| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 第1章 引言 | 第8-15页 |
| ·Kallistatin 概述 | 第8-11页 |
| ·Kallistatin 的发现及分布 | 第8页 |
| ·Kallistatin 的生物学功能 | 第8-11页 |
| ·肝纤维化药物研发概述 | 第11-12页 |
| ·毕赤酵母表达系统概述 | 第12-14页 |
| ·毕赤酵母表达系统的优势 | 第12-13页 |
| ·毕赤酵母表达系统表达量的影响因素 | 第13页 |
| ·提高外源蛋白的表达效率 | 第13-14页 |
| ·课题的来源及研究意义 | 第14-15页 |
| 第2章 重组人 Kallistatin 蛋白的发酵罐制备、纯化、鉴定 | 第15-39页 |
| ·材料 | 第15-20页 |
| ·试剂、药品与菌株 | 第15-16页 |
| ·主要实验仪器 | 第16-17页 |
| ·溶液配制 | 第17-20页 |
| ·实验方法 | 第20-29页 |
| ·高表达 GS115-KAL 毕赤酵母工程菌株的建立 | 第20-23页 |
| ·发酵罐技术大规模制备 KAL 蛋白 | 第23-25页 |
| ·KAL 蛋白的纯化和鉴定 | 第25-29页 |
| ·统计分析 | 第29页 |
| ·实验结果 | 第29-38页 |
| ·菌种的筛选与鉴定 | 第29-31页 |
| ·重组人 Kallistatin 蛋白发酵 | 第31-33页 |
| ·KAL 蛋白的纯化和鉴定 | 第33-38页 |
| ·本章小结 | 第38-39页 |
| 第3章 重组人 Kallistatin 蛋白抗肝纤维化相关生物学活性研究 | 第39-78页 |
| ·材料 | 第39-42页 |
| ·试剂、药品、细胞 | 第39页 |
| ·主要实验仪器 | 第39页 |
| ·溶液配制 | 第39-42页 |
| ·实验方法 | 第42-47页 |
| ·大鼠原代肝星状细胞的分离纯化 | 第42-43页 |
| ·细胞培养、冻存与复苏 | 第43-44页 |
| ·氧化应激模型构建 | 第44-45页 |
| ·细胞活性检测 | 第45页 |
| ·细胞凋亡检测 | 第45页 |
| ·细胞迁移性检测 | 第45-46页 |
| ·小管形成实验 | 第46页 |
| ·细胞内超氧化物检测 | 第46-47页 |
| ·免疫细胞化学 | 第47页 |
| ·统计分析 | 第47页 |
| ·实验结果 | 第47-77页 |
| ·细胞氧化应激模型的构建 | 第47-57页 |
| ·KAL 蛋白对细胞增殖的作用 | 第57页 |
| ·KAL 蛋白的抗氧化作用 | 第57-71页 |
| ·KAL 蛋白对血管生成的作用 | 第71-75页 |
| ·KAL 蛋白对大鼠原代肝星状细胞的作用 | 第75-77页 |
| ·本章小结 | 第77-78页 |
| 第4章 总结 | 第78页 |
| 创新点 | 第78页 |
| 后续工作 | 第78-80页 |
| 参考文献 | 第80-84页 |
| 致谢 | 第84-86页 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第86页 |