| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-11页 |
| 1 文献综述 | 第11-20页 |
| ·引言 | 第11页 |
| ·植物MAPK级联途径 | 第11-14页 |
| ·植物中的MAPKKKs | 第12页 |
| ·植物中的MAPKKs | 第12-13页 |
| ·植物中的MAPKs | 第13-14页 |
| ·MAPK信号转导组分的细胞定位与响应的特异性 | 第14-15页 |
| ·MAPK信号转导特异性 | 第14页 |
| ·MAPK组分定位与移位机制 | 第14-15页 |
| ·植物中MAPK组分研究进展 | 第15-16页 |
| ·基因功能研究主要方法 | 第16-18页 |
| ·RNAi技术 | 第16-18页 |
| ·RNAi技术原理 | 第16-17页 |
| ·RNAi的作用特点 | 第17页 |
| ·RNAi技术的应用 | 第17-18页 |
| ·GFP/eGFP融合基因表达载体定位机制 | 第18页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第18-20页 |
| 2 材料和方法 | 第20-33页 |
| ·实验材料 | 第20-23页 |
| ·水稻材料 | 第20-21页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第21页 |
| ·菌株与质粒 | 第21-22页 |
| ·培养基 | 第22-23页 |
| ·细菌培养基 | 第22页 |
| ·水稻转化培养基 | 第22-23页 |
| ·实验方法 | 第23-33页 |
| ·水稻DNA提取 | 第23页 |
| ·PCR反应和电泳分析 | 第23-24页 |
| ·琼脂糖凝胶中DNA片段的回收 | 第24-25页 |
| ·质粒DNA的提取、酶切与连接 | 第25页 |
| ·感受态细胞的制备及转化 | 第25-27页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第25-26页 |
| ·重组质粒转化大肠杆菌 | 第26页 |
| ·重组质粒转化农杆菌 | 第26-27页 |
| ·生物信息学分析 | 第27页 |
| ·干扰载体构建 | 第27-28页 |
| ·目的片段的选择及获取 | 第27-28页 |
| ·中间载体及双元表达载体的构建 | 第28页 |
| ·根瘤农杆菌介导的水稻转化 | 第28-29页 |
| ·水稻的组织培养 | 第28-29页 |
| ·根瘤农杆菌的培养及其介导的水稻转化 | 第29页 |
| ·潮霉素抗性基因鉴定转基因植株 | 第29-30页 |
| ·水稻总RNA的半定量和实时定量荧光PCR分析 | 第30-31页 |
| ·水稻总RNA的抽提 | 第30页 |
| ·RNA的纯化及反转录 | 第30-31页 |
| ·半定量、real-time RT-PCR | 第31页 |
| ·田间主要农艺性状调查 | 第31页 |
| ·GFP/eGFP融合表达载体的构建 | 第31-32页 |
| ·OsMKK4-eGFP融合蛋白的亚细胞定位研究 | 第32-33页 |
| ·农杆菌介导的烟草转化 | 第32页 |
| ·亚细胞定位观察 | 第32-33页 |
| 3 结果与分析 | 第33-54页 |
| ·OsMKK4基因的定位与克隆 | 第33页 |
| ·OsMKK4基因序列分析 | 第33-39页 |
| ·OsMKK4基因全长cDNA分析 | 第33页 |
| ·OsMKK4基因编码蛋白序列分析 | 第33-36页 |
| ·OsMKK4基因理化性质分析 | 第33-34页 |
| ·OsMKK4基因亚细胞定位预测 | 第34-36页 |
| ·OsMKK4基因编码蛋白序列同源比较和系统发生分析 | 第36-39页 |
| ·OsMKK4基因表达特征 | 第39-40页 |
| ·干扰载体构建 | 第40-50页 |
| ·OsMKK4基因干扰载体构建过程 | 第40-43页 |
| ·RNAi载体的水稻转化 | 第43-44页 |
| ·转基因水稻阳性植株鉴定 | 第44-45页 |
| ·转基因水稻性状考察及表达量分析 | 第45-50页 |
| ·OsMKK4基因亚细胞定位研究 | 第50-54页 |
| ·OsMKK4-eGFP融合表达载体的构建 | 第50-52页 |
| ·亚细胞定位观察 | 第52-54页 |
| 4 讨论 | 第54-58页 |
| ·OsMKK4基因是MAPKKs家族C族成员 | 第54-55页 |
| ·OsMKK4基因表达量分析 | 第55-56页 |
| ·关于OsMKK4蛋白亚细胞定位分析 | 第56-57页 |
| ·研究展望 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-64页 |
| 附录 | 第64-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |