| 缩略词表 | 第1-8页 |
| 中文摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 前言 | 第11-15页 |
| 材料与方法 | 第15-25页 |
| 1．材料 | 第15-17页 |
| ·菌株与细胞株 | 第15页 |
| ·质粒 | 第15页 |
| ·常用分子生物学试剂盒 | 第15页 |
| ·其它分子生物学试剂和化学试剂 | 第15-16页 |
| ·细胞培养试剂 | 第16页 |
| ·其它分子生物学试剂和化学试剂 | 第16页 |
| ·抗体 | 第16-17页 |
| ·主要实验仪器 | 第17页 |
| 2. 方法 | 第17-25页 |
| ·重组质粒构建与鉴定 | 第17-18页 |
| ·哺乳动物细胞的转染 | 第18页 |
| ·实时荧光定量（Real-time）RT-PCR | 第18-19页 |
| ·实时荧光定量（Real-time）RT-PCR（miRNA） | 第19-20页 |
| ·转录激活活性测定 | 第20页 |
| ·免疫共沉淀（IP） | 第20-21页 |
| ·染色质免疫共沉淀（ChIP） | 第21页 |
| ·慢病毒包装 | 第21页 |
| ·哺乳动物细胞稳定克隆的制备 | 第21-22页 |
| ·细胞生长分析 | 第22页 |
| ·软琼脂试验 | 第22页 |
| ·克隆形成试验 | 第22页 |
| ·划痕试验 | 第22-23页 |
| ·细胞 migration and invasion试验 | 第23页 |
| ·裸鼠原位成瘤试验 | 第23页 |
| ·裸鼠成瘤转移试验 | 第23页 |
| ·免疫组织化学 | 第23-24页 |
| ·统计分析 | 第24-25页 |
| 结果 | 第25-58页 |
| 1. 调控HPIP基因的microRNA筛选 | 第25-28页 |
| ·筛选调控HPIP基因的microRNA | 第25-26页 |
| ·多种肝癌细胞系中过表达及敲低miR-148a对HPIP蛋白表达的影响 | 第26页 |
| ·mRNA水平检测miR-148a对HPIP基因转录的影响 | 第26-27页 |
| ·荧光素酶报告基因活性检测miR-148a负调控HPIP | 第27-28页 |
| 2. MiR-148a对HPIP下游基因的调控 | 第28-32页 |
| ·MiR-148a基因外源高表达肝癌细胞模型的建立 | 第29页 |
| ·MiR-148a调控AKT、ERK表达 | 第29-30页 |
| ·MiR-148a调控mTOR信号通路 | 第30-31页 |
| ·验证miR-148a是否通过HPIP调控的AKT、ERK进而调控mTOR信号通路 | 第31-32页 |
| 3. 调控miR-148a机制的研究 | 第32-40页 |
| ·HBx蛋白调控miR-148a表达 | 第33-35页 |
| ·HBx对miR-148a靶基因改变的选择性 | 第35页 |
| ·HBx调控miR-148a的分子机制 | 第35-40页 |
| ·HBx与P53 间相互作用检测 | 第35-36页 |
| ·HBx通过miR-148a调控HPIP的表达依赖野生型P53 | 第36-37页 |
| ·确定miR-148a对P53 应答的最小启动子 | 第37-38页 |
| ·HBx抑制P53 与miR-148a启动子结合 | 第38-39页 |
| ·HBx通过抑制miR-148a表达升高HPIP表达水平 | 第39-40页 |
| 4.MiR-148a的功能研究 | 第40-48页 |
| ·MiR-148a对肝癌细胞生长、迁移、侵袭转移的影响 | 第40-43页 |
| ·MiR-148a对肝癌细胞生长的影响 | 第40-42页 |
| ·在miR-148a抑制肝癌细胞生长是通过抑制靶基因HPIP实现的 | 第42-43页 |
| ·MiR-148a对肝癌细胞迁移能力的影响 | 第43-45页 |
| ·MiR-148a对肝癌细胞侵袭转移能力的影响 | 第45-47页 |
| ·MiR-148a在HBx蛋白对肝细胞生长和迁移能力的影响中起关键作用 | 第47-48页 |
| 5. MiR-148a影响HCC细胞侵袭转移的机制研究 | 第48-52页 |
| ·MiR-148a抑制EMT | 第48-49页 |
| ·HBx通过抑制miR-148a激活EMT | 第49-50页 |
| ·HPIP通过调控mTOR通路激活EMT，促进肝癌细胞增殖、迁移和侵袭转移能力 | 第50-52页 |
| 6．动物试验检测miR-148a生物学功能 | 第52-54页 |
| ·MiR-148a 对HCC裸鼠成瘤的影响 | 第52-53页 |
| ·MiR-148a 对HCC转移的影响 | 第53-54页 |
| 7．MiR-148a和HPIP在HCC组织中的表达及与HBV感染三者之间的关系 | 第54-58页 |
| ·MiR-148a在HCC组织中的表达及与HBV感染的关系 | 第54-56页 |
| ·HPIP在HCC组织中的表达及与HBV感染的关系 | 第56-57页 |
| ·MiR-148a与HPIP在HCC组织中相关性分析 | 第57-58页 |
| 讨论 | 第58-61页 |
| 结论 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-69页 |
| 文献综述 | 第69-73页 |
| 发表文章 | 第73-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
