中文摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-33页 |
1 孵化节律与相关基因 | 第13-21页 |
·孵化节律 | 第13-15页 |
·孵化调节相关基因 | 第15-21页 |
2 生物钟 | 第21-23页 |
·生物钟的定义 | 第21页 |
·昼夜节律 | 第21-23页 |
3 昼夜节律基因 | 第23-26页 |
·隐化色素基因 | 第23页 |
·周期蛋白基因 | 第23-24页 |
·永恒蛋白基因和逾时蛋白基因 | 第24页 |
·时钟蛋白基因 | 第24页 |
·周期循环蛋白基因 | 第24页 |
·旋转蛋白基因 | 第24-25页 |
·双时蛋白基因 | 第25页 |
·家蚕生物钟基因 | 第25-26页 |
4 授时因子对生物钟重置 | 第26-28页 |
·光照授时因子对昼夜节律生物钟重置 | 第26-27页 |
·温度授时因子对昼夜节律生物钟重置 | 第27页 |
·饮食授时因子对生物钟重置 | 第27-28页 |
·磁场授时因子对生物钟重置 | 第28页 |
5 昼夜节律生物钟分子调控信号机制 | 第28-33页 |
·哺乳动物的昼夜节律生物钟环路 | 第29页 |
·昆虫的生物钟环路 | 第29-33页 |
第二章 研究目的与内容 | 第33-35页 |
1 研究目的与意义 | 第33页 |
2 研究内容 | 第33-34页 |
3 研究技术路线 | 第34-35页 |
第三章 基本实验材料与方法 | 第35-48页 |
1 实验动物 | 第35页 |
2 主要仪器设备 | 第35-36页 |
3 主要试剂 | 第36-40页 |
·主要生化试剂 | 第36-37页 |
·主要试剂盒 | 第37页 |
·Marker | 第37页 |
·缓冲液和常用溶液的配制 | 第37-40页 |
4 常用实验方法 | 第40-48页 |
·总 RNA 的抽提 | 第40-41页 |
·基因组 DNA 消化 | 第41-42页 |
·RNA 反转录 | 第42页 |
·PCR 扩增反应程序及加样体系 | 第42-43页 |
·DNA 琼脂糖凝胶电泳 | 第43页 |
·实时定量 PCR(Real-time PCR) | 第43-44页 |
·Western-Blot 操作流程 | 第44-46页 |
·蛋白质的提取方法 | 第44页 |
·蛋白浓度测定 | 第44页 |
·SDS-PAGE 电泳 | 第44-45页 |
·转膜及免疫反应 | 第45-46页 |
·化学发光,显影,定影 | 第46页 |
·几丁质酶活性测定方法 | 第46页 |
·孵化样酶酶活性的测定方法 | 第46-48页 |
第四章 光诱导的孵化节律与孵化相关基因表达及酶活性变化 | 第48-58页 |
1 材料与方法 | 第49-50页 |
·供试蚕卵及处理 | 第49页 |
·总 RNA 的提取 | 第49页 |
·基因表达谱的分析 | 第49-50页 |
·酶活性的测定 | 第50页 |
2 结果与分析 | 第50-56页 |
·光制对家蚕卵孵化节律的影响 | 第50-52页 |
·家蚕卵孵化节律变化与孵化相关基因表达的关系 | 第52-55页 |
·家蚕卵孵化过程几丁质酶和孵化样酶的活性变化 | 第55-56页 |
3 讨论 | 第56-58页 |
第五章 光诱导的家蚕卵孵化节律出现过程中昼夜节律授时信号输入途径核心钟基因的表达 | 第58-69页 |
1 材料与方法 | 第58-60页 |
·供试蚕卵及处理 | 第58-59页 |
·蚕卵样品总 RNA 的提取 | 第59页 |
·基因表达谱的分析 | 第59-60页 |
·生物钟蛋白谱调查 | 第60页 |
·数据处理方法 | 第60页 |
2 结果与分析 | 第60-67页 |
·光制对家蚕卵孵化过程中 Cry1 基因表达的影响 | 第60-61页 |
·光制对家蚕卵孵化过程中 Cry2 基因表达的影响 | 第61-63页 |
·光制对家蚕卵孵化过程中 Per 基因表达的影响 | 第63页 |
·光制对家蚕卵孵化过程中 Tim 基因表达的影响 | 第63-65页 |
·家蚕卵孵化过程 CRY、TIM 和 PER 蛋白的表达 | 第65-67页 |
3 讨论 | 第67-69页 |
·昼夜节律生物钟基因的表达与家蚕卵孵化节律具有高度一致性 | 第67页 |
·光周期是家蚕胚胎发育后期昼夜节律的有效授时因子 | 第67-68页 |
·昼夜节律生物钟基因和蛋白的表达量低且具有高灵敏性 | 第68-69页 |
第六章 综合结论与讨论 | 第69-72页 |
1 家蚕孵化节律是典型的昼夜节律 | 第69页 |
2 家蚕孵化相关酶活性及其基因表达受昼夜节律影响 | 第69-70页 |
3 光周期是家蚕胚胎发育后期昼夜节律的有效授时因子 | 第70-72页 |
参考文献 | 第72-85页 |
研究生期间发表文章及成果 | 第85-86页 |
资助项目 | 第86-87页 |
附录 文中所用缩略词 | 第87-89页 |
致谢 | 第89-90页 |