| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 第一章 前言 | 第12-21页 |
| 1 蜂王浆化学组成 | 第12-13页 |
| 2 蜂王浆生物活性 | 第13-15页 |
| ·抗衰老活性 | 第13页 |
| ·免疫调节活性 | 第13-14页 |
| ·抗肿瘤、抗菌作用 | 第14页 |
| ·促进细胞增殖作用 | 第14-15页 |
| ·其他生物活性 | 第15页 |
| 3 蜂王浆氨基酸、肽、蛋白类成分研究进展 | 第15-19页 |
| ·蜂王浆氨基酸研究进展 | 第15-16页 |
| ·蜂王浆肽类研究进展 | 第16-17页 |
| ·蜂王浆蛋白质研究进展 | 第17-19页 |
| 4 研究目的、意义及研究内容 | 第19-21页 |
| ·研究目的和意义 | 第19-20页 |
| ·主要研究内容 | 第20-21页 |
| ·蜂王浆主成分的测定 | 第20页 |
| ·蜂王浆蛋白的分级及目标蛋白级分的确定 | 第20页 |
| ·蜂王浆清蛋白提取工艺 | 第20页 |
| ·蜂王浆蛋白粗提取物的分离纯化 | 第20页 |
| ·目标蛋白结构的初步表征 | 第20页 |
| ·RJA-57抗氧化性活性研究 | 第20-21页 |
| 第二章 蜂王浆清蛋白提取工艺研究 | 第21-36页 |
| 1 实验材料与方法 | 第21-27页 |
| ·实验材料 | 第21页 |
| ·实验试剂和仪器 | 第21-22页 |
| ·主要化学试剂 | 第21-22页 |
| ·主要仪器和设备 | 第22页 |
| ·实验方法 | 第22-27页 |
| ·主要成分含量测定 | 第22-23页 |
| ·蜂王浆蛋白的分级 | 第23-24页 |
| ·蜂王浆蛋白各级分的制备及其活性研究 | 第24-25页 |
| ·清蛋白提取条件的优化 | 第25-27页 |
| 2 结果与分析 | 第27-35页 |
| ·蜂王浆主成分分析 | 第27-28页 |
| ·蜂王浆蛋白各级分的制备及目标级分的确定 | 第28页 |
| ·清蛋白等电点的测定 | 第28-29页 |
| ·清蛋白的SDS-PAGE分析 | 第29-30页 |
| ·清蛋白提取条件的优化 | 第30-35页 |
| ·缓冲液类型对清蛋白清除·OH自由基的影响 | 第30页 |
| ·pH对清蛋白提取效果的影响 | 第30页 |
| ·温度对清蛋白提取效果的影响 | 第30-31页 |
| ·NaCl浓度对清蛋白提取效果的影响 | 第31-32页 |
| ·提取时间对清蛋白提取效果的影响 | 第32页 |
| ·料液比对清蛋白提取效果的影响 | 第32-33页 |
| ·提取次数对清蛋白提取效果的影响 | 第33页 |
| ·pH对清蛋白清除·OH自由基的影响 | 第33页 |
| ·正交试验优化清蛋白提取条件 | 第33-35页 |
| 3 小结 | 第35-36页 |
| 第三章 清蛋白生物活性研究 | 第36-54页 |
| 1 材料与方法 | 第36-43页 |
| ·清蛋白的抗氧化性 | 第36-40页 |
| ·材料与试剂 | 第36-37页 |
| ·蜂王浆清蛋白主要成分分析 | 第37页 |
| ·化学发光法研究清蛋白的体外抗氧化性 | 第37-38页 |
| ·清蛋白对DPPH·自由基的清除作用 | 第38-39页 |
| ·清蛋白对脂质体过氧化的抑制作用 | 第39-40页 |
| ·清蛋白对正常小鼠免疫调节活性 | 第40-43页 |
| ·动物及分组 | 第40页 |
| ·剂量 | 第40页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第40-41页 |
| ·实验方法 | 第41-43页 |
| 2 结果与分析 | 第43-51页 |
| ·蜂王浆清蛋白提取物的抗氧化性 | 第43-48页 |
| ·蜂王浆清蛋白提取物主要成分分析 | 第43页 |
| ·化学发光法研究清蛋白的体外抗氧化性 | 第43-46页 |
| ·清蛋白对DPPH·自由基的清除作用 | 第46-47页 |
| ·清蛋白对脂质体过氧化的抑制作用 | 第47-48页 |
| ·清蛋白对正常小鼠的免疫调节作用 | 第48-51页 |
| ·蜂王浆清蛋白提取物对小鼠体重的影响 | 第48页 |
| ·对正常小鼠免疫器官的影响 | 第48页 |
| ·对小鼠脾淋巴细胞增殖能力的影响 | 第48-49页 |
| ·对NK细胞活性的影响 | 第49页 |
| ·对小鼠迟发型变态反应的影响 | 第49-50页 |
| ·对小鼠巨噬细胞吞噬鸡红细胞的影响 | 第50页 |
| ·对小鼠血清溶血素的影响 | 第50页 |
| ·对小鼠抗体生成细胞的影响 | 第50-51页 |
| ·对小鼠碳廓清实验的影响 | 第51页 |
| 3 讨论 | 第51-53页 |
| 4 小结 | 第53-54页 |
| 第四章 RJA-57的分离纯化 | 第54-68页 |
| 1 材料 | 第54-55页 |
| ·实验材料的制备 | 第54页 |
| ·主要试剂 | 第54-55页 |
| ·仪器和设备 | 第55页 |
| 2 方法 | 第55-59页 |
| ·Sephadex G-75凝胶过滤层析 | 第55-56页 |
| ·凝胶前处理 | 第55页 |
| ·上样 | 第55页 |
| ·洗脱 | 第55-56页 |
| ·Sephadex G-100凝胶过滤层析 | 第56页 |
| ·DEAE-52离子交换层析 | 第56-57页 |
| ·DEAE-52树脂前处理 | 第56页 |
| ·离子交换层析洗脱条件的选择 | 第56-57页 |
| ·DEAE-52树脂的再生 | 第57页 |
| ·进样 | 第57页 |
| ·Sephadex G-100凝胶与DEAE-52离子交换柱相结合的方法 | 第57-58页 |
| ·SDS-PAGE | 第58页 |
| ·Native-PAGE | 第58页 |
| ·目标蛋白组分纯度的鉴定 | 第58-59页 |
| ·SDS-PAGE和Native-PAGE | 第58-59页 |
| ·Sephadex G-100凝胶过滤 | 第59页 |
| ·紫外吸收光谱 | 第59页 |
| ·目标蛋白质等电点的测定 | 第59页 |
| 3 结果与分析 | 第59-67页 |
| ·Sephadex G-75分离清蛋白 | 第59页 |
| ·Sephadex G-100分离清蛋白 | 第59-60页 |
| ·DEAE-52分离清蛋白 | 第60-61页 |
| ·洗脱液pH的选择 | 第60页 |
| ·洗脱液离子强度的选择 | 第60-61页 |
| ·清蛋白过DEAE-52离子交换柱 | 第61页 |
| ·SDS-PAGE | 第61-63页 |
| ·Sephadex G-100凝胶与DEAE-52离子交换柱相结合的方法 | 第63-64页 |
| ·RJA-57纯度鉴定 | 第64-66页 |
| ·SDS-PAGE和Native-PAGE | 第64-65页 |
| ·Sephadex G-100凝胶色谱鉴定RJA-57纯度 | 第65页 |
| ·紫外吸收光谱鉴定RJA-57纯度 | 第65-66页 |
| ·RJA-57等电点的测定 | 第66-67页 |
| 4 小结 | 第67-68页 |
| 第五章 RJA-57结构初步表征及抗氧化活性研究 | 第68-87页 |
| 1 主要试剂 | 第68-69页 |
| 2 主要仪器和设备 | 第69页 |
| 3 实验方法 | 第69-72页 |
| ·RJA-57氨基酸组成分析 | 第69页 |
| ·RJA-57表面疏水性的测定 | 第69页 |
| ·RJA-57游离巯基和总巯基测定 | 第69-70页 |
| ·RJA-57的荧光光谱 | 第70-71页 |
| ·实验条件 | 第70页 |
| ·RJA-57的内源荧光 | 第70页 |
| ·荧光淬灭 | 第70-71页 |
| ·RJA-57红外光谱 | 第71页 |
| ·RJA-57圆二色谱分析 | 第71页 |
| ·目标蛋白抗氧化活性初步研究 | 第71-72页 |
| ·对DPPH·自由基的清除作用 | 第71页 |
| ·对DNA损伤的保护作用 | 第71页 |
| ·对脂质过氧化的抑制作用 | 第71-72页 |
| 4 结果与分析 | 第72-86页 |
| ·RJA-57氨基酸组成 | 第72页 |
| ·表面疏水性及巯基、二硫键分析 | 第72-73页 |
| ·RJA-57的荧光光谱 | 第73-79页 |
| ·RJA-57的内源荧光 | 第73-76页 |
| ·RJA-57的荧光淬灭 | 第76-79页 |
| ·RJA-57的FT-IR光谱 | 第79-80页 |
| ·RJA-57的圆二色性光谱 | 第80-81页 |
| ·RJA-57抗氧化活性初步研究 | 第81-86页 |
| ·对DPPH·自由基的清除作用 | 第81-83页 |
| ·对DNA损伤的保护作用 | 第83-84页 |
| ·对脂质过氧化的抑制作用 | 第84-86页 |
| 5 讨论与小结 | 第86-87页 |
| 第六章 结论 | 第87-89页 |
| 1 目标蛋白的确定及提取工艺优化 | 第87页 |
| 2 清蛋白生物活性研究 | 第87页 |
| 3 RJA-57的分离纯化 | 第87-88页 |
| 4 RJA-57结构初步表征及抗氧化活性研究 | 第88-89页 |
| 主要参考文献 | 第89-97页 |
| 致谢 | 第97页 |
