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拟南芥AtMYB44和LWT1基因在水稻中的遗传转化及功能验证

摘要第1-4页
Abstract第4-5页
目录第5-8页
1 文献综述第8-18页
   ·水稻遗传转化研究进展第8-14页
     ·水稻的转化方法研究进展第8-12页
       ·农杆菌介导转化法第8-9页
       ·基因枪转化法第9-10页
       ·PEG 介导转化法第10页
       ·电激介导转化法第10-11页
       ·花粉管通道介导转化法第11页
       ·其他方法第11-12页
     ·转基因水稻研究进展第12-14页
       ·抗虫转基因水稻培育第12-13页
       ·抗病转基因水稻培育第13页
       ·抗除草剂转基因水稻培育第13页
       ·抗逆转基因水稻培育第13-14页
   ·植物抗逆性研究进展第14-18页
     ·逆境和植物抗性第14-15页
       ·逆境第14页
       ·植物抗性第14-15页
     ·植物抗旱、耐盐机理研究第15-18页
       ·植物抗旱机理第15-16页
         ·渗透调节第15页
         ·抗氧化系统调节第15-16页
         ·气孔及激素调节第16页
       ·植物耐盐机理第16-18页
         ·离子区域化调节第16-17页
         ·保护酶系统调节第17页
         ·渗透调节第17-18页
2 引言第18-19页
3 材料与方法第19-33页
   ·实验材料第19-21页
     ·植物材料第19页
     ·菌种和质粒第19页
     ·主要实验试剂与仪器第19-20页
       ·主要实验试剂第19-20页
       ·主要实验仪器第20页
     ·主要溶液配制第20-21页
   ·实验方法第21-33页
     ·将目的基因导入农杆菌 AGL1第21-23页
       ·目的基因的连接第21页
       ·大肠杆菌细胞的热激法转化第21-22页
       ·菌液 PCR 检测第22页
       ·农杆菌感受态细胞制备第22-23页
       ·农杆菌细胞的冻融法转化与检测第23页
     ·农杆菌介导的水稻遗传转化第23-25页
       ·水稻愈伤组织诱导第23页
       ·农杆菌菌液的准备第23-25页
       ·愈伤组织与根癌农杆菌的共培养第25页
       ·洗除农杆菌第25页
       ·抗性愈伤组织筛选第25页
       ·分化和壮苗第25页
     ·叶片基因组 DNA(CTAB 法)和 RNA 的提取(Trizol 法):第25-27页
     ·阳性转化植株的 PCR 检测第27页
     ·RT-PCR 和 QRT-PCR第27-29页
       ·RT-PCR第27-28页
       ·QRT-PCR第28-29页
     ·转基因植株 T0代拷贝数的测定第29页
     ·MYB44 转基因植株的表达与功能验证第29-31页
       ·转基因水稻植株的过量表达及诱导表达第29-30页
       ·转基因植株对干旱胁迫的响应第30页
       ·转基因植株离体叶片失水率的测定第30-31页
       ·转基因植株对甘露醇胁迫及盐胁迫的响应第31页
     ·LWT1 转基因植株的表达与功能验证第31-33页
       ·转基因水稻植株的过量表达及诱导表达第31-32页
       ·转基因植株对干旱胁迫的响应第32页
       ·转基因植株离体叶片失水率的测定第32页
       ·转基因植株对甘露醇胁迫下的响应第32-33页
4 结果与分析第33-50页
   ·水稻表达载体连接产物转化大肠杆菌 DH5a 及验证结果第33页
   ·阳性菌落的菌液质粒提取第33-34页
   ·重组质粒转化农杆菌及验证结果第34-35页
   ·转基因再生植株的获得第35-39页
     ·水稻愈伤组织诱导第35-36页
     ·愈伤组织与根癌农杆菌的共培养第36-37页
     ·愈伤的筛选与分化第37-38页
     ·生根壮苗培养第38-39页
   ·转基因植株的分子检测第39-40页
     ·MYB44 转基因植株的检测第39页
     ·LWT1 转基因植株的检测第39-40页
   ·MYB44 转基因植株的表达与功能验证第40-45页
     ·转基因水稻植株的过量表达及诱导表达第40-41页
     ·转基因植株对干旱胁迫下的响应第41-43页
     ·植株离体叶片失水率的测定第43页
     ·转基因植株对甘露醇胁迫及盐胁迫的响应第43-45页
   ·LWT1 转基因植株的表达与功能验证第45-50页
     ·转基因水稻植株的过量表达及诱导表达第45-46页
     ·转基因植株对干旱胁迫的响应第46-48页
     ·转基因植株离体叶片失水率的测定第48页
     ·转基因植株对甘露醇胁迫的响应第48-50页
5 讨论第50-53页
   ·湿度对愈伤生长的影响第50页
   ·潮霉素对抗性愈伤的筛选第50页
   ·共培养方式对愈伤组织的影响第50-51页
   ·MYB44 和 LWT1 转基因植株的抗逆性第51-53页
6 结论第53-54页
参考文献第54-63页
缩写符号说明第63-64页
致谢第64-65页
作者简介第65-66页
附录:硕士期间发表论文及专利第66页

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