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DACH1在结直肠癌中的表观遗传学调控及其在TGF-β和Wnt信号通路中的作用

中文摘要第1-9页
Abstract第9-11页
缩略词表第11-12页
第一章 引言第12-17页
第二章 DACH1 在结直肠癌细胞系中的表达及甲基化改变第17-32页
 第一节 试剂材料第17-20页
     ·实验材料第17页
     ·主要实验仪器第17-18页
     ·实验试剂与耗材第18-20页
 第二节 实验方法第20-26页
     ·细胞培养及药物干预第20页
     ·细胞总 RNA 提取及 RT-PCR第20-22页
     ·细胞 DNA 提取及甲基化特异性 PCR(MSP)第22-24页
     ·亚硫酸盐基因组测序(Bisulfite genomic sequencing,BGS)第24-26页
 第三节 实验结果第26-29页
     ·DACH1 在结直肠癌细胞系中的甲基化改变第26-28页
     ·DACH1 在结直肠癌细胞系中的表达变化第28-29页
 第四节 讨论第29-31页
 小结第31-32页
第三章 DACH1 在结直肠癌组织中的表达及甲基化改变与临床病理关系研究第32-43页
 第一节 试剂材料第32-34页
     ·组织标本第32页
     ·主要实验仪器和设备第32-33页
     ·实验试剂与耗材第33-34页
 第二节 实验方法第34-37页
     ·DACH1 免疫组织化学染色第34-36页
     ·结肠癌组织基因组 DNA 制备及 MSP第36-37页
     ·统计学处理第37页
 第三节 实验结果第37-41页
     ·DACH1 在结肠癌和癌旁组织中的表达差异第37-38页
     ·DACH1 在结肠癌组织标本中的甲基化改变第38-39页
       ·例结直肠癌患者 DACH1 甲基化状态与临床病理资料分析第39-41页
 第四节 讨论第41-42页
 小结第42-43页
第四章 DACH1 对 TGF-β和 Wnt 信号通路的影响第43-56页
 第一节 试剂材料第44-45页
     ·实验材料及设备第44页
     ·实验试剂及耗材第44-45页
 第二节 实验方法第45-47页
     ·Western blot第45-46页
     ·双荧光素酶报告基因系统检测第46-47页
     ·免疫组织化学染色(IHC)第47页
     ·统计分析第47页
 第三节 实验结果第47-53页
     ·DACH1 抑制 TGF-β信号通路的活性第47-49页
     ·DACH1 抑制 Wnt 信号通路的活性第49-53页
 第四节 讨论第53-55页
 小结第55-56页
第五章 DACH1 在体外、体内实验中的抑癌作用第56-68页
 第一节 试剂材料第56-57页
     ·实验材料和设备第56页
     ·实验试剂和耗材第56-57页
     ·实验动物第57页
 第二节 实验方法第57-60页
     ·细胞增殖实验第57页
     ·克隆形成实验第57-58页
     ·细胞凋亡及周期检测第58-59页
     ·Western blot 法检测 DACH1 及下游效应蛋白表达第59页
     ·裸鼠成瘤实验第59-60页
     ·统计分析第60页
 第三节 实验结果第60-65页
     ·DACH1 在体外实验中的抑癌作用第60-62页
     ·DACH1 在体内实验中的抑癌作用第62-65页
 第四节 讨论第65-67页
 小结第67-68页
第六章 结论第68-69页
参考文献第69-75页
文献综述(1)第75-85页
 参考文献第80-85页
文献综述(2)第85-100页
 Referenses第94-100页
攻读学位期间发表文章情况第100-101页
致谢第101-102页

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