| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-14页 |
| 第1章 文献综述 | 第14-31页 |
| ·动物细胞培养技术及其应用概况 | 第14-18页 |
| ·动物细胞培养技术的发展历史 | 第14-15页 |
| ·动物细胞培养技术的应用 | 第15-17页 |
| ·动物细胞作为生物制品生产宿主细胞的优势 | 第17-18页 |
| ·动物细胞培养技术在抗体类药物研发和工业化生产中的应用 | 第18-23页 |
| ·抗体类药物的研发和市场发展概况 | 第18-21页 |
| ·动物细胞培养技术在抗体类药物生产中的应用 | 第21-22页 |
| ·动物细胞培养技术在TNFR-Fc抗体融合蛋白生产中的应用 | 第22-23页 |
| ·大规模动物细胞培养技术的现状与研究进展 | 第23-29页 |
| ·提高产物的比生成速率 | 第24-25页 |
| ·延长培养时间 | 第25-26页 |
| ·提高细胞密度 | 第26-27页 |
| ·动物细胞表达抗体的质量研究 | 第27-29页 |
| ·本文的研究内容、目的及意义 | 第29-31页 |
| 第2章 材料与方法 | 第31-40页 |
| ·实验材料 | 第31-33页 |
| ·细胞株 | 第31页 |
| ·培养基 | 第31页 |
| ·实验仪器与耗材 | 第31-32页 |
| ·实验试剂 | 第32-33页 |
| ·细胞培养 | 第33-35页 |
| ·种子细胞复苏 | 第33页 |
| ·种子细胞传代培养 | 第33页 |
| ·转瓶批培养 | 第33-34页 |
| ·反应器批培养 | 第34页 |
| ·反应器流加培养 | 第34页 |
| ·反应器的操作与控制 | 第34-35页 |
| ·分析方法 | 第35-38页 |
| ·细胞计数与活性测定 | 第35页 |
| ·营养物和代谢副产物的浓度测定 | 第35页 |
| ·TNFR-Fc的浓度及其唾液酸含量测定 | 第35-36页 |
| ·渗透压和二氧化碳分压测定 | 第36页 |
| ·CHO细胞干重及胞内蛋白总量测定 | 第36页 |
| ·细胞周期测定 | 第36页 |
| ·CHO细胞胞内pH测定 | 第36页 |
| ·荧光定量PCR | 第36-37页 |
| ·唾液酸转移酶的活性测定 | 第37-38页 |
| ·乳酸脱氢酶的活性测定 | 第38页 |
| ·唾液酸酶的活性测定 | 第38页 |
| ·动力学参数的计算和分析 | 第38-40页 |
| 第3章 CHO细胞生长代谢和TNFR-Fc生成的基本特性及其主要影响因素 | 第40-51页 |
| ·引言 | 第40页 |
| ·实验设计 | 第40-41页 |
| ·结果与讨论 | 第41-49页 |
| ·批培养过程中CHO细胞的生长、代谢和TNFR-Fc表达特性 | 第41-44页 |
| ·培养温度对CHO细胞生长和TNFR-Fc表达的影响 | 第44-47页 |
| ·细胞生长密度对TNFR-Fc表达的影响 | 第47-49页 |
| ·本章小结 | 第49-51页 |
| 第4章 培养温度对TNFR-Fc表达的作用机制 | 第51-70页 |
| ·引言 | 第51页 |
| ·实验设计 | 第51页 |
| ·结果与讨论 | 第51-68页 |
| ·培养温度对CHO细胞代谢的影响 | 第51-54页 |
| ·培养温度对CHO细胞生理状态的影响 | 第54-57页 |
| ·培养温度对TNFR-Fc基因转录过程的影响 | 第57-60页 |
| ·培养温度对TNFR-Fc翻译后修饰过程的影响 | 第60-64页 |
| ·培养温度影响TNFR-Fc唾液酸含量的作用机制 | 第64-68页 |
| ·本章小结 | 第68-70页 |
| 第5章 流加培养过程中细胞维持密度对TNFR-Fc表达的作用机制 | 第70-86页 |
| ·引言 | 第70页 |
| ·实验设计 | 第70页 |
| ·结果与讨论 | 第70-84页 |
| ·细胞维持密度对CHO细胞代谢的影响 | 第70-72页 |
| ·细胞维持密度对CHO细胞生理状态的影响 | 第72-76页 |
| ·细胞维持密度对TNFR-Fc基因转录过程的影响 | 第76-78页 |
| ·细胞维持密度对TNFR-Fc翻译后修饰过程的影响 | 第78-81页 |
| ·细胞维持密度影响TNFR-Fc蛋白唾液酸含量的作用机制 | 第81-84页 |
| ·本章小结 | 第84-86页 |
| 第6章 维持细胞高密度的两阶段流加培养过程优化 | 第86-93页 |
| ·引言 | 第86页 |
| ·实验设计 | 第86-88页 |
| ·维持细胞高密度的两阶段流加培养过程优化设计原则 | 第86页 |
| ·维持细胞高密度的两阶段流加培养过程实施方案 | 第86-88页 |
| ·结果与讨论 | 第88-92页 |
| ·维持细胞高密度的两阶段流加培养过程结果分析 | 第88-91页 |
| ·若干典型培养过程的结果比较 | 第91-92页 |
| ·本章小结 | 第92-93页 |
| 第7章 全文总结与展望 | 第93-98页 |
| ·全文总结 | 第93-96页 |
| ·本文创新点 | 第96页 |
| ·建议及展望 | 第96-98页 |
| 参考文献 | 第98-107页 |
| 致谢 | 第107-108页 |
| 研究成果 | 第108页 |
