12-33页
 1 孵化节律与相关基因第13-21页
   ·孵化节律第13-15页
   ·孵化调节相关基因第15-21页
 2 生物钟第21-23页
   ·生物钟的定义第21页
   ·昼夜节律第21-23页
 3 昼夜节律基因第23-26页
   ·隐化色素基因第23页
   ·周期蛋白基因第23-24页
   ·永恒蛋白基因和逾时蛋白基因第24页
   ·时钟蛋白基因第24页
   ·周期循环蛋白基因第24页
   ·旋转蛋白基因第24-25页
   ·双时蛋白基因第25页
   ·家蚕生物钟基因第25-26页
 4 授时因子对生物钟重置第26-28页
   ·光照授时因子对昼夜节律生物钟重置第26-27页
   ·温度授时因子对昼夜节律生物钟重置第27页
   ·饮食授时因子对生物钟重置第27-28页
   ·磁场授时因子对生物钟重置第28页
 5 昼夜节律生物钟分子调控信号机制第28-33页
   ·哺乳动物的昼夜节律生物钟环路第29页
   ·昆虫的生物钟环路第29-33页
第二章 研究目的与内容第33-35页
 1 研究目的与意义第33页
 2 研究内容第33-34页
 3 研究技术路线第34-35页
第三章 基本实验材料与方法第35-48页
 1 实验动物第35页
 2 主要仪器设备第35-36页
 3 主要试剂第36-40页
   ·主要生化试剂第36-37页
   ·主要试剂盒第37页
   ·Marker第37页
   ·缓冲液和常用溶液的配制第37-40页
 4 常用实验方法第40-48页
   ·总 RNA 的抽提第40-41页
   ·基因组 DNA 消化第41-42页
   ·RNA 反转录第42页
   ·PCR 扩增反应程序及加样体系第42-43页
   ·DNA 琼脂糖凝胶电泳第43页
   ·实时定量 PCR(Real-time PCR)第43-44页
   ·Western-Blot 操作流程第44-46页
     ·蛋白质的提取方法第44页
     ·蛋白浓度测定第44页
     ·SDS-PAGE 电泳第44-45页
     ·转膜及免疫反应第45-46页
     ·化学发光,显影,定影第46页
   ·几丁质酶活性测定方法第46页
   ·孵化样酶酶活性的测定方法第46-48页
第四章 光诱导的孵化节律与孵化相关基因表达及酶活性变化第48-58页
 1 材料与方法第49-50页
   ·供试蚕卵及处理第49页
   ·总 RNA 的提取第49页
   ·基因表达谱的分析第49-50页
   ·酶活性的测定第50页
 2 结果与分析第50-56页
   ·光制对家蚕卵孵化节律的影响第50-52页
   ·家蚕卵孵化节律变化与孵化相关基因表达的关系第52-55页
   ·家蚕卵孵化过程几丁质酶和孵化样酶的活性变化第55-56页
 3 讨论第56-58页
第五章 光诱导的家蚕卵孵化节律出现过程中昼夜节律授时信号输入途径核心钟基因的表达第58-69页
 1 材料与方法第58-60页
   ·供试蚕卵及处理第58-59页
   ·蚕卵样品总 RNA 的提取第59页
   ·基因表达谱的分析第59-60页
   ·生物钟蛋白谱调查第60页
   ·数据处理方法第60页
 2 结果与分析第60-67页
   ·光制对家蚕卵孵化过程中 Cry1 基因表达的影响第60-61页
   ·光制对家蚕卵孵化过程中 Cry2 基因表达的影响第61-63页
   ·光制对家蚕卵孵化过程中 Per 基因表达的影响第63页
   ·光制对家蚕卵孵化过程中 Tim 基因表达的影响第63-65页
   ·家蚕卵孵化过程 CRY、TIM 和 PER 蛋白的表达第65-67页
 3 讨论第67-69页
   ·昼夜节律生物钟基因的表达与家蚕卵孵化节律具有高度一致性第67页
   ·光周期是家蚕胚胎发育后期昼夜节律的有效授时因子第67-68页
   ·昼夜节律生物钟基因和蛋白的表达量低且具有高灵敏性第68-69页
第六章 综合结论与讨论第69-72页
 1 家蚕孵化节律是典型的昼夜节律第69页
 2 家蚕孵化相关酶活性及其基因表达受昼夜节律影响第69-70页
 3 光周期是家蚕胚胎发育后期昼夜节律的有效授时因子第70-72页
参考文献第72-85页
研究生期间发表文章及成果第85-86页
资助项目第86-87页
附录 文中所用缩略词第87-89页
致谢第89-90页

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