摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-9页 |
缩略词表 | 第9-10页 |
1 绪论 | 第10-21页 |
·课题的提出 | 第10-11页 |
·蚜虫生物学特性 | 第11-13页 |
·生活史周期 | 第11-12页 |
·取食和逃避宿主防御机制 | 第12-13页 |
·蚜虫防治技术研究进展 | 第13-17页 |
·化学防治 | 第13页 |
·生物防治 | 第13-16页 |
·基因工程防治 | 第16-17页 |
·物理防治 | 第17页 |
·RNAi 研究进展 | 第17-18页 |
·RNAi 作用机制 | 第17-18页 |
·RNAi 在蚜虫研究中的应用 | 第18页 |
·研究内容和技术路线 | 第18-19页 |
·主要研究内容 | 第18-19页 |
·技术路线 | 第19页 |
·本课题的特色与创新之处 | 第19-21页 |
2 材料与方法 | 第21-41页 |
·材料 | 第21-24页 |
·植物材料、实验桃蚜、质粒、菌株 | 第21页 |
·主要仪器设备 | 第21-22页 |
·主要化学试剂和试剂盒 | 第22页 |
·试剂的配置及培养基的配制 | 第22-24页 |
·实验方法 | 第24-41页 |
·总 RNA 提取 | 第24-25页 |
·质粒 DNA 提取 | 第25-26页 |
·核酸质量测定及纯化 | 第26页 |
·桃蚜 APCOO2 基因片段克隆及鉴定 | 第26-30页 |
·载体构建 | 第30-37页 |
·番茄转化及转基因番茄鉴定 | 第37-39页 |
·转基因番茄饲喂蚜虫 | 第39页 |
·番茄介导 RNAi 进行蚜虫防治效果检测 | 第39-41页 |
3 结果与分析 | 第41-55页 |
·桃蚜 APCOO2 基因片段的克隆及分析 | 第41-46页 |
·桃蚜总 RNA 的提取 | 第41页 |
·APCOO2 基因片段的克隆 | 第41-42页 |
·APCOO2 重组菌的筛选 | 第42-43页 |
·APCOO2 重组质粒的鉴定 | 第43页 |
·ApCOO2 序列测定 | 第43-44页 |
·PCOO2 基因生物信息学分析 | 第44-46页 |
·植物表达载体的构建与鉴定 | 第46-51页 |
·中间载体引入正向片段 | 第46-48页 |
·中间载体引入反向片段 | 第48-49页 |
·构建沉默载体 pBIN19::APCOO2i | 第49-51页 |
·番茄的遗传转化 | 第51-55页 |
·pBIN19::APCOO2i 沉默载体转化农杆菌 LBA4404 | 第51页 |
·农杆菌 LBA4404 介导的番茄转化 | 第51-52页 |
·转基因植株的 PCR 检测 | 第52-53页 |
·桃蚜 APCOO2 龄期表达水平检测 | 第53-55页 |
4 讨论 | 第55-56页 |
5 结论与展望 | 第56-57页 |
·主要结论 | 第56页 |
·后续研究工作展望 | 第56-57页 |
致谢 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-61页 |
附录 作者硕士期间发表的论文 | 第61页 |