摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-11页 |
第一部分 绪论 | 第11-20页 |
·动物呼吸蛋白概述 | 第11-13页 |
·血蓝蛋白功能研究进展 | 第13-16页 |
·蓝蛋白的载氧功能 | 第13-14页 |
·蓝蛋白的酚氧化物酶活性 | 第14-15页 |
·蓝蛋白的抗菌与抗病毒活性 | 第15-16页 |
·血蓝蛋白的其它功能 | 第16页 |
·昆虫呼吸蛋白研究进展 | 第16-19页 |
·昆虫血蓝蛋白携氧功能研究进展 | 第16-17页 |
·昆虫血红蛋白携氧功能研究进展 | 第17-18页 |
·昆虫血红蓝蛋白与血红蛋白的物种分布 | 第18-19页 |
·本研究的目的与意义 | 第19-20页 |
第二部分 材料与方法 | 第20-32页 |
·材料 | 第20-21页 |
·飞蝗种群的选择与饲养 | 第20页 |
·飞蝗卵的孵化与保存 | 第20页 |
·中华绒螯蟹 | 第20页 |
·主要试剂药品 | 第20-21页 |
·主要仪器 | 第21页 |
·实验方法 | 第21-32页 |
·血淋巴氧结合曲线测定 | 第21-22页 |
·血淋巴蛋白浓度测定方法 | 第22-23页 |
·飞蝗卵RNA的提取 | 第23-24页 |
·cDNA的制备 | 第24页 |
·PCR | 第24-25页 |
·PCR产物的回收与纯化 | 第25页 |
·质粒载体的连接转化 | 第25-26页 |
·阳性克隆检测及测序 | 第26-27页 |
·重组蛋白的表达 | 第27-28页 |
·重组蛋白的纯化 | 第28-29页 |
·双链RNA(dsRNA)合成 | 第29-30页 |
·蝗卵dsRNA的注射 | 第30-31页 |
·实时荧光定量PCR反应(RT-PCR) | 第31-32页 |
第三部分 结果与分析 | 第32-46页 |
·飞蝗血蓝蛋白携氧功能的发现 | 第32-35页 |
·血淋巴氧结合曲线实验方案的可行性检验 | 第32-33页 |
·飞蝗血淋巴携氧活性的检测 | 第33-35页 |
·飞蝗血蓝蛋白的重组表达及活性检测 | 第35-38页 |
·血蓝蛋白亚基1(HC1)和亚基2(HC2)的重组表达 | 第36-37页 |
·重组蛋白HC1和HC2的活性检测 | 第37-38页 |
·飞蝗血蓝蛋白携氧功能的验证 | 第38-46页 |
·显微注射方法的改进 | 第39-40页 |
·东亚飞蝗HC2基因的dsRNA的制备 | 第40-41页 |
·HC2 RNAi后飞蝗HC1和HC2基因的表达水平 | 第41-43页 |
·HC2 RNAi对飞蝗卵发育的影响 | 第43-46页 |
第四部分 讨论与总结 | 第46-49页 |
·讨论 | 第46-48页 |
·总结 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-54页 |
附录 | 第54-59页 |
致谢 | 第59页 |